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富含β-胡萝卜素转基因水稻EH基因水平转移研究: 2016年; 以富含β-胡萝卜素转基因水稻EH喂养大鼠,在90 d喂养试验结束后,分别对大鼠十二指肠、回肠、咬肌及肠道微生物进行相关基因PCR扩增,分析特异性片段在大鼠体内的转移情况。结果显示:试验中饲喂含45%转基因大米饲料、含45%亲本‘中花11'大米配合饲料和全价营养饲料的所有大鼠均未发生基因水平转移,表明转基因水稻EH中的外源基因没有向大鼠的组织和肠道微生物进行转移。; 吴洋洋许燕胡瑞丽任方方赵凯唐雪明赵笑; 关键词：转基因水稻基因水平转移

猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测方法的研究被引量：4: 2016年; 本研究旨在建立有效的针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及开发试剂盒。采用环介导等温扩增方法(LAMP)检测猪圆环病毒2型(PCV2),对PCV2的ORF2基因设计出3对特异性引物,扩增PCV2基因的最佳温度和时间优化到59℃孵育55 min。用该方法对临床样品进行检测,LAMP检测对PCV2的检测限为10拷贝/μL,而常规PCR检测法的检测限为1 000拷贝/μL,表明LAMP检测法灵敏度高。该检测法不会与猪圆环病毒Ⅰ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎的猪病毒和轮状病毒发生交叉反应。用建立起的LAMP检测法对1 100个临床样品进行检测,950个样品被检测出为阳性样品。稳定性试验表明该试剂盒可以耐受至少40次的反复冻融。结果显示,该方法建立的猪圆环病毒2型诊断方法灵敏度高,特异性强,稳定性好。; 胡瑞丽倪建平赵笑赵庆史斌赵桓震赵斌安赵凯; 关键词：猪圆环病毒2型环介导等温扩增诊断试剂盒

一种用于转基因玉米多重检测的微滴PCR偶联DGGE分析方法: 一种用于转基因玉米多重检测的微滴PCR偶联DGGE分析方法，首先，针对待测样品分别设计PCR特异性引物对，进行微滴PCR扩增，扩增产物经纯化后进行DGGE电泳，并进行SYBRGreen染色，在紫外光下显影观察，来检测转基...; 唐雪明赵凯赵笑范小瑞杜亚楠史斌赵桓震赵斌安潘磊张琪张晓霞; 文献传递

一种猪戊型肝炎病毒抗原表位及它的应用: 本发明公开了一种猪戊型肝炎病毒抗原表位及它的应用，所述猪戊型肝炎病毒抗原表位序列如SEQ ID No：8所示。通过计算机软件筛选和实验验证得到的猪戊肝病毒的抗原表位，一方面可以将其应用于快速特异猪戊肝诊断试剂盒，用于猪戊...; 赵凯赵笑施伟任方方吴洋洋刘启文李震于瑞嵩唐雪明朱宏谭芙蓉吴萧王金斌; 文献传递

断奶仔猪多系统衰竭综合征防控新技术的建立及应用: 赵凯赵笑倪建平胡瑞丽易建中李春华赵庆; 项目所属科学技术领域：属于农业生物技术领域。主要技术内容：猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的一种重要疾病,严重发病地区死淘率高达40%以上。由于P...; 关键词：; 关键词：断奶仔猪疾病防治多系统衰竭综合征

猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测试剂盒的研制及应用被引量：2: 2017年; 为了开发针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及其试剂盒,对PCV2的ORF2基因设计相应的特异性引物和探针,采用荧光定量PCR方法检测PCV2。试验表明:该方法循环阈值(Ct)与标准DNA模板在10~1—10~7拷贝/μL浓度范围内具有极好的线性关系,相关系数为0.9999;重复性好,批内试验中Ct值的变异系数在0.59%—1.05%,批间试验的Ct值变异系数为1.9%—4.2%;研制的检测试剂盒与猪瘟病毒(HCV)、猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)不发生交叉反应,检测极限和定量极限分别为10和100拷贝数。用此方法对1 000个临床样品进行检测,结果710个被检测为阳性。结果显示,所研制的PCV2诊断试剂盒灵敏度高,特异性强,稳定性好,为PCV2的检测和流行病学的调查提供了一种简便快速的诊断方法。; 任方方胡瑞丽倪建平许燕李春华赵笑杜亚楠赵凯; 关键词：猪圆环病毒2型荧光定量 PCR检测诊断试剂盒

一种直扩RPA现场可视化检测方法: 一种直扩RPA现场可视化检测方法，包括如下步骤：1)粗提待测样品基因组DNA；2)针对目的基因设计RPA特异性引物；3)将RPA特异性引物加入到RPA反应体系中进行RPA扩增反应，所述RPA反应体系中成分的终浓度为：外引...; 赵凯范小瑞赵笑杜亚楠张琪张晓霞吴文静张皖静赵庆史斌赵桓震赵斌安潘磊; 文献传递

重组酶聚合酶扩增技术的研究进展及其应用被引量：27: 2018年; 重组酶聚合酶扩增技术(RPA)是一种新型的恒温核酸扩增技术。本文介绍了RPA技术的扩增原理、引物设计、成本分析及产物检测等内容,归纳了RPA技术与其他等温扩增方法的优缺点,并对RPA技术在病原微生物、基因突变和食品安全检测中的应用现状进行了阐述。希望RPA技术可以得到更多生物学家的关注,更好地应用于生命科学的各个领域。; 杜亚楠赵笑范小瑞张琪赵凯赵凯; 关键词：核酸检测引物设计

微滴PCR技术的研究进展被引量：2: 2016年; 微滴PCR(microdroplet PCR)技术结合了PCR技术和乳化技术,该技术在乳化剂中进行,是一种新型的核酸扩增技术。它可以高效、高通量地扩增DNA分子,在生命科学研究领域得到了广泛的应用。文章就微滴PCR技术的基本原理、建立与发展及其应用作一综述。; 胡瑞丽杜亚楠赵凯施伟赵笑任方方吴洋洋唐雪明

一种基于多重微滴PCR偶联荧光分光光度法的生物基因定性、定量、高通量检测方法: 本发明公开了一种基于多重微滴PCR偶联荧光分光光度法的生物基因定性、定量、高通量检测方法。首先，设计特异性引物并对其选择性地进行不同荧光基团标记，随后应用上述荧光标记的特异性引物进行微滴PCR扩增，扩增产物经纯化后，用荧...; 赵凯施伟唐雪明赵笑任方方吴洋洋胡瑞丽; 文献传递

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赵笑