王珏
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：浙江大学化学工程与生物工程学系更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 米黑霉脂肪酶基因的高效表达及活性测定被引量：4
- 2012年
- 为了实现米黑霉脂肪酶（Rhizomucor miehei Lipase,RML）基因在大肠杆菌中的高效表达,并得到大量的具有生物活性的脂肪酶,首先通过3种方式提高RML在大肠杆菌中可溶性蛋白的表达量：1）低温诱导（16℃）RML表达;2）新型分子伴侣（Skp）与RML N端融合表达;3）载体pET32a上的Trx.tag与RML N端融合表达。其次对各蛋白质进行纯化及活性测定,各种条件得到的RML比活在（226±10~247±10）U/mg。蛋白质表达结果显示：经低温诱导RML的效果最好,纯蛋白质量浓度为0.86 mg/mL,表明诱导温度是影响可溶性蛋白质表达量的关键因素;活性测定结果表明,Skp和Trx.tag与目的基因N端的融合没有影响RML活性中心（C末端）对底物的结合和催化能力。因此,RML不仅在大肠杆菌中得到高效表达,并且保持原有生物学活性,在工业生产中有应用价值。
- 王珏王丹张兵于洪巍
- 关键词：大肠杆菌活性
- 利用定向进化技术提高米黑霉脂肪酶活性和耐热性的研究
- 脂肪酶(E.C.3.1.1.3)亦称酰基甘油水解酶,在粮油生产、食品工业、化学工业、农业等许多领域有广泛应用。其中米黑霉脂肪酶(Rhizomucor miehei Lipase, RML,基因编号：A34959)是一种能...
- 王珏
- 关键词：前导肽定向进化活性耐热性
- 文献传递
