张煜
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组腺病毒Ad-CMV-TK的构建及其对Lewis细胞的抑制作用被引量：3
- 2009年
- 目的构建重组腺病毒Ad-CMV-TK,并检测Ad-CMV-TK/GCV系统对小鼠Lewis肺癌细胞的抑制作用。方法PCR扩增HSV-TK基因,以复制缺陷型腺病毒为载体构建重组腺病毒Ad-CMV-TK,在HEK293细胞中包装,CsCl2梯度离心法纯化后,感染Lewis肺癌细胞,Western blot检测HSV-TK蛋白的表达;MTT法检测Ad-CMV-TK/GCV系统对Lewis细胞的体外抑制作用;同时检测Ad-CMV-TK/GCV系统对C57荷瘤小鼠的抑瘤作用。结果重组腺病毒Ad-CMV-TK感染的Lewis细胞可特异地表达HSV-TK蛋白,Ad-CMV-TK/GCV系统在体外能明显抑制Lewis细胞的生长,当GCV浓度为100μmol/L时,Lewis细胞的存活率仅为16%;在体内能明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,与Ad-Blank/GCV对照组和PBS对照组相比,差异具有统计学意义。结论已成功构建了重组腺病毒Ad-CMV-TK,Ad-CMV-TK/GCV系统在体内及体外对小鼠Lewis肺癌细胞均有明显的抑制作用,为进一步研究其抗肿瘤机制及应用奠定了基础。
- 张煜于湘辉查晓孔维
- 关键词：胸苷激酶重组腺病毒更昔洛韦
- HIV多抗原位点同源序列合成基因的表达及活性鉴定
- 2008年
- 目的:在原核表达载体系统中对HIV-1gp41/gp120和HIV-2gp125/gp36外膜蛋白多个抗原位点同源序列合成基因进行表达、纯化并鉴定其活性。方法:人工合成含HIV-1gp41的3个抗原位点、HIV-1gp120的2个抗原位点、HIV-2gp125的3个抗原位点和HIV-2gp36的1个抗原位点的串联基因,克隆到原核表达载体pRSETB中,构建重组表达质粒pRSETB-env,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达,采用金属离子亲和层析技术纯化表达蛋白,逐渐降低尿素浓度使目的蛋白复性,免疫印迹和ELISA法分别对表达产物进行鉴定。结果:目的基因在BL21中有较高表达率,纯化后表达蛋白经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)可见相对分子质量约44000的蛋白带,与设计相对分子质量相符。免疫印迹、ELISA试验显示pRSETB-env质粒的HIV-1/2表达蛋白与HIV-1及HIV-2患者血清都能较好地结合,与其他患者血清无交叉反应。结论:成功构建了由HIV-1/2外膜蛋白多个抗原位点串联基因片段的表达载体pRSETB-env,并在原核细胞中高效表达,表达蛋白经纯化后纯度较高,并具有良好特异性和活性。
- 杨怀宁徐卉浦昀于湘晖张煜赵大力孙志伟
- 关键词：人免疫缺陷病毒合成基因活性鉴定
- 有机锗多酸衍生物的抗肿瘤作用及其机制被引量：12
- 2004年
- 背景与目的:对有机锗多酸衍生物进行体外毒性、抑瘤率和对瘤细胞周期影响的研究,为临床应用提供科学依据。材料与方法:采用MTT法检测有机锗多酸衍生物对FL、L929的体外毒性效应,对SMMC-7721、Hela、K562的体外抑瘤效应,流式细胞仪单荧光染色法检测有机锗多酸衍生物对SMMC-7721的细胞周期影响。结果:①有机锗多酸衍生物在160.00 μg/ml以下时对FL、L929没有任何毒副作用,甚至有促进细胞生长的作用,160.00-1 280.00μg/ml范围内,随剂量增大毒性也增强。②有机锗多酸衍生物对SMMC-7721、Hela、K562的体外抑瘤效应曲线均为双峰曲线,对SMMC-7721、K562体外抑瘤率的第一个峰值在2.50μg/ml时分别是12.6％、32.8％,对Hela体外抑瘤率的第一个峰值在5.00μg/ml时,是10.6％,之后随剂量增大而减少,到80.00-1 280.00 μg/ml范围内,随剂量增加抑瘤率升高,到1 280.00μg/ml时,对上述3种细胞的抑瘤率分别达到66％、59.9％、65.8％。③有机锗多酸衍生物对SMMC-7721在5.00和320.00 μg/ml时作用48 h,均能延长G0,/G1期,缩短S、G2期。结论:有机锗多酸衍生物在微量时,对SMMC-7721、Hela、K562的生长有抑制作用,对SMMC-7721细胞周期有影响。
- 张煜王宝贵张桂英董晓路
- 关键词：有机锗细胞周期
- 醋花生、食醋的降血脂作用比较被引量：5
- 2003年
- 目的 :比较醋花生、食醋的降血脂作用。方法 :用正庚烷 -异丙醇抽提法测定血清甘油三酯( TG)含量 ,用邻苯二甲醛 -浓硫酸显色法分别测定血清总胆固醇 ( TC)和高密度脂蛋白 ( HDL- C)含量。结果 :醋花生组 TG含量与食醋组和对照组比较差异分别具有显著性 ( P<0 .0 5 )和非常显著性( P<0 .0 1 ) ,醋花生组体脂与食醋组和对照组比较差异分别具有显著性 ( P<0 .0 5 )和非常显著性( P<0 .0 1 )。结论
- 张桂英王宝贵刘娅赵林伊张煜
- 关键词：醋酸甘油三酯类胆固醇脂蛋白类HDL胆固醇降血脂
- 单纯疱疹病毒胸苷激酶多克隆抗体的制备
- 2008年
- 目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础。方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆入表达载体pRSETB中进行表达,以纯化的表达产物免疫家兔制备多克隆抗血清,进行Western blotting鉴定。结果:用IPTG诱导后,表达出相对分子质量(Mr)约43000的融合蛋白,免疫家兔制备的兔血清,第2～5周每周采血1次,Western blotting检测均获得特异性蛋白带;最后一次样品3个稀释度(1∶1000、1∶3000、1∶5000)的Western blotting分析仍可以检出蛋白质带。结论:成功获得了特异性强和滴度高的HSV-TK多克隆抗体。
- 张煜于湘辉查晓王安荣孔维
- 关键词：单纯疱疹病毒属胸苷激酶基因表达多克隆抗体
