廖礼强
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微血管内皮细胞诱导骨髓间充质干细胞向心肌样分化及其移植的可行性被引量：4
- 2009年
- 背景:骨髓间充质干细胞通过再生心肌细胞在心肌损伤性疾病治疗方面突显较大潜力,但目前仍未找到一种理想的诱导方式。目的:探讨微血管内皮细胞诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的潜能,并分析其移植的可行性。设计、时间及地点:细胞学体外观察及体内移植实验,于2008-07/2009-02在重庆市神经病学重点实验室完成。材料:清洁级二三月龄健康雄性SD大鼠16只,购自重庆医科大学实验动物中心方法:孔径0.4μm的transwell小室,置入培养板孔构成双室培养体系。取SD大鼠1只,Ficoll密度梯度+贴壁筛选法分离培养骨髓间充质干细胞,组织块法分离培养微血管内皮细胞。培养瓶中融合至50%生长良好的微血管内皮细胞,每3d更换培养液,收集更换液过滤即制成条件培养液。体外实验分为4组:直接接触组、双室培养组、条件培养液组、培养液对照组,观察各种培养条件对骨髓间充质干细胞的心肌诱导效应。取SD大鼠15只建立心肌梗死模型,冠状动脉结扎后第6天任取1只大鼠明确心肌梗死建模是否成功,其余大鼠随机分为细胞移植组8只、模型对照组6只。造模1周后,细胞移植组将在双室模型中与微血管内皮细胞共培养5d的骨髓间充质干细胞调整浓度为109L-1,通过鼠尾静脉缓慢注入1mL,模型对照组予等量DMEM,观察4周。主要观察指标:体外实验通过免疫荧光染色检测心肌标志物TnI、α-actin的表达;采用心电图、荧光镜检、苏木精-伊红染色等方式评价体内移植的安全性及可行性。结果:直接接触组、双室培养组、条件培养液组部分骨髓间充质干细胞心肌标志物TnI、α-actin阳性表达,荧光镜下胞浆发绿光(或红光),前2组诱导率基本相似(P>0.05),且均明显高于条件培养液组(P<0.05);培养液对照组细胞未向心肌样细胞分化。细胞移植后两组大鼠均存活良好,未出现死亡及恶性心律失常,4周
- 廖礼强张晓刚史若飞王丁琼汤为学
- 关键词：微血管内皮细胞骨髓间充质干细胞心肌细胞分化
- 心肌梗死大鼠单个核细胞分泌TNF-α对间充质干细胞迁移的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨心肌梗死(MI)大鼠循环血单个核细胞分泌的TNF-α对间充质干细胞(MSCs)迁移的影响。方法 14只SD大鼠中8只结扎左冠状动脉前降支建立MI模型,其余6只行假手术处理(只穿线不结扎),于第7天时分离大鼠循环血单个核细胞。自制体外三室共培养模型,将4,6-二脒基-2苯基吲哚(DAPI)-MSCs、心肌细胞和单个核细胞分别培养于三室模型的上、中、下室内。按下室所加成分的不同,设立MI组(只加入2×106个MI大鼠单个核细胞)、TNF-α中和抗体组(TNF-α-NA组,加入2×106个MI大鼠单个核细胞及终浓度为50ng/L的TNF-α中和抗体)、假手术组(只加入2×106个假手术大鼠单个核细胞)和空白对照组(只加入培养液)。共培养48h后,对MSCs迁移细胞进行CD44及CD34免疫组化鉴定和荧光显微镜下计数,ELISA法检测上清液TNF-α含量,Westernblotting检测MSCs表面血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达情况,并分析TNF-α含量与MSCs迁移数目的相关性。结果迁移细胞CD44呈阳性表达,而CD34呈阴性表达,符合MSCs的特点。与假手术组比较,MI组迁移细胞数量显著增多(P<0.05),TNF-α含量明显升高(P<0.05),而中和TNF-α后,TNF-α-NA组迁移细胞数明显减少(P<0.05)。MSCs迁移数目与TNF-α含量呈明显正相关(r=0.969,P<0.05)。与假手术组比较,MI组MSCs表面VCAM-1的表达量显著升高(P<0.05),而中和TNF-α后,TNF-α-NA组VCAM-1的表达量明显下降(P<0.05)。结论 MI大鼠单个核细胞可促进MSCs迁移,其机制可能与单个核细胞分泌的TNF-α增强MSCs黏附性有关。
- 廖礼强张晓刚史若飞王丁琼戴树人
- 关键词：心肌梗死单个核细胞间质干细胞
- 氧化低密度脂蛋白诱导人淋巴细胞活化及雷公藤多甙的干预作用观察被引量：1
- 2010年
- 目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导病理免疫的可能机制及雷公藤多甙(TG)的干预作用。方法采集6例健康志愿者外周静脉血,密度梯度离心法分离单个核细胞,然后分为5组进行体外孵育:ox-LDL组(ox-LDL终浓度1mg/L)、TG高剂量组(TG和ox-LDL终浓度分别为1.5mg/L和1mg/L)、TG中剂量组(TG和ox-LDL终浓度均为1mg/L)、TG低剂量组(TG和ox-LDL终浓度分别为0.5mg/L和1mg/L)、对照组(不加ox-LDL和TG)。采用流式细胞术检测各种淋巴细胞亚群比例,ELISA法检测细胞培养上清液中人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)浓度。结果对照组T细胞、Th细胞、Tc细胞和Treg细胞的活化率分别为2.04%±0.54%、1.12%±0.18%、1.58%±0.77%和13.04%±7.84%。与对照组比较,ox-LDL组T细胞活化率(4.37%±1.10%)、Th细胞活化率(2.61%±0.88%)和Tc细胞活化率(3.64%±1.96%)均明显升高(P<0.05),Treg细胞活化率(17.29%±9.88%)差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,ox-LDL组Tc细胞活化率升高幅度(2.07%±1.93%)与Th细胞活化率升高幅度(1.49%±0.74%)差异无统计学意义(P>0.05)。TG中剂量组T细胞、Th细胞和Tc细胞的活化率分别为1.71%±0.48%、1.38%±0.22%和1.56%±0.28%,均显著低于ox-LDL组(P<0.05),而与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),Treg细胞活化率(20.01%±11.41%)显著高于对照组(P<0.05),与ox-LDL组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与ox-LDL组比较,TG中剂量组Tc细胞活化率降低幅度(2.09%±1.83%)与Th细胞活化率降低幅度(1.23%±0.95%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。ox-LDL组OLAb浓度(443.82±132.46μg/L)显著高于对照组(183.86±88.49μg/L,P<0.05)。TG高、中、低剂量组OLAb浓度(分别为183.89±101.64、222.51±62.71、249.23±84.95μg/L)与对照组比较差异无统计学意义,且三个剂量组间差异也无统计学意义(P>0.05),但与ox-LDL组比较,三个剂量组OLAb浓度均明显降低(P<0.05)。结论人淋巴细胞受ox-LDL刺激后能产生自身免疫样反应,TG�
- 戴树人张晓刚崔鲂廖礼强梁晓丽
- 关键词：动脉粥样硬化雷公藤多甙淋巴细胞免疫
- 心梗大鼠循环血单个核细胞分泌TNF-α对MSCs迁移及心肌样分化的影响
- 目的：建立体外三室共培养模型,探讨心梗大鼠循环血单个核细胞分泌INF-α对MSCs迁移的作用和机制,以及对MSCs向心肌样细胞分化的影响。
方法：⑴用trans-well小室自制三室共培养模型;冲取SD大鼠骨髓,采...
- 廖礼强
- 关键词：单个核细胞细胞病理学
- 文献传递
- 心肌梗死大鼠体外培养心肌组织对间充质干细胞迁移的作用被引量：2
- 2010年
- 背景:间充质干细胞具有改善心脏功能的潜力,间充质干细胞移植后向心脏归巢的机制尚不完全清楚。目的:观察心肌梗死大鼠体外培养的心肌组织对间充质干细胞迁移的作用及可能机制。方法:建立大鼠心肌梗死模型,培养大鼠心脏组织块,密度梯度离心及贴壁筛选法分离培养骨髓间充质干细胞,24只SD大鼠随机抽签法分为心肌梗死组、假手术组及正常对照组。假手术组只穿线不结扎,正常对照组不做任何处理。荧光染料DAPI标记间充质干细胞,利用transwell模型进行共培养,共培养48h。荧光镜下计数迁移细胞数,CD34/CD44免疫细胞化学染色进行迁移细胞定性,免疫荧光检测迁移细胞CXCR4的表达情况,心脏组织切片行免疫组织化学染色检测基质细胞衍生因子1的表达情况并进行平均吸光度分析。结果与结论:心肌梗死组单位视野迁移细胞数显著高于假手术组(P<0.05),正常对照组未见迁移细胞。免疫细胞化学染色显示迁移细胞CD44阳性而CD34阴性,符合间充质干细胞特点,其膜受体CXCR4阳性表达。心肌梗死组及假手术组心脏切片基质细胞衍生因子1阳性表达,正常对照组心肌组织不表达基质细胞衍生因子1。心肌梗死组心脏组织基质细胞衍生因子1平均吸光度显著高于其他组别(P<0.05)。提示心肌梗死后大鼠心脏组织能促进间充质干细胞迁移,这一效应的实现可能与基质细胞衍生因子1-CXCR4轴的作用有关。
- 王丁琼史若飞张晓刚廖礼强
- 关键词：心肌梗死心肌组织间充质干细胞迁移
