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脑源性神经营养因子与心脏微血管内皮细胞的管状形成被引量：1: 2011年; 背景:研究发现脑源性神经营养因子可促进内皮细胞的存活,诱导血管新生,但其促进血管新生的细胞与分子机制尚不清楚。目的:观察脑源性神经营养因子在3D体外管状形成模型中对心脏微血管内皮细胞管状结构形成的影响。方法:分离提取大鼠心脏微血管内皮细胞并培养使之形成细胞小球,将心脏微血管内皮细胞小球接种于Ⅰ型胶原-甲基纤维素的3D环境中培养,然后分别加入50,70,100μg/L的脑源性神经营养因子继续培养,于培养24,48h观察并测量心脏微血管内皮细胞的分枝长度和分枝条数。结果与结论:经分离的大鼠心脏微血管内皮细胞小球在Ⅰ型胶原-甲基纤维素3D环境中培养24h,均可见管状分枝,且脑源性神经营养因子可促进管状分枝生长,以100μg/L的脑源性神经营养因子的促生长效果最明显,分枝也最多。培养至48h,心脏微血管内皮细胞小球的分枝更长。说明脑源性神经营养因子在3D体外管状形成模型中可促进大鼠心脏微血管内皮细胞发芽及管状结构的形成,且具有剂量依赖性。; 刘少坤曹亮张靓沈晓涛赵宝寅齐绪峰秦俊文蔡冬青; 关键词：心脏微血管内皮细胞脑源性神经营养因子血管新生

TrkB-shiRNA质粒转染心脏微血管内皮细胞被引量：1: 2010年; 背景:脑源性神经营养因子与其受体TrkB在心脏与骨骼肌内皮细胞存在表达,在心脏血管系统的发育中及骨骼肌缺血时能有效促进血管新生,但其促血管新生的细胞与分子机制尚不清楚。目的:应用针对脑源性神经营养因子受体TrkB的shiRNA质粒对心脏微血管内皮细胞进行转染,观察TrkB 3种亚型的表达及心脏微血管内皮细胞的生长状况和形态,初步探讨脑源性神经营养因子-TrkB通路在心脏微血管内皮细胞中的调控作用。方法:使用TrkB-shiRNA质粒转染大鼠心脏微血管内皮细胞,应用荧光实时定量PCR检测TrkB的3个亚型,TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2 mRNA的表达,并观察经转染的心脏微血管内皮细胞的增殖情况。结果与结论:应用TrkB-shiRNA质粒转染心脏微血管内皮细胞后,TrkB 3种亚型在转染后的4d内mRNA表达均下降(P<0.05或P<0.01),且经转染的心脏微血管内皮细胞的生长变慢。说明TrkB-shiRNA质粒可沉默心脏微血管内皮细胞的TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2的表达,且TrkB表达被抑制可能会影响心脏微血管内皮细胞的增殖。; 陈斯韵曹亮李震沈晓涛郑馨梁永佳蔡冬青; 关键词：心脏微血管内皮细胞脑源性神经营养因子 TRKB 细胞增殖

脑源性神经营养因子对心脏微血管内皮细胞增殖与移行作用的研究: 目的：心脏微血管内皮细胞(CMECs)的增殖和移行在心肌梗塞后血管新生过程中扮演重要的角色。脑源性神经营养因子(BDNF)能维持内皮细胞的存活,是一种重要的血管再生因子。BDNF对CMECs功能的作用机制特别是促血管新生...; 曹亮; 关键词：血管新生; 文献传递

核转染对成体骨髓源性干细胞的影响被引量：1: 2011年; 背景:成体骨髓源性干细胞是实施细胞治疗的重要细胞来源。对成体骨髓源性干细胞的示踪,是研究其移行、分化的规律与机制并进一步阐明再生潜能、疗效的关键。目的:探讨经转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,在细胞表型、增殖能力、心肌分化潜能是否存在的影响。方法:应用核转染技术利用U-23程序将编码maxGFP报告基因的载体对成体骨髓呈克隆样干细胞进行转染,应用MTT法对核转染前后的生长曲线进行测定,使用3μmol/L5-氮胞苷对核转染前后成体骨髓呈克隆样干细胞进行向心肌分化诱导,并利用RT-PCR对向心肌分化的特异性标记物GATA4与MLC-2v的表达进行测定。使用成年SD大鼠心肌梗死左前降支结扎模型,对使用经maxGFP转染的成体骨髓呈克隆样干细胞施心内注射并于注射后的第2天和第7天对经注射心脏行冰冻切片并观察maxGFP在体内的表达情况。结果与结论:经核转染24h后,第47代及第119代成体骨髓呈克隆样干细胞的转染率为49.4%和43.1%,转染后5h,开始出现呈绿色荧光阳性的细胞,经核转染后仍能保持小圆球形、可贴壁、呈克隆样生长。MTT检测结果显示:核转染前后第47代及第119代均具有相似的生长曲线。核转染前第47代及119代细胞平均群体倍增时间分别为8.57,10.28h;核转染后分别为9.42,10.42h,各代前后比较差异无显著性意义(P=0.551,P=0.774)。RT-PCR检测结果显示:核转染前5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强;核转染后5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强,上述2个向心肌分化指标于转染前后变化并不明显。体内实验结果:心内注射经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,第2天及第7天可在经注射心肌中发现有少量绿色荧光阳性的细胞。提示,核转染可快速地将外源基因导入细胞,经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞仍能保持其细胞形态、增�; 李震沈晓涛曹亮毛颖玉陈斯韵郑馨蔡冬青; 关键词：增殖分化示踪

一种心脏血管靶向型短肽MI-1与应用: 本发明公开了一种心脏血管靶向型短肽MI-1与应用。该心脏血管靶向型短肽MI-1的氨基酸序列为CPRRPGRVC，编码该MI-1的核苷酸序列为5’-TGCCCGAGGAGGCCGGGGAGGGTTTGC-3’。该心脏血管靶...; 蔡冬青曹亮沈晓涛赵宝寅姚瑶王键郑馨李丹李震; 文献传递

MlrA基因cDNA序列、编码氨基酸和水体中微囊藻毒素的检测方法: 本发明提供一种MlrA基因cDNA序列、编码氨基酸和水体中微囊藻毒素的检测方法，该MlrA基因cDNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。本发明通过对不同季节不...; 梁旭方胡永乐陈小佳谢秋玲姚煜程炜轩曹亮何珊; 文献传递

微囊藻毒素降解酶MlrA的全长cDNA序列、编码氨基酸和应用: 本发明提供了一种微囊藻毒素降解酶MlrA的全长cDNA序列、编码蛋白和应用，该微囊藻毒素降解酶MlrA全长cDNA序列的核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示，其编码氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。本发明的微囊藻毒...; 梁旭方胡永乐陈小佳谢秋玲姚煜程炜轩曹亮何珊; 文献传递

鳜胃蛋白酶基因外显子7上SNP检测及其与食性驯化相关分析被引量：6: 2011年; 本研究旨在探寻胃蛋白酶(pepsinogen,PEP)基因的等位基因及其基因型在不同食性驯化表型鳜(Siniperca chuatsi)群体中的分布情况。通过2周食性驯化,挑选出最易驯化和最不易驯化的2组,提取各组鳜鳍条组织DNA,采用PCR产物直接测序法(direct sequencing,DS)、限制性片段长度多态性技术(restriction fragment length poly-morphism,RFLP)和创造限制酶切位点PCR法(created restriction site PCR,CRS-PCR)对鳜胃蛋白酶基因5、6、7、8内含子和6、7、8外显子进行SNPs遗传多态性检测和分析。结果共检测到2个SNPs位点(C1T和C52 T),均为同义突变,利用卡方检验分析,结果表明PEP基因的这2个SNPs位点分别与鳜的食性驯化不具显著相关性(P>0.05)。将2个SNPs位点的不同基因型组合成5种双倍型,卡方检验表明双倍型Dip1与Dip5在两组中存在显著差异(P<0.05)。本研究成功完成鳜PEP基因组多态性分析,因而可以考虑将PEP基因作为影响鳜食性驯化的候选基因。; 方荣梁旭方杨宇晖杜嵇华曹亮叶卫符云; 关键词：胃蛋白酶 SNP 食性驯化

一种心脏血管靶向型短肽MI-1与应用: 本发明公开了一种心脏血管靶向型短肽MI-1与应用。该心脏血管靶向型短肽MI-1的氨基酸序列为CPRRPGRVC，编码该MI-1的核苷酸序列为5’-TGCCCGAGGAGGCCGGGGAGGGTTTGC-3’。该心脏血管靶...; 蔡冬青曹亮沈晓涛赵宝寅姚瑶王键郑馨李丹李震

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