邓小敏
- 作品数：9 被引量：50H指数：5
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡新城疫病毒分离株F基因的分子特性分析被引量：3
- 2008年
- 【目的】对新城疫病毒（NDV）分离毒株进行分子特征分析,了解免疫鸡群发生新城疫的原因。【方法】用非免疫鸡胚从病鸡肺脏中分离新城疫病毒;参考GenBank上发表的NDV的F基因序列设计引物,应用RT-PCR方法对新城疫病毒分离株进行扩增,并构建克隆载体,对阳性质粒测序后进行F基因核苷酸及推导氨基酸序列分析。【结果】从发病鸡群中分离到6株NDV,分离毒株间的F基因核苷酸和F蛋白氨基酸同源性分别在99.6%-99.9%和99.1%-99.8%;分离毒株与参考毒株的F基因核苷酸和F蛋白氨基酸序列同源性分别在83.2%-87.3%和90.2%-93.8%;分离毒株F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为^112R-R-Q-K-R-F^117,符合强毒株的分子特征;6个分离株均属NDV基因Ⅶ型。【结论】NDV分离株的F基因已经发生明显变异,与La Sota、Clone-30、V4等常用疫苗株在遗传进化上的亲缘关系较远,这可能是免疫鸡群发生新城疫的重要原因之一。
- 王学艳王晶钰刘红彦邓小敏温肖会姜向阳罗艳
- 关键词：新城疫病毒F基因RT-PCR分子特性分析
- IBV陕西分离株M基因的克隆与遗传变异分析
- 2007年
- 为了研究IBV陕西分离株M基因的遗传变异情况及分子特征，参照NCBI所登录的IBVM基因序列设计了1对引物，应用RT-PCR方法对陕西8株IBV分离株的M基因进行扩增，并构建克隆载体，对阳性质粒测序后进行核苷酸序列及氨基酸序列同源性和进化发生关系分析，并对M蛋白的二级结构和跨膜区进行预测。结果表明，8个IBV分离株间的M基因核苷酸和M蛋白氨基酸同源性分别为92．3％～99．8％和95．4％～100％，分离毒株与参考毒株的M基因核苷酸和M蛋白氨基酸序列同源性分别为87．4％～99．5％和89．4％～99．5％；分离毒株与参考毒株M蛋白的α-螺旋结构主要分布在N端前100氨基酸肽段区，其他的部分主要是哥折叠和无规则卷曲结构；分离毒株的M蛋白均包含有3个跨膜区。表明IBV分离株M蛋白在基因序列和二级结构上相对保守。
- 王晶钰罗艳邓小敏郭抗抗张彦明
- 关键词：IBV分离株
- 鸡传染性支气管炎病毒N蛋白研究进展被引量：9
- 2007年
- 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)是严重危害养鸡业的重要病原之一。近年来国内外学者在分子生物学领域方面的研究不断深入,在病毒基因组的结构与功能及其N蛋白的研究方面取得了重要进展。对N蛋白如何特异性地识别病毒基因组RNA、参与病毒RNA的复制和包装、诱导IBV体液和细胞免疫应答的机制I、BV新型基因工程疫苗研制以及IBV的抗体水平监测等方面的研究,为IBV基因工程疫苗设计及其免疫防控提供了科学依据。
- 邓小敏叶柱德王晶钰罗艳
- 关键词：传染性支气管炎病毒分子生物学N蛋白
- 鸡肾型IBV分离株M基因的克隆与特性分析被引量：4
- 2007年
- 依据NCBI所登录的鸡传染性支气管炎病毒的M基因序列设计了一对引物,应用TRIzol试剂盒对8个肾型鸡传染性支气管炎病毒陕西地方分离株进行总RNA的提取,以所得到的RNA为模板,用RT-PCR对M基因进行扩增;其目的条带回收提纯后,与PMD18-T克隆载体进行连接,转化到DH5α宿主菌,并经药物抗性筛选、PCR及酶切鉴定,将所筛选鉴定出的阳性质粒进行测序,最后对测序结果进行分析。结果表明:陕西地方8个毒株(BJ2、FF2、YL2、B01、G5、YX、WH、WG)M基因长约为650 bp,其中YX、WH株本身无BamH 1酶切位点。WH与其它分离株的核苷酸同源性为91.8%～92.6%,而其它的分离株间的同源性为98.8%～99.8%。8个毒株与参考株的核苷酸同源性为74.9%～99.8%。其N端90 aa肽段与对照株相比,不同之处表现为高亲水性氨基酸取代低亲水性氨基酸,这会使其具有更好的抗原性。
- 王晶钰罗艳邓小敏郭抗抗张彦明
- 关键词：M基因
- 鸡传染性支气管炎病毒陕西分离株M蛋白基因的变异及其B细胞表位稳定性被引量：4
- 2007年
- 以陕西8株鸡传染性支气管炎病毒（AIBV）分离株M蛋白的基因序列为基础，应用DNAStar软件中的MegAlign模块对其进行了同源性分析；用Kyte-Doolittle方法、Jameson—Wolf方法、Karplus—Schulz方法、Plot—Emini方法和Garnier-Robson方法综合预测了其中4株代表毒株的M蛋白B细胞抗原表位和二级结构。结果，8株AIBV的M蛋白主要在10～40aa和90～175aa处存在无规律的点突变，与参考毒株H52、M41、SAIB20、LX和Gray的M蛋白的核苷酸序列和预测的氨基酸序列的同源性分别介于87．4％～99．5％和96．3％～99．5％；分离株间的核苷酸序列和预测的氨基酸序列同源性分别介于91．8％～99．8％和95．4％～100％。4株代表株的M蛋白B细胞优势抗原表位都在159～164aa和181～193aa肽段区（这2个区域都包含了无规则卷曲和β-转角结构）或其附近。结果表明，AIBV分离株的M蛋白基因相对保守，只存在无规律的点突变，该变异对AIBVM蛋白B细胞表位的稳定性无影响。
- 王晶钰罗艳张彦明邓小敏姜向阳
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒M蛋白基因变异B细胞表位稳定性
- 鸡肾型IBV地方分离株N基因的克隆及分子遗传变异分析被引量：7
- 2006年
- 用RT-PCR方法对分离于陕西省不同地区的8个鸡肾型IBV毒株的Ⅳ基因分别进行了扩增,将各扩增产物与T载体连接后,转化感受态细胞筛选阳性克隆质粒并进行基因测序,用DNAstar软件将这8个毒株与GenBank收录的7个IBV代表毒株的Ⅳ基因进行了比较分析,研究了其变异情况。结果表明,B01,YL,WH和 YX株与7株代表毒株的同源性较高,而G,BJ,WG,FF株与7个代表毒株的同源性相对较低。氨基酸推导序列比对结果表明,N蛋白突变以散在的点突变形式为主,其中46,48,50,75,78,189,232,236,237,299,301,350,366等位点容易发生突变,突变位点无明显规律性。
- 王晶钰邓小敏张彦明罗艳李鹏郭抗抗
- 关键词：肾型传染性支气管炎病毒地方分离株N基因
- 牛轮状病毒的分离及其RT-PCR鉴定被引量：7
- 2007年
- 采用MA104细胞从疑似轮状病毒腹泻犊牛粪样中进行轮状病毒分离,盲传4代后接种细胞出现明显细胞病变(CPE),对分离病毒进行核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳条带为4∶2∶3∶2型,具备典型A群轮状病毒特征。依据NCBI等登录的牛轮状病毒的VP1基因序列设计一对引物,对其VP1基因进行克隆及序列分析,结果分离毒与国外牛轮状病毒分离株RF的核苷酸同源性为98.9%,与UK的核苷酸同源性为91.5%,证明分离毒株是一株牛轮状病毒。
- 姜向阳邓小敏王晶钰王学艳罗艳
- 关键词：轮状病毒细胞培养
- 鸡传染性支气管炎病毒陕西分离株N基因的克隆与分子遗传变异研究
- 由传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Vires，IBV)引起的鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis，IB)是高度传染的全球性鸡病之一，严重危害养鸡业。IBv众多的血清...
- 邓小敏
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离株基因工程疫苗灭活苗序列同源性
- 文献传递
- 鸭源新城疫病毒的分离鉴定被引量：14
- 2007年
- 从病死肉鸭肝脏中分离到2株病毒(ZH1、ZH2),均能够凝集鸡、肉鸭、绵羊、山羊、猪、人、兔、牛等的红细胞,且这种血凝性可被NDV标准阳性血清所抑制。参照NDV毒力判定标准及其方法对分离毒株ZH1、ZH2进行了鸡胚最小致死量平均死亡时间(MDT)、鸡胚半数感染量(EID50)以及1日龄鸡脑内接种致病指数(ICPI)测定,结果ZH1、ZH2株的MDT为52 h和44 h,EID50为106.4/0.1mL和108.64/0.1mL,IC-PI为1.93和1.975。表明这2株分离病毒均为NDV强毒株。
- 宋战胜王晶钰赵伟李亮邓小敏
- 关键词：新城疫病毒
