唐琦 作品数:4 被引量:5 H指数:2 供职机构: 福建农林大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 福建省科技计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
琯溪蜜柚单染色体AFLP指纹图谱构建和分类 柚(Citrusgrandis(L.)Osbeck)是柑橘属真正柑橘类植物,是我国的特色果树。由于具有生长周期长和遗传背景较复杂等特点,致使柚的精确物理图谱一直难以构建,这对其在基因组学、分子生物学等方面的深入研究造成了... 唐琦关键词:琯溪蜜柚 单染色体 显微分离 指纹图谱 特异分子标记 文献传递 柚单染色体微分离制片技术研究 被引量:2 2010年 以“琯溪蜜柚”幼胚为材料,对单染色体微分离制片过程中3个关键因子对制片的影响效果进行了研究;分别设计了6个不同酶解时间、4个冰水固缩时间和两种不同染液染色处理,通过显微镜观察和拍照;结果表明:用2%纤维素酶与0.5%果胶酶的混合液处理40~60min,后低渗处理之后进行20~30min冰水固缩处理和卡宝品红染色组合可以得到理想的制片效果,背景干净,各单染色体充分分散,容易辨认和挑取;该方法制片适合小型单染色体开展下一步的微分离和微克隆研究。 王平 乔锋 王发明 柳燕挣 唐琦关键词:染色体制片 柚(Citrus grandis Osbeck)单染色体LA-PCR-AFLP分子标记体系的建立 被引量:1 2010年 通过微分离和微克隆技术,对柚单染色体LA-PCR-AFLP技术体系中反应程序、模板浓度等关键参数进行了优化和引物筛选。结果表明:退火温度较高的程序TD3[退火梯度:72℃→65℃30 s(-0.5℃/cyc)]扩增效果较好;稀释100倍(10 ng/μL)为最适模板量;10个引物对组合扩增多态性较好。对22条单染色体的AFLP多态性分析和dot-blot杂交验证,表明较好地构建了柚单染色体LA-PCR-AFLP体系。这为柚单染色体的识别和文库构建提供了试验基础。 王发明 王平 唐琦 柳燕贞 陈伟关键词:单染色体 柚(Citrus grandis Osbeck)单染色体LA-PCR-AFLP技术体系中外源污染的防控 被引量:2 2010年 对柚单染色体LA-PCR-AFLP技术体系中外源DNA污染问题中不同试验用水、加接头连接前后步骤对水污染的敏感度以及LA-PCR形成的非特异性亮带现象进行对比研究。结果表明:8种试验用水中BT水(Bioteke,RNase-free and DNase-free Water)的防控效果最佳;水的质量对LA-PCR过程中接头连接之前的步骤影响最大,对加接头之后的步骤也有一定的影响;非特异性亮带为引物自连形成的多聚体,与外源污染无关。本试验通过对外源污染的来源和关键步骤实施严格防控,经过dot blot验证,使外源污染能够得到有效控制。这为建立高质量的柚单染色体文库奠定了基础。 王发明 王平 唐琦 柳燕贞 陈伟关键词:单染色体 外源污染 DOT BLOT