李成仁
- 作品数:4 被引量:21H指数:3
- 供职机构:江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 猪Th1/Th2型细胞因子重组质粒实时荧光定量PCR标准曲线的建立被引量:8
- 2009年
- 依据GenBank登录的猪Th1型细胞因子(IL-2、IL-12、IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)的核苷酸序列设计特异性引物,经RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞中扩增和克隆了上述因子的101 bp核苷酸片段。测序鉴定后,将重组质粒10倍系列稀释后作为标准模板,通过实时荧光定量PCR方法,建立了它们各自的标准曲线及直线回归方程。结果表明,该方法具有线性关系好,特异性、敏感性、重复性高等特点,为猪体内IL-2、IL-12I、FN-γ、IL-4、IL-6和IL-10的mRNA水平的定量检测,提供了必要的技术手段。
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- 关键词:TH1/TH2型细胞因子外周血单个核细胞重组质粒实时荧光定量PCR
- 中国猪群存在Torque teno Virus(TTV)感染被引量:9
- 2010年
- 为了探讨中国猪群TTV的感染现状以及是否存在新的基因亚型,基于TTV1和TTV2相对保守的5’非翻译区(5’UTR)设计引物,采用PCR法对2008~2009年采集于中国江苏省的138份猪血清进行了检测。结果表明,中国猪群,TTV1的感染率为15.9%,TTV2的为34.8%,共感染率为5.8%。所扩增片断的核苷酸序列分析结果表明,中国TTV1和TTV2流行毒株之间的核苷酸同源性分别为87.3%~93.8%和74.8%~99.1%,与GenBank其他TTV1和TTV2毒株的同源性分别为69.6%~100.0%和74.8%~99.1%。系统进化分析结果表明,中国TTV1和TTV2流行毒株存在新的基因亚型。
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- 猪TT病毒1型CJNY株基因组的核苷酸序列
- 本发明公开了猪TT病毒1型CJNY株的完整核苷酸序列,属生物技术领域。该序列长2879个碱基。与已报道的三株完整基因组序列的TT病毒1型(GQ120664、AY823990和AB076001)的核苷酸同源性为68.1%-...
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- 文献传递
- 应用高分辨熔点曲线分析区分类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型被引量:4
- 2010年
- 为评价高分辨熔点曲线分析在快速鉴别类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型中的应用。在Cor-bett Rotor-Gene 6000定量PCR仪上,利用EvaGreen荧光染料对靶核苷酸序列进行扩增,建立HRM分析P1和PCV2的工作流程。在优化各种条件基础上,利用HRM分析可区分相差1个碱基的靶序列。因此,HRM分析可为P1和PCV2的分子诊断提供一种新的技术手段。
- 温立斌何孔旺杨汉春郭容利钟书霖周俊明李成仁陈梦海
- 关键词:猪圆环病毒2型