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一种抗人降钙素原蛋白N末端抗原表位的单克隆抗体7H8的制备: 本发明公开了一种分泌抗人PCT蛋白N末端氨基酸序列的单克隆抗体7H8的杂交瘤细胞，通过在大肠杆菌中原核表达密码子优化后的人PCT全基因序列，以纯化的人PCT蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠。经过细胞融合及筛选，获得了能够...; 刘如石郑姣李晓丹廖旻晶吴意邱义兰何赛; 文献传递

HCMV pp65原核表达重组菌株及其构建方法: 本发明公开了一种含有HCMV pp65基因片段的工程菌，其分泌表达的重组pp65蛋白作为抗原具有良好的反应原性，可以用于免疫动物制备相应的抗原诊断单克隆抗体，也为开发ELISA快速诊断抗体试剂盒提供基础；同时重组抗原可作...; 刘如石许凤邱义兰邱果李桑何赛郑姣黄雄军; 文献传递

人HCMV重要抗原表位单克隆抗体的制备: 人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)又称人类疱疹病毒5型,在自然界普遍存在,能够引发多种疾病,也是先天性感染最为常见的病毒。HCMV感染率极高,健康成年人感染该病毒多无明显临床症状,并常以...; 何赛; 关键词：人巨细胞病毒原核表达免疫反应性单克隆抗体; 文献传递

一种抗人降钙素原蛋白N末端抗原表位的单克隆抗体7H8的制备: 本发明公开了一种分泌抗人PCT蛋白N末端氨基酸序列的单克隆抗体7H8的杂交瘤细胞，通过在大肠杆菌中原核表达密码子优化后的人PCT全基因序列，以纯化的人PCT蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠。经过细胞融合及筛选，获得了能够...; 刘如石郑姣李晓丹廖旻晶吴意邱义兰何赛; 文献传递

人巨细胞病毒pp65蛋白的原核表达及活性鉴定被引量：3: 2013年; 以病毒全基因组为模板,通过PCR技术扩增HCMV pp65基因编码序列,其产物连接到pMD18-T质粒,酶切并回收目的片段后克隆到表达载体pTO-T7,然后将重组质粒pTO-T7-pp65转化大肠杆菌ER2566,大量表达后将重组蛋白进行质谱法分析鉴定,再利用Western blot以及间接ELISA进行重组蛋白的活性及抗原性鉴定.结果显示:通过SDS-PAGE鉴定可知,大肠杆菌可能表达出了重组蛋白,质谱分析结果说明了重组蛋白为pp65蛋白,具有极高可信度,其相对分子质量约为63 kD,从Western blot和间接ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)的结果可知,pp65蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性与免疫原性,为制备相应的抗原诊断单克隆抗体打下了基础,同时也为开发HCMV IgG快速诊断ELISA试剂盒提供了可选原料.; 许凤邱义兰邱果李桑何赛郑姣李小曼刘如石; 关键词：免疫反应性免疫原性

人巨细胞病毒包膜糖蛋白B主要中和表位单克隆抗体的制备被引量：1: 2017年; 人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)分布广泛,能够引发多种疾病,人群感染率极高,严重威胁到人类健康。现根据标准毒AD169基因序列,人工合成包膜糖蛋白B(glycoprotein B,g B)AD13区段的主要中和抗原表位AD-1、AD-2、AD-3,并将其与表达载体pET-32a连接,构建重组表达质粒;用IPTG诱导表达重组蛋白,采用Western-blot进行特异性鉴定;将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0细胞融合,然后筛选制备AD13单克隆抗体(monoclonal antibody,m Ab)。12%SDS-PAGE电泳鉴定表明重组蛋白表达成功,其相对分子质量约为35 kD;Western-blot和间接ELISA结果说明,重组AD13蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性;克隆化后筛选到5个AD13单克隆抗体细胞株,经间接ELISA鉴定,与AD13抗原有良好的特异性反应。上述研究为研发HCMV快速诊断试剂盒提供了原料,也为研究HCMV亚单位疫苗提供了相关的基础。; 何赛廖旻晶靳晓瑞邱义兰李晓丹郑姣唐娜罗焕梁湘辉郭向荣刘如石; 关键词：中和表位免疫反应性

人胱抑素C的原核表达及活性鉴定: 2016年; 目的建立胱抑素C蛋白(Cys C)原核表达系统,表达、纯化并鉴定重组的人Cys C。方法在不改变氨基酸序列的前提下,对Cys C的编码基因进行大肠杆菌同义密码子偏好性优化后,人工合成其序列,PCR扩增Cys C基因,在原核系统中表达重组人Cys C。纯化表达的Cys C重组蛋白,采用间接ELISA法测定其反应灵敏度及免疫原性。结果十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定可知,重组基因在大肠杆菌中获得了有效表达,相对分子质量约为35×103,Western blot结果进一步说明重组蛋白为Cys C蛋白,间接ELISA结果显示,在包被浓度为0.5mg/L时便产生了阳性值。结论成功建立了Cys C原核表达系统,Cys C蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性与免疫原性,为制备相应的抗原诊断单克隆抗体打下了基础,同时也为开发Cys C快速诊断ELISA试剂盒提供了可选原料。; 李原刘如石蒋琰李桑郑姣何赛吴意; 关键词：酶联免疫吸附试验免疫反应性免疫原性

降钙素原的原核表达及单克隆抗体制备被引量：1: 2016年; 目的:高效表达与纯化可溶性重组人PCT蛋白,制备高灵敏度和高特异性的抗人PCT医用诊断单克隆抗体。方法:大肠杆菌表达重组人PCT蛋白后,利用饱和硫酸铵沉淀和亲和层析方法纯化PCT蛋白后,经质谱、Western blot和间接ELISA法进行性质鉴定和分析重组蛋白的表达与免疫反应性;重组蛋白免疫小鼠,经细胞融合及筛选制备抗PCT单克隆抗体(m Ab)。结果:在大肠杆菌中高效表达了人PCT蛋白;重组人PCT蛋白具有良好的免疫反应性与免疫原性;经筛选获得7株抗PCT单克隆抗体细胞株,经ELISA鉴定,筛选抗体可与PCT抗原有良好的特异性反应。结论:利用重组人PCT蛋白免疫制备了抗人PCT单克隆抗体,为进一步研发PCT快速诊断试剂提供了原料。; 郑姣邱义兰廖旻晶李晓丹张坚松吴意何赛梁湘辉郭向荣刘如石; 关键词：降钙素原原核表达

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何赛