吴姿蓉
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：广州医科大学基础学院病原生物学与免疫学教研室更多>>
- 发文基金：广州市属高校科技计划项目广东省高等教育教学改革项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 伯氏疟原虫环子孢子蛋白N端和N+C端与肝细胞靶向性作用的研究
- 疟原虫环子孢子蛋白（Circumsporozoite protein，CSP）是疟原虫在子孢子阶段表达的一个重要蛋白质，均匀分布于整个子孢子表面。CSP主要由3个部分组成：含信号肽和I区的N端、中央重复区以及含有锚状序列...
- 吴姿蓉
- 关键词：伯氏疟原虫环子孢子蛋白肝细胞
- 文献传递
- 伯氏疟原虫CSP基因N端蛋白靶向肝细胞的研究
- 2015年
- 目的研究伯氏疟原虫CSP基因的N端蛋白与小鼠肝细胞膜HPSGs受体结合后在体外、体内的肝组织靶向性。方法将伯氏疟原虫CSP基因N端片段(PbCSP-N)克隆入原核表达质粒pET-28α,经IPTG诱导表达重组蛋白,经亲和层析纯化后采用Western blot方法鉴定;采用Pull-down方法检测PbCSP-N蛋白与小鼠肝细胞表面受体硫酸乙酰肝素糖蛋白(Heparan sulfate proteoglycan,HSPG)的结合力;应用免疫组化、放射性碘标记示踪方法检测该蛋白在体外、体内特异性靶向小鼠肝组织作用。结果成功构建PbCSP-N原核表达质粒并表达、纯化出PbCSP-N重组蛋白(15ku),Pull-down方法证实该蛋白可与小鼠肝细胞膜HPSGs受体结合,免疫组化试验显示该重组蛋白定位于正常小鼠肝细胞膜,表明该蛋白可特异结合正常小鼠肝细胞膜;放射性碘(125I)标记示踪显示,标记的重组蛋白在注射1、2、4、6、12h后在小鼠肝脏分布较多,表明该重组蛋白可靶向正常小鼠肝组织。结论伯氏疟原虫CSP基因N端蛋白与肝细胞膜HPSGs受体结合后在体内、外靶向肝细胞,可作为肝细胞靶向性药物候选分子。
- 吴姿蓉古文雅麦晶莹陈晓湘袁竹青李美丽马长玲
- 关键词：CSP肝细胞
- 伯氏疟原虫CSP片段与肝细胞特异结合的生物学特性
- 2013年
- 目的明确去除伯氏疟原虫CSP基因的中央重复序列不影响该蛋白的膜定位及与肝细胞特异结合的特性。方法将去除中央重复序列的伯氏疟原虫CSP基因片段(PbCSP’)克隆入原核表达质粒pGEX-4T-1,在大肠杆菌BL21/DE3中诱导表达,纯化重组蛋白,免疫大鼠获得相应抗体;用流式细胞仪筛选表达EGFP-PbCSP’的Hela细胞,应用Confocal显微镜及免疫组化方法观察表达的蛋白是否定位于细胞膜及能否与小鼠肝癌细胞(H22)特异结合。结果 pGEX-PbCSP’的原核表达及纯化、免疫大鼠获得抗体,在Hela细胞表达的EGFP-PbCSP’蛋白定位于细胞膜,并能与小鼠肝癌细胞(H22)特异结合。结论去除中央重复序列的伯氏疟原虫CSP片段与肝细胞特异结合,为进一步研究其是否可作为肝细胞的靶向分子奠定了基础。
- 吴姿蓉余新炳李艳文陈晓湘袁竹青马长玲
- 关键词：伯氏疟原虫CSP肝细胞
