张钦乐
- 作品数：11 被引量：20H指数：3
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 眼镜蛇毒神经生长因子抑制肝星状细胞增殖并诱导其凋亡被引量：2
- 2012年
- 目的:从眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF),观察眼镜NGF对肝星状细胞HSC-T6增殖、凋亡活性的影响,进一步为蛇毒NGF在抗肝纤维化治疗提供依据。方法:采用shephadex G-75和CM Sepharose CL-6B二步柱色谱对眼镜蛇毒NGF进行纯化分离;PC12细胞测定各洗脱峰的活性,再用SDS-PAGE鉴定具有NGF活性洗脱峰的纯度和相对分子质量。实验设立空白对照和NGF处理组,分别作用于HSC-T6,培育相应时间,MTT检测眼镜蛇毒NGF对HSC-T6细胞活力影响;HE染色、紫外激光显微镜与透射电镜观察HSC-T6细胞的形态学变化;TUNEL、流式细胞技术检测眼镜蛇毒NGF对HSC-T6细胞凋亡的影响。结果:眼镜蛇毒经PC-12细胞鉴定第Ⅵ峰具有NGF活性;SDS-PAGE检测为电泳纯,相对分子质量为22.3KD;NGF对HSC-T6细胞增殖具有明显抑制作用(2μg/ml NGF的抑制率为49.66%±6.50%,P<0.05;6.25μg/ml NGF的抑制率为71.33%±1.53%,P<0.05);TUNEL法检测发现NGF干预组的凋亡率28.71%±1.59%(2ug/ml NGF)和34.4%±2.49%(5μg/mlNGF)明显高于对照组的15.85%±1.58%(P<0.05);流式细胞仪也有同样的发现,NGF干预组的凋亡率16.12%±3.02%(2 ug/mlNGF)和21.15%±3.31%(5μg/ml NGF)明显高于对照组的2.7%±1.55%(P<0.05)。结论:眼镜蛇毒NGF能抑制肝星状细胞HSC-T6增殖并诱导其凋亡。
- 赖允丽张学荣张钦乐胡仁统罗小玲廖明班建东
- 关键词：眼镜蛇毒NGF凋亡肝纤维化
- 基于质谱鉴定的肝癌标志物的血清iTRAQ分析被引量：7
- 2011年
- 目的:采用核素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术分析已报道的基于质谱鉴定的肝癌标志物在血清中的表达水平。方法:通过PubMed查阅2003年1月-2010年8月发表的,采用差异蛋白筛选结合基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱技术(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-fight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定的有关肝癌生物标志物的文献;同时运用iTRAQ标记技术结合MALDI-TOF-MS串联质谱技术,对20例肝癌患者与20例健康对照的血清进行差异蛋白组学分析。将文献报道的肝癌标志物数据与肝癌血清差异蛋白组学数据进行比对。结果:通过文献检索共获得符合要求的文献22篇,涉及肝癌相关标志物262个。肝癌血清差异蛋白组筛选出表达有显著差异的蛋白51个,其中在肝癌血清中高表达差异蛋白23个,低表达差异蛋白28个;与文献报道吻合的标志物8个,其中与文献报道表达水平一致的差异蛋白为6个[α-1-抗胰蛋白酶(alpha-1-antitrypsin,AAT)、载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)、蛋白血浆铜蓝蛋白(ceruloplasmin,CP)、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、补体C3(complement C3,C3)和血清淀粉状蛋白P片段(serum amyloid P-component,APCS)]。结论:血清中鉴定获得的6个与文献报道一致的差异蛋白可能是潜在肝癌标志物,值得进一步深入探讨研究。
- 张钦乐杨小丽李刚何晓臧宁胡艳玲张学荣何敏
- 关键词：生物标志物核素标记串联质谱
- 眼镜蛇毒神经生长因子含药血清抑瘤作用的初步研究
- 目的研究眼镜蛇毒神经生长因子（nerve growth factor）含药血清对人胃癌细胞株MGC-803和SGC-7901和人肝癌细胞株BEL-7404的细胞毒性和生长抑制作用影响。方法先建立人胃癌细胞株MGC-803...
- 覃柳燕张学荣班建东张钦乐赖允丽舒雨雁
- 关键词：神经生长因子含药血清抑瘤作用
- 文献传递
- 肝癌潜在标志物补体C3的筛选和验证的研究
- 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球发病率和死亡率均较高的恶性肿瘤之一,是世界排名第三的癌症杀手,在我国则居第二位。HCC侵袭性极强,预后差,因此,早期诊断、早期治疗对肝癌尤其重要。...
- 张钦乐
- 关键词：肝癌生物标志物ITRAQMALDI-TOF-MS补体C3
- 文献传递
- 亲和纯化技术联合质谱分析筛选乳腺癌中p90核糖体S6蛋白激酶4相互作用蛋白被引量：3
- 2016年
- 背景与目的:p90核糖体S6蛋白激酶4基因(ribosomal S6 kinase 4 gene,RSK4)作为抑癌基因,能够抑制细胞增殖、迁移并诱导细胞的凋亡,但与其配合发挥相应功能的相互作用蛋白尚不明确。该研究利用Flag标签纯化技术和质谱分析筛选鉴定乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的RSK4相互作用蛋白。方法:构建含有RSK4全长和Flag亲和标签的真核表达载体pc DNA3.1/EGFP-RSK4-Flag,将其转染至MDA-MB-231乳腺癌细胞株,72 h后收集细胞蛋白。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测RSK4表达情况。运用标签分离纯化RSK4蛋白,液相质谱/质谱分析技术(liquid chromatography mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS)鉴定RSK4相互作用蛋白,通过生物信息学的方法(GO分析和IPA分析)归纳分析互作蛋白以及与RSK4相互作用机制。结果:通过标签纯化联合质谱分析成功鉴定出丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶38(serine/threonine-protein kinase 38,STK38)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶38类(serine/threonine-protein kinase 38-like,STK38L)、MOB激酶致活因子2(MOB kinase activator2,MOB2)、蛋白精氨酸N甲基转移酶5(protein arginine N-methyltransferase 5,PRMT5)等24个RSK4相互作用蛋白。对所鉴定出的互作蛋白进行生物信息学分析,提示RSK4互作蛋白组参与包含细胞凋亡和细胞迁移运动等在内的多种生物信号通路。结论:利用亲和纯化技术联合质谱鉴定成功筛选出RSK4相互作用蛋白并通过生物信息学分析获得了RSK4参与乳腺癌细胞的凋亡、迁移相关生物调控网络。
- 刘日强刘天华张钦乐江凯郭坤张舒刘银坤杨华伟
- 关键词：真核表达基因转染
- iTRAQ标记质谱技术研究前列腺上皮/间质相互影响的蛋白质调控机制
- 杨小丽张新华覃健王志强李牡艳覃敏莫林建张钦乐吕文鑫陆峥张悦宁李佳桐
- 正常前列腺生长的稳态平衡有赖于前列腺上皮/间质细胞的相互作用。这种间质/上皮间的相互作用不仅在前列腺的生长、发育和细胞分化上，而且在前列腺疾病如前列腺增生（BPH）、前列腺癌（PCa）的发生、发展过程中都起着十分重要的作...
- 关键词：
- 关键词：前列腺疾病蛋白质组学
- 胎盘免疫调节因子对PC12细胞生长的影响
- 2010年
- 目的:观察胎盘免疫调节因子(placenta factor,PF)对PC12细胞生长的影响。方法:培养PC12细胞,用MTT法观察PF对体外无血清培养PC12细胞存活率的影响及PF对低血清培养PC12细胞增殖、分化的影响。结果:对无血清培养的PC12细胞加入不同浓度的PF培养44h后,PF在浓度为50、25、12.5、6.25mg/L时可以显著提高无血清培养PC12细胞的存活率(P<0.05)。对低血清培养的PC12细胞加入不同浓度的PF培养68h后,PF在浓度为12.5mg/L和6.25mg/L时可以显著提高PC12细胞的数量(P<0.01)。对低血清培养的PC12细胞加入不同浓度的PF培养10d,PF在浓度为3.13mg/L和1.56mg/L作用第6天时,细胞长出突起。结论:PF能提高无血清培养PC12细胞的存活率,促进PC12细胞增殖,诱导PC12细胞分化。
- 徐阳曦杨铁峥张学荣陈缨覃柳燕张钦乐舒雨雁
- 关键词：胎盘免疫调节因子PC12细胞增殖分化
- 干细胞因子Oct4在肝细胞癌中的转录调控网络分析
- 孙璐孙淳李岩江凯张钦乐刘银坤
- 胎盘免疫调节因子对HepG 2.2.15细胞毒性及HBV DNA分泌作用的影响被引量：2
- 2010年
- 目的观察胎盘免疫调节因子（PF）在体外的抗乙肝病毒（HBV）作用及安全性。方法将质量浓度分别为0．032—20．000mg／ml的PF作用于体外培养的人肝癌细胞系HepG 2．2．15细胞，通过MTT比色法观察细胞增殖抑制率及半数毒性质量浓度（TC50），以荧光定量PCR法检测HBV DNA水平（以拉米夫定为阳性对照组）。结果PF处理后细胞增殖抑制率为0．75％～58．21％且呈浓度依赖性，作用72h后TC50为13．61mg／ml；PF作用72h和144h后，细胞上清液中HBV DNA拷贝量显著降低，与阳性对照组水平相似。结论PF在体外有显著抗HBV作用，且细胞毒性较小。
- 覃柳燕张学荣何敏韦秋兰张钦乐赖允丽
- 关键词：胎盘免疫调节因子HEPG2.2.15细胞
- 蛇毒神经生长因子诱导PC12细胞分化超微结构的观察被引量：3
- 2009年
- 目的观察蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系(Pheo-chromocytoma cells,PC12)细胞分化后,细胞超微结构的改变。方法取对数生长期PC12细胞接种24孔板,设200 ng/ml NGF实验组和对照组。培养72 h,离心,分别收集细胞制成电镜标本,镜下观察各组细胞超微结构的改变。结果与对照组细胞相比,实验组细胞长出大量突起,并且胞质的细胞器逐渐消失,出现较多的脂滴。结论广西眼镜蛇毒神经生长因子可以促进PC12细胞增殖,并诱导其向神经样细胞分化,长出突触。
- 覃柳燕张学荣班建东张钦乐赖允丽
- 关键词：神经生长因子PC12细胞超微结构
