朴永哲
- 作品数：38 被引量：217H指数：8
- 供职机构：大连工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 不同传代次数酿酒酵母细胞内蛋白质组学分析被引量：3
- 2014年
- 以酿酒酵母为研究对象,在其传代过程中利用细胞形态,生长、降糖速率以及絮凝性来表征酵母衰老,采用苯酚萃取法提取胞内蛋白质组,并利用双向电泳对其进行差异性分析。结果显示,随传代次数的增加,酵母细胞表面出现褶皱,代谢活力下降,絮凝性增强,表明酵母经多次传代后出现衰老现象。同时对不同代数酵母胞内蛋白质组图谱进行差异性分析后表明:第8代酵母胞内有4个新增蛋白斑点及5个表达上调蛋白斑点,培养至16代后有6个蛋白质表达量显著下调,同时有3种蛋白质表达被关闭。进一步鉴定、解析上述蛋白质将有助于阐述酵母衰老的调控机制。
- 季杨杨朴永哲袁方黄玮王世全杨洪泽赵长新
- 关键词：酿酒酵母传代培养蛋白质组双向电泳
- 酿酒酵母FFC2146胞内蛋白及胞外蛋白双向电泳条件优化及图谱建立被引量：6
- 2011年
- 通过对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的培养基、培养条件及蛋白质提取方案的优化,建立了酿酒酵母胞外和胞内蛋白双向电泳图谱制作方法。在YNB培养基中培养20 h,经过离心取上清-超滤-冻干可得到酿酒酵母胞外蛋白质样品;用SDS缓冲液悬浮酵母细胞-煮沸-超声-增溶,得到了酿酒酵母胞内蛋白质样品。经过双向电泳分离、硝酸银染色和PDQuest图像分析可以检测到了200多种酿酒酵母胞外蛋白和500多种酿酒酵母胞内蛋白。
- 王祥余朴永哲翟明昌王晓丹程贺赵长新
- 关键词：蛋白质双向电泳酿酒酵母
- 基于pmoA基因的污泥干化芦苇床中甲烷氧化菌多样性分析被引量：5
- 2015年
- 为了探讨污泥干化芦苇床稳定化污泥中甲烷氧化菌的多样性,利用PCR-DGGE技术分析了不同时期、不同干化床污泥中甲烷氧化菌群落的变化。通过DGGE图谱聚类分析发现,同一时期不同干化床污泥中甲烷氧化菌群落相似度较高;而同一干化床、不同时期污泥中的甲烷氧化菌群落有一定的差异。结果表明,污泥干化芦苇床中优势种属主要随芦苇生长时期和污泥稳定化时间延长而改变。基于序列和系统发育树分析,干化床污泥样品中主要的优势菌属是未培养的I型甲烷氧化菌,表明有通气结构的芦苇床更能有效氧化甲烷,有利于减少甲烷的排放。
- 王世全朴永哲崔玉波周建康古洋顾晓欣
- 关键词：环境工程学甲烷氧化菌DGGE多样性
- 混菌发酵中不同分子量代谢产物对非酿酒酵母胞内蛋白及酒体有机酸的影响被引量：6
- 2011年
- 本研究采用透析袋发酵法研究了酿酒酵母产生的不同分子量代谢产物对非酿酒酵母胞内蛋白和酒体有机酸的影响。当截留分子量为3.5 kD和10.0 kD时非酿酒酵母的存活时间分别延长至18 d和22 d,表明通过改变菌种之间物质的交换可以调节非酿酒酵母的存活时间。蛋白质解析发现共有65个蛋白质斑点表达出现差异,占蛋白质总数的13%,经质谱鉴定表明与这些蛋白同类固醇、赖氨酸、有机酸和ATP的生物合成有关。与截留分子量为10 kD的透析袋发酵相比,在截留分子量为3.5 kD的混菌发酵中,酒石酸含量升高5.1%、醋酸含量下降44.3%,说明通过限定菌体间代谢产物的沟通可以调整酒的滴定酸度和挥发酸度。
- 翟明昌朴永哲王祥余夏先锋沈海萍赵爽赵长新
- 关键词：双向电泳混菌发酵
- 肠内菌群的功能与功能性食品被引量：14
- 1997年
- 光冈知足朴永哲
- 关键词：细菌功能性食品
- 一种从活性污泥中提取微生物总DNA的方法被引量：7
- 2008年
- 对活性污泥的微生物群落进行研究的首要前提是获得大量的高纯度微生物基因组DNA。建立了一种高效、简便的提取活性污泥总DNA方法。从提取的核酸总量、纯度、基因组完整性等多方面对所得到的DNA质量进行了评价,结果表明,从单位活性污泥中提取的DNA得率为105～823μg/g,结构完整,纯度很高,无需进一步的纯化,可直接进行微生物群落分析及构建文库等后续分子生物学操作。现在实验室使用的提取活性污泥中DNA的方法,纯度普遍都无法达到PCR反应和建立文库的要求,建立的活性污泥DNA提取方法则可以克服这一难题。
- 郑维权春善朴永哲王军华范圣第
- 关键词：活性污泥DNA提取PEGRDNA
- 不同国产酿造大麦蛋白质双向电泳差异性分析被引量：1
- 2013年
- 应用双向电泳技术对不同品种的国产酿造大麦的蛋白质组成进行了差异性分析。电泳图谱显示，所有供试样品的双向电泳图谱中的蛋白质点均达到300个左右，几种供试大麦品种的蛋白质组成基本相同，蛋白质主要分布于等电点7．6～10．0、分子量大于43．0kDa的区域，其数量占总蛋白质数量的20％左右。而蛋白组成的主要差异蛋白质点共有6个，分子量在43～66kDa之间，等电点在6．5左右，基本上找到了不同品种国产酿造大麦蛋白组成的差异。
- 刘宝祥朴永哲苏政波董亮袁照路张雨扬赵长新
- 关键词：大麦蛋白质组双向电泳
- 细菌对重金属的抗性及解毒机理研究进展被引量：4
- 2015年
- 重金属污染物随工业废水排放到环境中,并通过生物链的富集作用,对环境和人类健康造成极大危害。自然界中很多微生物对重金属具有吸附性、耐受性和减小毒性损伤的特点。其中,细菌因其结构简单且易于培养,被广泛应用于研究对重金属的抗性及解毒。选取银(Ag)、铜(Cu)、铅(Pb)和铬(Cr)4种重金属,结合国内外的研究成果,系统地探讨了细菌对重金属的抗性及解毒机理。
- 朴永哲黄玮崔玉波
- 关键词：环境工程学细菌重金属抗性解毒
- 丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其应用
- 2013年
- 目的丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其验证。方法利用PCR技术扩增丙酸杆菌hemE基因上、下游约500 bp左右片段,构建由上下游同源臂及hygB抗性基因组成的打靶质粒pPK705-arms-hygB。将打靶质粒转入丙酸杆菌感受态细胞,利用同源重组技术定向敲除hemE基因,并通过连续传代培养,消除外源质粒。最后,利用PCR技术验证丙酸杆菌染色体和打靶质粒发生同源重组。结果成功敲除了丙酸杆菌hemE基因。结论打靶质粒pPK705-arms-hygB能够与宿主基因组DNA发生重组,对稳定地改善其整个代谢途径的研究奠定了方法学基础。
- 郭敏利朴永哲王世全黄玮周华成杨洪泽唐丽娜
- 关键词：基因敲除
- 羊草OEE1基因的克隆及盐胁迫下的表达被引量：5
- 2011年
- 从羊草(Leymus chinensis)叶片cDNA文库中克隆得到可能编码33 kD的光系统Ⅱ(PSⅡ)外周蛋白(oxy-gen-evolving enhancer protein1,OEE1)全长cDNA(GenBank登录号为EF583851),命名为LcOEE1.序列分析结果表明,该cDNA全长1 107 bp,5′非编码区为32 bp,3′非编码区为71 bp,编码区长987 bp,编码328个氨基酸.BAL-STp比对发现,该基因氨基酸序列与已报道的小麦和水稻中的OEE1序列具有95%和94%的相似性.聚类分析表明,该基因与小麦和水稻的亲缘关系较近,与拟南芥和菠菜OEE1基因的亲缘关系较远.Northern杂交结果表明,在200 mmol/L的NaCl处理7 d的幼叶中,OEE1 mRNA的表达量明显高于未处理的对照,说明羊草中OEE1基因受盐诱导.
- 金华王璐朴永哲刘磊姜国斌
- 关键词：羊草CDNA文库
