付海京
- 作品数：18 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
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- siRNA抑制HER2/neu过表达肺腺癌细胞生长和增殖
- 2006年
- 背景与目的:30%NSCLC存在HER2/neu过表达,与肿瘤发生、转移、肿瘤血管形成、抗凋亡及化疗耐药等有关。本文通过RNA干涉抑制肺腺癌细胞SPC-A-1 HER2/neu过表达,观察肿瘤细胞周期、增殖及集落形成能力的变化。方法:构建针对HER2/neu的siRNA重组质粒,稳定转染SPC-A-1,通过RT-PCR和W esternB lot检测HER2/neu表达;FCM分析细胞周期;MTT法观察细胞增殖,绘制细胞生长曲线;平板集落形成实验检测肿瘤细胞的集落形成能力。结果:成功构建了HER2/neu的siRNA重组质粒,稳定转染靶细胞后可显著降低HER2/neu表达;与亲代细胞相比,G0/G1期细胞增加17.1%,S期细胞减少12.8%;细胞生长速度减慢,集落S1抑制率达到49.0%。结论:针对HER2/neu的siRNA可以显著降低肺腺癌细胞过表达HER2/neu,肿瘤细胞阻滞于G0/G1期,造成细胞增殖减慢,集落形成能力明显下降。因此,siRNA对过表达HER2/neu肺癌的治疗具有潜在应用价值。
- 任新玲钱桂生付海京鲍炜王涛张瑞张立红贾林涛杨安钢
- 关键词：SIRNAHER2/NEU肺腺癌集落形成
- 针对ERα的RNA干涉对人乳腺癌Bcap-37细胞生长的抑制作用
- 2006年
- 目的:探讨针对雌激素受体(ERα)分子的RNA干涉对肿瘤细胞生长的影响.方法:人工合成编码siRNA的脱氧寡核苷酸链,经磷酸化后退火连接进pSUPER载体.挑取和扩增序列正确的重组载体,稳定转染Bcap-37细胞后分别以RT-PCR和间接免疫荧光检测mRNA及蛋白质的表达情况,MTT法检测RNAi对细胞生长的影响.结果:siRNA表达载体转染后ERα表达水平明显降低,细胞增殖减慢.结论:针对ERα的RNA干涉可在体外抑制Bcap-37细胞生长.
- 付海京贾林涛鲍炜赵晶孟艳玲王成济杨安钢
- 关键词：雌激素受体ΑRNA干涉基因治疗
- 针对HER2的RNA干涉抑制人胃癌细胞的生长和侵袭
- 目的:探讨针对HER2分子的RNA干涉对人胃癌细胞生长和侵袭的影响。方法:构建了针对癌基因HER2的siRNA表达载体,分别命名为pSUPER-sihe1和pSUPER-sihe2,将实验组载体与对照载体转染细胞后,通过...
- 鲍炜付海京孟艳玲杨安钢
- 关键词：RNA干涉
- 文献传递
- HER2 siRNA抑制肺癌细胞增殖的实验研究
- 为构建针对HER2的RNA干涉载体,观察对HER2表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响。设计和合成长度为64 nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pcDNA3质粒载体,转化 DH5α菌株,提取质粒,转染过表达...
- 任新玲钱桂生付海京鲍炜杨安钢
- 文献传递
- HER2 siRNA抑制肺癌细胞增值的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的构建针对HER2的RNA干涉载体,观察对HER2表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响。方法设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pcD-NA3质粒载体,转化DH5α菌株,提取质粒,转染过表达HER2的肺腺癌细胞系SPC-A-1,RT-PCR检测HER2的mRNA表达,Western Blot和间接免疫荧光法检测HER2的蛋白表达,FCM分析细胞周期变化,MTT法观察细胞生长。结果成功构建了HER2特异性RNA干涉载体pcDNA3～siHER2;瞬时转染SPC-A-1细胞,HER2的mRNA及蛋白表达均降低;G_1期细胞较亲代增加9.9%;肿瘤细胞增殖速度减慢(P<0.05)。结论成功构建了HER2 RNA干涉载体,转染后可有效降低肺腺癌细胞系SPC-A-1 HER2的mRNA转录及蛋白水平表达,阻滞转染细胞于G_1期,造成转染细胞生长速度减慢,这有望为肺癌基因治疗提供一种选择手段。
- 任新玲钱桂生付海京鲍炜杨安钢
- 关键词：SIRNARNA非小细胞肺癌
- 针对HER2/neu的siRNA对非小细胞肺癌细胞生长的抑制作用被引量：4
- 2006年
- 目的:构建针对HER2/neu的RNA干涉载体,观察对HER2/neu表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响.方法:设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pSUPER质粒载体,转化DH5α菌株,提取质粒,转染过表达HER2/neu的肺腺癌细胞系SPCA1,RTPCR检测HER2/neu的mRNA表达,Westernblot和间接免疫荧光法检测HER2/neu的蛋白表达,FCM分析细胞周期变化,MTT法观察细胞生长.结果:肺腺癌细胞系SPCA1存在HER2/neu过表达;成功构建了HER2/neu特异性RNA干涉载体pSUPERsiHER2;瞬时转染SPCA1细胞,HER2/neu的mRNA及蛋白表达均降低;G1期细胞较亲代增加9.9%;肿瘤细胞增殖速度减慢(P<0.05).结论:成功构建了HER2/neuRNA干涉载体,转染后可有效降低肺腺癌细胞系SPCA1HER2/neu的mRNA转录及蛋白水平表达,阻滞转染细胞于G1期,造成转染细胞生长速度减慢,这有望为肺癌基因治疗提供一种选择手段.
- 任新玲钱桂生鲍炜付海京贾林涛张瑞王涛许彦鸣杨安钢
- 关键词：SIRNARNA干涉HER2/NEU癌细胞生长
- OPRM1基因多态性对癌痛患者使用芬太尼贴剂镇痛效应的影响
- 目的 观察OPRM1基因多态性对癌痛患者使用芬太尼贴剂镇痛效应的影响.方法 采用疼痛VAS评分法对123例癌痛患者使用芬太尼贴剂前后的疼痛程度进行评估，记录病人达到最佳疗效时使用芬太尼贴剂的用量.利用聚合酶链反应-限制性...
- 张群王守星黄桂春付海京陈龙邦
- EphA2蛋白在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义被引量：1
- 2014年
- 目的探讨EphA2蛋白在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达情况及其与临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组化EnVision法检测72例DLBCL及10例正常淋巴结组织中EphA2蛋白的表达情况,分析DLBCL组织中EphA2蛋白表达与性别、年龄、分期、B症状、乳酸脱氢酶(LDH)、国际预后指数(IPI)及病理分型等临床病理特征的关系,随访DLBCL患者的生存情况并分析中位生存期(OS)和无进展生存期(PFS),同时采用Cox多因素分析影响预后的独立因素。结果 DLBCL组织中EphA2蛋白的阳性表达率为58.3%(42/72),高于正常淋巴结组织的20.0%(2/10),差异有统计学意义(P<0.05);EphA2蛋白表达与分期、病理分型有关,而与性别、年龄、B症状、LDH和IPI均无关(P>0.05)。全组的中位PFS和OS分别为15.5和22.0个月,LDH是影响PFS和OS的独立预后因素,IPI仅是影响PFS的独立预后因素,分期、EphA2蛋白表达均是影响OS的独立预后因素(P<0.05)。结论 EphA2蛋白在DLBCL中高表达,其表达与分期、病理分型有关,EphA2阳性表达提示预后不佳。
- 黄小银王建东孙茜付海京管晓翔王靖华
- 关键词：弥漫性大B细胞淋巴瘤免疫组织化学EPHA2预后
- HER2阳性胃癌转移的分子机制及其干涉
- HER2/neu是表皮生长因子受体家族(EGFR)的第二位成员,EGFR家族,也称为HER或ErbB家族,在细胞信号转导中发挥重要作用,是细胞生长、分化和存活的重要调节者。人HER2/neu基因定位于17号染色体长臂,表...
- 付海京
- 关键词：CD44CXCR4胃癌
- 文献传递
- 靶向于HER2的siRNA表达载体在人乳腺癌细胞SKBr-3中的表达被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨针对HER2分子的RNA干涉对乳腺癌细胞生长的影响.方法:人工合成DNA,经退火磷酸化后克隆入pSUPER载体.基因转染后通过观察细胞形态和细胞计数等方法验证发夹状小干涉RNA(siRNA)对细胞生长状态的影响,以激光共聚焦检测基因表达情况.结果:siRNA表达载体转染后可以引起SKBr-3细胞大量死亡,间接免疫荧光检测出HER2蛋白表达降低.结论:针对HER2进行RNA干涉可在体外抑制SKBr-3细胞生长.
- 鲍炜张立红付海京贾林涛张勇刘家云任新玲温伟红孟艳玲王成济杨安钢
- 关键词：RNA干涉基因治疗
