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蜘蛛牵引丝蛋白MaSp1原核表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：1: 2014年; 目的通过基因工程手段实现牵引丝关键组成蛋白MaSp1在大肠杆菌中的异源表达,并对其进行分离纯化,从而建立基因工程蜘蛛丝基因序列串联拼接、载体构建以及原核表达与纯化的关键技术体系。方法利用同尾酶连接法对合成的基因工程蜘蛛丝基因单体序列进行串联拼接,获得多倍串联体克隆重组子,将鉴定正确的多倍串联体克隆重组子与原核表达载体pET28a(+)连接,转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导其表达,表达产物通过SDS-PAGE和Western印迹进行鉴定。在此基础上对工程菌进行高密度发酵,所获蛋白通过硫酸铵分级分离方法进行纯化。结果与结论成功构建了基因工程蜘蛛丝MaSp1多串联体的表达载体,原核表达蛋白的相对分子质量与预期一致,且纯化的目的蛋白纯度达80%以上。上述研究工作为开展基因工程蜘蛛丝蛋白的规模化制备建立了关键技术方法,并为后续基因工程蜘蛛丝的人工纺丝提供必要的前提和工作基础。; 乔鑫王妍李俊杰段翠密王海滨周瑾杜芝燕王常勇; 关键词：基因工程原核表达蛋白质纯化

溶血磷脂酸酰基转移酶β促进人肺成纤维细胞的增殖、迁移与黏附被引量：2: 2012年; 目的分析溶血磷脂酸酰基转移酶β(lysophosphatidic acid acyltransferase,LPAATβ)在多种细胞系中的表达情况及其过表达对细胞体外增殖、迁移与黏附的影响。方法通过免疫印迹实验检测LPAATβ在多种细胞中的表达水平;构建pcDNA3.1A(+)/LPAATβ真核表达载体,转染人肺成纤维细胞(human lung fibroblast,HLF)并筛选稳定转染细胞株;通过MTT细胞增殖实验分析过表达LPAATβ对HLF细胞体外增殖的作用,通过划痕修复实验分析稳定株细胞的体外迁移能力,利用细胞黏附实验分析稳定株细胞对细胞外基质成分Matrigel的黏附情况。结果 LPAATβ蛋白在肿瘤细胞中表达水平存在差异。体外生物学实验显示,稳定转染LPAATβ的HLF细胞增殖能力明显增强,细胞迁移能力显著提高,与细胞外基质成分Matrigel的黏附能力显著增强。结论 LPAAT家族成员LPAATβ在人类多种细胞中的表达具有普遍性,其过表达明显促进HLF细胞的增殖、迁移及黏附能力,提示该基因在细胞体外生长过程中具有重要作用。; 杜芝燕张家恺韩晓曦陈惠华乔鑫陆应麟王妍; 关键词：肿瘤转移细胞增殖细胞迁移细胞黏附

基于三维细胞培养的组织工程肿瘤研究进展被引量：4: 2014年; 肿瘤的发生与进展始终伴随着与微环境之间的相互作用,微环境中诸多的生物、物理和化学因素调控了肿瘤最终的命运与转归。肿瘤在适应和利用微环境的同时也会对微环境进行结构与功能的重塑。传统的二维(2D)细胞培养体外模型及动物整体模型无法很好地模拟肿瘤与微环境之间复杂的生物事件。基于三维(3D)细胞培养的组织工程肿瘤实验体系能够在一定范围内,模拟肿瘤细胞在体生长状态,有望作为2D培养模型和动物整体模型之间的桥梁,成为肿瘤研究模型体系中的重要组成部分。本文综述了基于3D细胞培养技术的组织工程肿瘤的基础及应用研究进展。; 乔鑫王妍; 关键词：肿瘤

蜘蛛牵引丝蛋白MaSp1表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达: 蜘蛛大壶腹腺产生的牵引丝具有优良的机械特性，是自然界综合性能最好的天然生物材料之一，具有高强度、高弹性和高断裂功的特点，其强度为钢丝的5倍，韧度为Kelvar纤维的3倍;在低温和高温等极端条件下，天然蜘蛛丝仍然具有优异的...; 乔鑫; 关键词：基因工程原核表达生物材料大肠杆菌

组织工程乳腺癌体外构建研究: 采用组织工程技术体外再造肿瘤模型对于研究肿瘤发生、侵袭和转移具有重要价值和意义.乳腺癌具有很高发病率,针对其侵袭与转移相关机制研究,尤其乳腺癌的微环境研究是近年来的焦点.本研究利用胶原/Matrigel细胞外基质以及PL...; 王妍周瑾牟永潮乔鑫王常勇; 关键词：乳腺肿瘤体外构建; 文献传递

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乔鑫