刘建 作品数:12 被引量:52 H指数:3 供职机构: 长春理工大学生命科学技术学院 更多>> 发文基金: 吉林省科技厅科研基金 国家自然科学基金 吉林省科技发展计划基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 文化科学 农业科学 更多>>
M.natoriense TNJL143-2菌的D-氨基酰化酶的固定化研究 2020年 D-氨基酰化酶可用于D-氨基酸的生产,本研究利用来源于Microbacterium natoriense TNJL143-2的D-氨基酰化酶,分别通过琼脂糖包埋、介孔二氧化硅MCM-41和SBA-15吸附,制备了三种固定化酶,并对三种固定化酶的固定化条件、酶学性质、活性保持时间、重复使用次数、米氏常数等参数进行了研究。结果表明,MCM-41载体固定化酶的蛋白固定率为91.6%,SBA-15载体固定化酶的蛋白固定率为88.0%,琼脂糖包埋法蛋白固定率为79.5%。MCM-41、SBA-15以及琼脂糖三种载体固定化酶最适反应pH均为7.0,最适反应温度范围均为37℃。在固定化酶的活性保持时间以及重复利用活性方面,SBA-15固定化酶同样优于其他两种固定化酶。以D型苯丙氨酸(D-Phe)为底物时,琼脂糖包埋固定化酶的Km为28.8 mol/L,SBA-15固定化酶的Km为25.9 mol/L,MCM-41固定化酶的Km为25.0 mol/L。同时本文还探索了三种固定化酶的pH使用范围及酸碱稳定性、温度使用范围及热稳定性,结果显示,SBA-15作为固定化载体均表现出较广的适用范围及较高的稳定性。在不同条件的反应体系中,SBA-15固定化酶的蛋白损失率始终小于其他两种固定化酶。 贾超然 于笑晨 刘蔚 孙唯轩 陈丹阳 刘建关键词:固定化酶 一株生孢噬纤维细菌的16S rDNA基因序列分析 被引量:3 2005年 利用双层平板法从土壤中分离获得了一株能够降解纤维素的好氧性滑动细菌--生孢噬纤维细菌Sporo-cytophaga sp.JL02,通过菌株基因组DNA的提取、16S r DNA的PCR扩增及克隆、16S r DNA的全序列分析等手段,对该菌株的16S rDNA的基因序列进行了研究。通过扩增,得到了一长度为1560bp的16S rDNA的基因,并对其基因序列进行了分析。 刘东波 刘建 李雁关键词:纤维素降解 RDNA 基因序列分析 包埋前原位TUNEL标记凋亡淋巴细胞的电镜观察 2008年 目的用包埋前原位尾端标记技术在电子显微镜下发现小鼠淋巴结生发中心早期凋亡细胞。方法用GA,PA,PLP分别固定淋巴组织,将其分别切成50μm切片,TUNEL染色,制成1μm切片光镜确认,着色部位制成超薄切片,在电镜下,进行比较观察。结果GA固定的组织中细胞核的TUNEL染色,虽然表面清晰可见,但对组织渗透性较差;PA固定的组织清晰度稍差,但渗透性最好,在电子显微镜下观察效果满意,PLP固定染色效果差,在细胞凋亡的早期,用PA染色时凋亡的细胞核内,可见尚未出现凋亡的生发中心细胞核形态学改变以及核染色质浓缩的核。结论以PA固定的组织,用包埋前技术、TUNEL染色的方法具有简便,染色清晰,易分辨,特异性强的特点,且未见标本损坏现象。 刘铎 刘建 前田邦彦关键词:凋亡 电镜 生物材料制备胰岛素缓释微球的研究 蛋白类药物对疾病预防、临床治疗及解决体内蛋白质数量缺乏和功能丧失均有一定作用。近年来,蛋白类药物使用虽呈现上升趋势,但因制备工艺复杂、投递效率低、生物利用度差等诸多原因而受到限制,其中给药途径最为关键。随着生物物理学、生... 赵丽辉 王会堂 刘建 李景梅 李甜文献传递 金顶侧耳液体培养基优化研究及其应用 被引量:2 2009年 运用正交设计原理,以金顶侧耳液体培养菌丝干重为测量指标,在金顶侧耳液体培养基马铃薯20%,葡萄糖2.5%,蛋白胨0.3%的基础上进行进一步优化研究。结果表明:金顶侧耳液体培养KH2PO4适宜比例为0.35%,MgSO4·7H2O适宜比例为0.35%,维生素B1适宜比例为1mg/L。应用上,定量比较了液体与固体菌种用于出菇培养金顶侧耳两种生产模式。结果显示:用液体菌种出菇培养金顶侧耳,虽然有一定优势,但发酵菌丝体更适合用于生产食品及真菌类药物。 周效华 黄子健 刘建 田坚关键词:正交设计 干重 菌种 动物生理学理论课教学模式的探讨与实践 被引量:6 2011年 动物生理学是研究动物生命活动及其规律的科学,具有抽象性、系统性、微观性、实验性、动态性和进展快等特点。根据这些特点对动物生理学理论课教学模式进行了探讨。系统地讨论了每一教学环节的教学方法与手段,让学生系统地掌握动物生理学的基本知识、基本理论。 李明堂 刘建 王清爽关键词:动物生理学 理论课 教学模式 生孢噬纤维菌CMcase基因的分离与表达 被引量:1 2011年 从生孢噬纤维菌中分离完整的基因组DNA,经过PstI限制性内切酶部分酶切后,在T4DNA连接酶作用下,将酶切的片段连接到载体pUC18的PstI位点中,然后转化到E.coli DH5α中,构建了基因组文库,经过筛选获得4.2x103个重组子。经过刚果红平板筛选获得了含有CMCase基因片段的重组子,在E.coli中进行表达,E.coli在37℃培养25~30h,培养液中CMCase活力达到22.8U/mL。 刘建 张春玉 李巍 刘东波关键词:生孢噬纤维菌 基因组文库 “双一流”背景下的生理学教学改革探索与实践 2021年 “双一流”建设是国家培养一流人才的重大战略规划。生理学主要研究以人体为主的生命活动内在规律和运行机制,是生命科学的一个重要分支。在此背景下,本文从课程目标、学习目标、教学内容、教学资源、教学方法、考核方式等方面介绍了生理学教学改革和实践的情况,以便为生理学课程建设、提高教学质量提供参考路径。 李明堂 刘建 张晓关键词:生理学 教学改革 工科院校分子生物学和基因工程整合教学模式初探 被引量:2 2011年 结合工科院校生物工程、生物技术专业分子生物学和基因工程教学过程中遇到的问题,通过对教学内容和教学方法的整改研究和实践,不但利于学生加深对已学基础知识的理解和融会贯通,而且可以提高学生的动手实践能力,提高学生的综合素质,适应将来日趋紧张的学习和工作。 刘建 李甜 孙立志 李洪广关键词:分子生物学 基因工程 工科院校 教学改革 新型D-氨基酰化酶的特性及固定化酶的研究 2015年 本文研究了一株具有N-酰基酰化酶(DAA)生产能力的细菌,通过对其酶学特性及固定化酶用于D-氨基酸的生产进行了研究。显示此酶的最适温度为37℃,最适p H7.4,1mmol/L以下的Ca Cl2,Cd Cl2,Co Cl2,Cu Cl2,Fe Cl2,Hg Cl2,Mn Cl2,Zn Cl2对酶的活性没有影响,在20mmol/L的EDTA条件下仍可保持65%的酶活性。底物特异性显示酶的最佳底物是N-乙酰-D-苯丙氨酸,50mmol/L以上的N-乙酰-D-苯丙氨酸显著抑制酶的活性。利用海藻酸钠固定酶后,在30℃条件下,使用50mmol/L的N-酰基-D-苯丙氨酸底物进行的降解实验显示水解率可以达到84%,转化批次达到6次以上,活性保持达到70小时以上。 刘建 李明堂 李洪广 孙立志关键词:固定化酶 酶学特性