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一种酿酒酵母多基因表达载体及其构建方法与应用: 本发明公开一种酿酒酵母多基因表达载体及其构建方法与应用，该表达载体是将酿酒酵母基因组rDNA的1.8kb片段、磷酸甘油激酶启动子和磷酸甘油激酶终止子三个表达元件插入到大肠杆菌－酿酒酵母穿梭表达载体中，并在启动子上游和终止...; 刘泽寰台艳肖文娟王峻梅; 文献传递

绿色木霉EGⅢ基因的克隆及其在工业酿酒酵母中的整合表达被引量：2: 2009年; 通过RT-PCR从绿色木霉AS3.3711中克隆得到EG Ⅲ基因,序列分析显示该基因编码序列全长为1257 bp,编码418个aa,且自身带有21个aa的信号肽序列,与里氏木霉eg3的同源性为99.6%。将该基因连入酿酒酵母多拷贝整合型表达载体pScIKP中获得重组质粒,线性化后电转化酿酒酵母工业菌株AS2.489,通过SDS-PAGE蛋白电泳、刚果红染色和酶活测定对转化子进行了分析。结果表明:转化子有明显的重组EG Ⅲ表达带,能够产生CMC水解圈,说明eg3基因已在酿酒酵母中获得了正确的分泌表达,表达EG Ⅲ的重组菌产酶高峰出现时间为60 h,最高酶活接近120 U/mL,重组酶EG Ⅲ的最适温度为60℃,最适pH为6.0,转化子的遗传稳定性达到99.17%,实现了绿色木霉eg3基因在工业酿酒酵母中的稳定高效表达。; 刘泽寰台艳唐根云全艳彩王峻梅肖文娟龚映雪; 关键词：酿酒酵母绿色木霉

酵母多基因表达载体在纤维素生物转化中应用被引量：6: 2010年; 构建含酿酒酵母组成型强启动子PGK、G418抗性基因及rDNA片段的整合型载体pScIKP,利用rDNA多个同源重组位点,将外源基因以多拷贝整合到酵母染色体上,无需诱导即可持续表达;利用载体位于表达盒两端同尾酶,可插入多个基因表达盒,实现多基因稳定共表达.为检验共表达情况,反转录从绿色木霉中获得纤维素酶基因eg3和cbh2,克隆并转化获得重组酵母菌株S.cerevisiae-ec.该重组酵母能降解羧甲基纤维素形成水解圈;用羧甲基纤维素还原糖法和滤纸酶活力法测定酶活力,其最适温度和最适pH值与所表达单酶相似,表明共表达未影响两种酶的生物学特性;且双酶具有协同作用,能更有效降解非结晶纤维素.pScIKP载体能成功用于多个外源基因共表达和产物协同作用的研究,为构建能直接降解纤维素的酿酒酵母菌株,实现纤维素可再生能源的生物利用奠定了基础.; 龚映雪台艳肖文娟王峻梅唐根云全艳彩刘泽寰; 关键词：纤维素生物转化绿色木霉内切葡聚糖酶纤维二糖水解酶

一种酿酒酵母多基因表达载体及其构建方法与应用: 本发明公开一种酿酒酵母多基因表达载体及其构建方法与应用，该表达载体是将酿酒酵母基因组rDNA的1.8kb片段、磷酸甘油激酶启动子和磷酸甘油激酶终止子三个表达元件插入到大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体中，并在启动子上游和终止...; 刘泽寰台艳肖文娟王峻梅; 文献传递

一种降解纤维素合成乙醇的转基因酿酒酵母菌及其构建方法: 本发明公开一种降解纤维素合成乙醇的转基因酿酒酵母菌及其构建方法，该转基因酿酒酵母菌是将纤维素酶系的三种酶即内切β－1，4－葡聚糖酶、外切β－1，4－葡聚糖酶和纤维二糖酶的基因通过酿酒酵母表达载体共同导入到酿酒酵母菌中，构...; 刘泽寰台艳肖文娟王峻梅; 文献传递

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