刘芳芳
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：辽宁医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省自然科学基金更多>>
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- 顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用被引量：3
- 2010年
- 目的建立新生昆明小鼠离体顺铂耳毒性模型,研究顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用。方法分离生后3d的昆明小鼠耳蜗基底膜,在含有1%牛血清白蛋白的DMEM/F12培养基中进行培养。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法观察不同浓度顺铂对小鼠耳蜗毛细胞的损伤,同时应用Hoechst 33258染色技术检测耳蜗毛细胞的凋亡。结果不同浓度顺铂均可使小鼠耳蜗毛细胞发生凋亡的形态学变化。顺铂浓度为4mg·L-1时,耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率明显增大,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。随着顺铂浓度的增高(8～64mg·L-1),耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率亦显著增大,呈现明显的量效关系(P<0.01)。结论应用新生昆明小鼠能建立可靠的离体顺铂耳毒性模型;顺铂可导致耳蜗毛细胞凋亡,提示凋亡可能是顺铂耳毒性机制之一。
- 刘芳芳王爱梅许涛林宇涵
- 关键词：顺铂耳蜗毛细胞器官培养
- 顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的观察顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶(calpain)表达的影响,探讨顺铂致耳蜗毛细胞凋亡的机制。方法取出生后3d的昆明小鼠300只(600耳),分离出耳蜗基底膜600条,体外培养24h后,随机分为对照组和4、8、16μg/ml顺铂组,每组150条;对照组加入2ml新鲜培养基,顺铂组分别加入2ml含不同浓度顺铂(4、8、16μg/ml)的新鲜培养基,再继续培养24h后,应用Hoechst 33258荧光染色观察耳蜗毛细胞凋亡情况,并应用免疫荧光染色和免疫印迹(Western blot)技术检测calpain 1(μ-calpain)和calpain 2(m-calpain)在耳蜗毛细胞的表达。结果 4、8、16μg/ml顺铂组耳蜗毛细胞凋亡率分别为15.63%±0.20%、38.40%±2.64%和64.24%±0.05%,均高于对照组(5.55%±0.12%),呈现明显的量效关系;不同浓度顺铂组μ-calpain和m-calpain的表达均较对照组明显增强(P<0.01),且m-calpain的表达随顺铂浓度的增高而明显增强(P<0.01)。结论顺铂可通过calpain通路诱导小鼠耳蜗毛细胞凋亡,从而发挥毒性效应。
- 张立伟刘芳芳于利王爱梅
- 关键词：顺铂耳蜗毛细胞钙蛋白酶小鼠
