张连美
- 作品数:11 被引量:77H指数:3
- 供职机构:淮安市第一人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金淮安市科技支撑计划基金四川省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 非编码小RNA分子miR-34a在乳腺癌细胞系中的表达及意义
- 2013年
- 目的:比较各种不同类型的乳腺癌细胞系miR-34a的表达,探索作为抑癌基因的miR-34a在抑制肿瘤转移中的临床意义。方法:用micro RNA特异性试剂盒提取总RNA,应用特异性茎-环反转录实时PCR技术检测miR-34a在各种乳腺癌细胞中的表达,并进行比较分析。结果:提取的RNA质量完好,miR-34a在所检测的高侵袭性乳腺癌细胞MDA-MB-231,MDA-MB-435和BT-549中呈低表达;而在低侵袭性细胞MCF7和T47D中呈相对高表达。结论:建立了特异性茎-环反转录实时PCR检测非编码小RNA分子技术;miR-34a的表达与肿瘤细胞高侵袭性可能呈负相关,提示miR-34a作为抑癌基因可能在抑制肿瘤转移中起重要作用,在乳腺癌诊断、预防和治疗中具有重要的潜在价值。
- 杨璐全龙燕魏春莉杨维婵张连美杨曼曼张天丹傅俊江
- 关键词:MIR-34A乳腺癌细胞系肿瘤转移
- 核苷酸序列的用途
- 本发明公开了SEQ ID NO.1或2所示的核苷酸序列在制备者治疗恶性乳腺癌的药物中的用途。本发明还公开了一种治疗恶性乳腺癌的药物。本发明公开的核苷酸序列是诊断恶性乳腺癌的靶标位点,可用于快速筛选治疗乳腺癌的药物,本发明...
- 傅俊江张连美
- 文献传递
- 一种核苷酸序列及其用途
- 本发明公开了SEQ ID NO.1或者SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,包含所述核苷酸序列的重组载体,以及所述核苷酸序列在制备检测恶性乳腺癌的试剂中的用途。本发明还公开了一种检测恶性乳腺癌的检测试剂盒和治疗恶性乳腺...
- 傅俊江张连美
- 文献传递
- 改良菌落PCR快速鉴定TRIM28基因阳性重组子的方法研究被引量:1
- 2012年
- 目的:建立简便、可靠基因克隆菌落阳性重组子的筛选方法。方法:应用普通菌落PCR和改良的菌落PCR方法对TRIM28基因的阳性重组体进行阳性重组子的分析比较,同时探讨了PCR反应体系中模板浓度和DMSO对于扩增效率的影响。并对鉴定结果为阳性的克隆进行了进一步酶切和蛋白诱导表达分析。结果:运用改良的菌落PCR法简单快捷,结果可靠,反应体系中DMSO的浓度为4%左右可以很好地促进GC富集DNA模板的PCR扩增。其方法的可靠性得到了酶切验证和重组蛋白表达证实。结论:应用改良方法可以用于快速有效地筛选阳性重组菌落。
- 梅志强张连美于海清段承刚杨曼曼傅俊江
- 关键词:菌落PCR
- 可诱导稳定表达DLX4细胞系的构建及其表达分析被引量:2
- 2011年
- 目的:建立一种可诱导稳定表达方法,并构建DLX4细胞系。分析DLX4细胞系的表达调控。方法:将DLX4全长基因克隆入pcDNA5/FRT/TO表达载体,将其转染入宿主细胞Flp-InTMT-RExTM-293细胞系,潮霉素B筛选或者阳性克隆。采用不同剂量的DOX或者不同作用时间对pcDNA5/DLX4细胞系进行诱导表达,用Western blotting检测DLX4表达情况。结果:构建了可被Doxycline(DOX)诱导的稳定表达pcDNA5/DLX4的细胞系。0.001μg/ml的DOX即可诱导pcDNA5/DLX4细胞系的表达,0.1μg/ml DOX即可诱导该细胞系表达达到高峰;DOX对该细胞系作用1h后即可诱导该细胞系表达,对其作用16h后该细胞系表达明显增强。结论:构建了可被DOX诱导稳定表达的DLX4细胞系,不同剂量的DOX和不同作用时间对DLX4细胞系表达有不同的影响。该细胞系的建立为深入探索DLX4的功能提供了一种新的有效方法和实验材料。
- 张连美傅俊江
- 关键词:稳定细胞系蛋白质表达
- 核苷酸序列的用途
- 本发明公开了SEQ ID NO.1或2所示的核苷酸序列在制备者治疗恶性乳腺癌的药物中的用途。本发明还公开了一种治疗恶性乳腺癌的药物。本发明公开的核苷酸序列是诊断恶性乳腺癌的靶标位点,可用于快速筛选治疗乳腺癌的药物,本发明...
- 傅俊江张连美
- 文献传递
- 男性不育症患者精子形态与精子密度、活力相关性及影响因素研究被引量:7
- 2016年
- 目的探讨男性不育症患者精子形态与精子密度、活力相关性及影响因素。方法选取2013年7月至2015年7月期间于本院不孕不育科就诊的500例男性不育症患者作为研究对象,根据患者的精子密度、活力和畸形率分组,比较不同组患者的精子畸形率和TZI,分析精子形态正常组和异常组患者的相关资料,采用Logistic多因素回归分析男性不育症患者精子畸形率影响因素。结果精子密度〉50(×10^6/ml)组患者精子形态正常率显著高于精子密度15~50(×10^6/ml)组和精子密度〈15(×10^6/ml)组患者(P〈0.05),精子密度〉50(×10^6/ml)组患者精子TZI显著低于精子密度15~50(×10^6/ml)组和精子密度〈15(×10^6/ml)组患者(P〈0.05);精子活力〉60%组患者精子形态正常率显著高于32%~60%组和〈32%组患者(P〈0.05),精子活力〉60%组患者TZI显著低于精子活力〈32%组患者(P〈0.05);精子形态正常组患者年龄、吸烟及酗酒比例显著低于精子形态异常组患者,精子形态正常组患者精子密度及活力显著高于精子形态异常组患者(P〈0.05);Logistic多因素回归分析结果显示精子密度、精子活力、吸烟及酗酒是精子形态的影响因素。结论精子密度及活力异常的男性不育症患者常伴有畸精症,不良生活习惯影响精子形态,值得临床加以关注。
- 仲纪祥张连美冯播左阳花
- 关键词:男性不育症精子形态精子密度精子活力
- 肝细胞癌患者FOXM1的表达及临床意义被引量:2
- 2017年
- 目的探讨FOXM1基因在肝细胞癌及对应癌旁组织中的表达水平及临床意义。方法采用qRT-PCR技术检测FOXM1 mRNA在肝细胞癌及配对癌旁组织中的表达。结果肝细胞癌组织中FOXM1 mRNA表达高于癌旁组织(P<0.01);FOXM1 mRNA在低分化肝细胞癌组织中的表达量显著高于中-高分化组(P<0.01);FOXM1 mRNA高表达与肝细胞癌患者肿瘤数目(P=0.010)、肿瘤分化程度(P=0.002)、脉管浸润(P=0.029)、血清AFP水平(P=0.004)、临床分期(P=0.003)显著相关;FOXM1mRNA过表达的肝细胞癌患者生存率下降(P=0.010)。结论 FOXM1在肝细胞癌组织中呈高表达,FOXM1基因有可能成为肝细胞癌早期诊断和预后判断的分子标记物。
- 顾小文朱从奎张连美蔡少薇尤建国
- 关键词:肝细胞癌FOXM1预后
- 乳腺癌中转录因子DLX4与EMT相关蛋白的表达及意义被引量:4
- 2016年
- 目的探讨转录因子DLX4与上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白在乳腺癌组织和乳腺细胞系中的表达及其相关性。方法收集100例乳腺癌及对应癌旁组织标本,采用免疫组化SP法和Western blot法检测乳腺癌组织和乳腺细胞系中DLX4与EMT相关蛋白E-cadherin和vimentin的表达,并分析三者与乳腺癌临床病理特征的关系。结果乳腺癌组织中DLX4和vimentin阳性率(68.0%和53.0%)显著高于癌旁组织(22.0%和28.0%)(P<0.05),乳腺癌组织中E-cadherin阳性率(32.0%)显著低于癌旁组织(76.0%)(P<0.05)。Western blot法检测结果显示,在高侵袭性乳腺癌细胞系中DLX4、vimentin均呈高表达,E-cadherin呈低表达;DLX4、E-cadherin及vimentin的表达与乳腺癌TNM分期和淋巴结转移相关。Spearman相关分析结果显示,乳腺癌中DLX4与E-cadherin表达呈负相关(r_s=-0.505,P=0.000),DLX4与vimentin表达呈正相关(r_s=0.165,P=0.016)。结论乳腺癌中转录因子DLX4与E-cadherin表达呈负相关,与vimentin表达呈正相关,可能存在调控关系,从而促进乳腺癌的局部侵袭和远处转移。
- 张连美仲纪祥孙苏安
- 关键词:乳腺肿瘤转录因子
- 一种核苷酸序列及其用途
- 本发明公开了SEQ ID NO.1或者SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,包含所述核苷酸序列的重组载体,以及所述核苷酸序列在制备检测恶性乳腺癌的试剂中的用途。本发明还公开了一种检测恶性乳腺癌的检测试剂盒和治疗恶性乳腺...
- 傅俊江张连美
- 文献传递