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杨雪: 作品数：10 被引量：12H指数：2; 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目重庆市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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生物制剂在结缔组织病相关间质性肺病中的应用: 2024年; 结缔组织病相关间质性肺病(connective tissue disease-related interstitial lung disease,CTD-ILD)目前的治疗多采用激素联合免疫抑制剂治疗,但仍有一部分患者无法从中获益,近年来,有研究发现生物制剂在对传统疗法无效的CTD-ILD患者中取得了不错的治疗效果。本文回顾了现有的生物制剂治疗CTD-ILD的疗效及其相关不良反应,为下一步CTD-ILD的治疗选择提供依据。; 杨雪唐小葵; 关键词：结缔组织疾病间质性肺病生物制剂

PLCε通过PKCα/β/TBX3信号通路调控人膀胱癌细胞系T24的迁移和侵袭被引量：1: 2015年; 目的体外实验研究PLCε基因调节人膀胱癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法设计并合成针对PLCε基因mRNA的寡核苷酸序列,构建重组腺病毒Ad-sh PLCε。T24细胞感染Ad-sh PLCε腺病毒后,用Western blot检测PKCα/β及TBX3、E-cadherin的表达;用划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验检测膀胱癌细胞T24的迁移、侵袭能力。结果 Ad-sh PLCε重组腺病毒感染膀胱癌细胞T24,对其PLCεmRNA表达抑制率为75.6%,对其PLCε蛋白表达抑制率为67.4%。Ad-sh PLCε感染组T24细胞迁移能力较空载组和空白对照组明显减弱(P<0.05);重组腺病毒Ad-sh PLCε感染组T24细胞穿膜细胞数较空载组和空白对照组明显减少(P<0.05)。Ad-sh PLCε重组腺病毒感染膀胱癌T24细胞后下游PKCα/β的活化受到抑制(P<0.05),同时,TBX3的表达减少,而E-cadherin的表达增高(P<0.05)。结论通过以重组腺病毒干扰抑制PLCε基因,能有效抑制膀胱癌T24细胞系中PLCε下游PKCα/β的活化情况及TBX3,E-cadherin的表达变化,并且对T24细胞的迁移、侵袭能力具有一定的抑制作用。; 欧俐苹杜红飞杨雪唐敏蔡晓钟罗春丽; 关键词：膀胱癌迁移

HepaCAM联合吡柔比星抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖被引量：1: 2015年; 目的:研究肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepa CAM)联合吡柔比星(pirarubicin,THP)对膀胱癌细胞BIU-87的增殖影响。方法:将BIU-87细胞分为空白处理组、hepa CAM过表达腺病毒(adenovirus-GFP-hepa CAM,Ad-GFPhepa CAM)处理组、THP处理组、Ad-GFP-hepa CAM联合THP处理组。噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞周期,real-time PCR检测细胞周期相关基因cyclin D1,CDK2的m RNA表达。将空白、空载腺病毒(adenovirus-GFP,Ad-GFP)、hepa CMA过表达腺病毒(Ad-GFP-hepa CAM)处理的BIU-87细胞分别注射于裸鼠皮下,观察裸鼠成瘤情况并记录瘤体体积,4周后处死裸鼠。切取各组瘤体组织,组织切片行HE染色和免疫组化检测hepa CAM蛋白的表达。结果:Ad-GFP-hepa CAM联合THP处理组,与THP处理组比较,BIU-87细胞增殖受到明显抑制(F=2.702,P=0.00);细胞周期明显阻滞于G0/G1期(F=10.989,P=0.000);cyclin D1、CDK2的m RNA表达明显下调(F=5.4299,P=0.000)。Ad-GFPhepa CAM处理组的BIU-87细胞成瘤体积明显低于空白处理组(F=12.587,P=0.000)。结论:hepa CAM基因能够增强吡柔比星对膀胱癌BIU-87细胞的增殖抑制作用。; 吕长坤万雪莲马菲菲杜红飞杨雪罗春丽; 关键词：HEPA 吡柔比星膀胱癌 CYCLIN CDK2

5-氮杂胞嘧啶核苷联合hepaCAM腺病毒通过抑制p-AKT诱导膀胱癌细胞T24凋亡被引量：4: 2014年; 目的:研究5-氮杂胞嘧啶核苷(5-azacytidine,azac)联合肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)腺病毒对膀胱癌细胞T24凋亡的影响及可能机制的探讨。方法:7种不同因素分别处理培养的膀胱癌细胞T24,hoechst 33258染色检测各处理组细胞凋亡率,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞早期凋亡率,RT-PCR检测hepaCAM及B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,bcl-2)mRNA的表达,Western blot检测hepaCAM、p-AKT、total-AKT、bcl-2蛋白的表达。结果:hoechst 33258显示,azac联合hepaCAM腺病毒组细胞凋亡率为(45.21±0.06)%,明显高于hepaCAM腺病毒组(15.60±0.02)%和azac组(26.30±0.02)%,差异有统计学意义(P=0.003,P=0.008);FCM显示,azac联合hepaCAM腺病毒组细胞早期凋亡率为(16.05±0.06)%,明显高于hepaCAM腺病毒组(3.90±0.02)%和azac组(9.67±0.02)%,差异有统计学意义(P=0.002,P=0.043);RT-PCR显示,与单独hepaCAM腺病毒组和azac组相比,azac与hepaCAM腺病毒联用可以上调hepaCAM mRNA的表达(P=0.004,P=0.000),下调bcl-2 mRNA的表达,差异有统计学意义(P=0.026,P=0.030);Western blot显示,与单独hepaCAM腺病毒组和azac组相比,azac联合hepaCAM腺病毒组可上调hepaCAM蛋白的表达(P=0.003,P=0.003),同时下调p-AKT(P=0.001,P=0.005)和bcl-2(P=0.000,P=0.002)蛋白的表达,差异有统计学意义。结论:azac联合hepaCAM腺病毒可能通过抑制p-AKT的磷酸化水平加速诱导T24细胞凋亡,可为膀胱癌的治疗提供新的思路。; 王晓荣杨雪王胤吴小候唐敏罗春丽; 关键词：膀胱癌细胞T24 P-AKT 细胞凋亡

膀胱癌MB49细胞exosomes对MDSCs增殖及活性的影响被引量：4: 2015年; 目的探讨膀胱癌MB49细胞来源的外泌体(exosomes)对MDSCs细胞扩增、活化的影响及机制。方法用超滤联合蔗糖重水密度梯度离心法分离纯化膀胱癌MB49细胞分泌的exosomes;电镜形态学分析及Western blotting鉴定;流式细胞仪检测MDSCs比例;ELISA检测VEGF和IL-6;RT-PCR和Western blotting检测cyclin D1、Arg-1 m RNA和蛋白的表达;Western blotting检测p-STAT3和p-NF-κB的变化。结果成功分离纯化得到膀胱癌MB49细胞分泌的exosomes。exosomes可促进MDSCs扩增及活化。实验组MDSCs比例明显升高;Cyclin D1及Arg-1 m RNA和蛋白的表达均上调;p-STAT3和p-NF-κB的表达也上调。结论膀胱癌MB49细胞来源的exosomes能促使MDSCs细胞扩增、活化。研究和分析MDSCs的免疫抑制机制,为疾病的治疗寻找行之有效的新靶点。; 刁建军宋学东杨雪王清松罗春丽张尧吴小候; 关键词：MDSCS 膀胱癌扩增

荷瘤小鼠脾脏髓源抑制细胞的分选及鉴定: 2014年; 目的研究荷瘤小鼠脾脏中髓源抑制细胞(myeloid derived suppresser-cell,MDSCs)的分选与鉴定方法。方法常规培养小鼠肾癌细胞(Renca细胞),于Balb/c小鼠皮下建立小鼠肾癌模型;分离小鼠脾脏制成单细胞悬液,磁珠分选Gr-1+CD11b+双阳性的MDSCs;台酚蓝染色检测细胞存活率;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)测其细胞纯度;显微镜下观察细胞形态;免疫荧光测其表面Gr-1、CD11b荧光表达情况;RT-PCR检测Cox2和Arg-1的m RNA的表达情况;小鼠皮下成瘤实验观察MDSCs促肿瘤生长。结果成功建立小鼠肾癌模型,磁珠分选后经FCM检测Gr-1+CD11b+双阳性的MDSCs细胞可达92.3%,显著高于分选前(P<0.01);免疫荧光鉴定结果显示:分选后的细胞形态完整,Gr-1和CD11b的荧光表达于细胞膜且2种荧光可以融合;RT-PCR检测分选后的MDSCs细胞群的Cox2和Arg-1的m RNA相对表达量显著高于分选前(P<0.05);小鼠皮下成瘤观察到MDSCs组与实验对照组有显著差异(P<0.05)。结论用免疫磁珠从荷瘤小鼠脾脏中成功分选得到MDSCs,具有较高纯度和良好的生物活性,为后续实验提供了理想的细胞来源。; 刁建军杨雪宋学东陈仕友王胤王晓蓉罗春丽张尧吴小候; 关键词：MDSCS 脾脏磁珠分选

PLCε基因通过NF-κB/p65途径抑制肾癌786-0细胞的增殖被引量：2: 2014年; 目的探讨RNA干扰技术沉默人源磷脂酶Cε(PLCε)基因对肾癌786-0细胞p65核转位的调控,对786-0细胞增殖的影响及其机制。方法用携带PLCεshRNA基因的真核表达质粒pGenesil-PLCε转染786-0细胞,克隆形成实验检测786-0细胞的增殖,RT-PCR检测PLCε、c-Myc和COX-2 mRNA的表达,Western blot检测PLCε、c-Myc、COX-2和p65总蛋白及p65在细胞核的表达,细胞免疫荧光检测p65在细胞核与细胞质的定位。同时应用p65特异的抑制剂BAY11-7082处理786-0细胞,Western blot检测c-Myc和COX-2蛋白的表达。结果转染pGenesil-PLCε质粒的786-0细胞生长明显受抑制;转染pGenesil-PLCε质粒细胞中PLCε、c-Myc和COX-2 mRNA和蛋白表达水平均较对照组pGenesil-NP明显下调(P<0.01),且抑制核中p65蛋白的表达(P<0.01),细胞免疫荧光结果显示转染pGenesil-PLCε质粒组p65在细胞核中的表达较对照组pGenesil-NP明显下降;BAY11-7082抑制c-Myc和COX-2蛋白的表达(P<0.01),且呈时间浓度依赖性。结论沉默PLCε基因后可能是通过抑制p65的核转位及c-Myc、COX-2的表达抑制786-0细胞的增殖。; 杨雪欧俐苹王晓荣王胤吴小候罗春丽; 关键词：786-0细胞增殖

hepaCAM与藏花素联合应用对前列腺癌细胞增殖的影响: 2014年; 目的:研究肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)与藏花素联用对前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞DU145增殖的影响。方法:四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测细胞增殖效应;克隆形成实验检测细胞克隆形成率;实时荧光定量PCR、Western blot法检测细胞周期调节因子cyclinD1及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达变化。结果:hepaCAM过表达腺病毒与藏花素单独使用均能抑制PCa细胞DU145的增殖[48 h抑制率分别为(12.0±2.0)%,(22.0±1.0)%],但两者联用比单独应用效果更加明显[48 h抑制率为(54.0±1.0)%,P=0.000]。Real-time PCR结果显示,hepaCAM过表达腺病毒及藏花素联合作用与藏花素单独使用相比,cyclinD1 mRNA表达下调(P=0.048);两者联合应用与hepaCAM过表达腺病毒或藏花素单独使用相比,PCNA mRNA水平下调(P=0.047,P=0.006)。Western blot结果显示,与单独使用hepaCAM过表达腺病毒或藏花素相比,两者联用组cyclinD1蛋白表达明显降低(P=0.002,P=0.002),同时PCNA蛋白表达也降低(P=0.000,P=0.003)。结论:hepaCAM基因过表达腺病毒与藏花素联用对PCa DU145细胞增殖的抑制有明显的协同作用,作用机制与下调cyclinD1和PCNA的表达有关。; 王胤杨雪王晓荣吴小候陈娥罗春丽; 关键词：前列腺癌细胞增殖

显微镜下多血管炎肺受累患者的临床特征及预后分析: 2023年; 目的:探究显微镜下多血管炎(microscopic polyangiitis,MPA)肺受累的临床特征与预后因素分析。方法:回顾性分析2014年1月1日至2021年3月1日于重庆医科大学附属第一医院确诊及随访至2022年3月1日的237例MPA肺受累患者临床资料。采用Kaplan-Meier方法和Cox比例风险回归模型分析生存数据,得出累积生存率及预后因素。结果:MPA肺受累患者的平均年龄是65.18岁,中位随访时间为26.13个月。在纳入研究的237例患者中,MPA伴弥漫性肺泡出血(diffuse alveolar haemorrhage,DAH)患者98例(41.35%)。MPA肺受累患者1年、3年、5年累积生存率分别为67.50%、54.10%、43.00%。中位生存时间为45.03(0.10,97.73)个月。MPA伴DAH患者1年、3年、5年累积生存率分别为63.30%、49.40%、40.20%。Cox多因素回归分析显示年龄>65岁(HR=1.981,95%CI=1.244~3.154,P=0.004)、白细胞总数(white blood cell,WBC)>10×109个/L(HR=1.860,95%CI=1.170~2.956,P=0.009)、血清肌酐(serum creatinine,sCr)>250μmol/L(HR=1.987,95%CI=1.217~3.243,P=0.006)、氧合指数<300 mmHg(HR=2.780,95%CI=1.696~4.557,P<0.001)、诊断时第三版伯明翰血管炎活动性评分(Birmingham vasculitis activity score version 3,BVASv.3)(HR=1.040,95%CI=1.006~1.075,P=0.020)是影响患者生存时间的独立预测因素(P<0.05)。结论:MPA肺受累患者生存率低下,年龄>65岁、WBC>10×109个/L、sCr>250μmol/L、氧合指数<300 mmHg、诊断时BVASv.3是MPA肺受累预后不良的独立危险因素。; 吴彭超杨静李欣周倩任祯钰杨雪唐霜唐小葵; 关键词：显微镜下多血管炎抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎预后

ERAS在慢性硬膜下血肿钻孔引流术患者中应用的效果分析: 2023年; 针对患者在实施慢性硬膜下血肿钻孔引流术后,ERAS(加速康复外科)起到的效果进行分析。方法将2020年1月到2022年12月这段期间中,患有慢性硬膜下血肿,共计72例患者进行研究。展开研究过程中,治疗时,结合钻孔引流术。分组过程中,运用随机方式,分成两组,每组均为36例。对照组护理时,结合常规护理模式,实验组护理时,结合ERAS形式,观察两组获得的护理效果。实验组和对照组相比,住院天数明显更短。结果对照组在护理以后,获得康复有效率为72.22%,实验组在护理以后,获得康复有效率为94.44%,实验组康复有效率更高。实验组和对照组相比,获得的神经功能评分明显更低,神经功能恢复情况相对更好。对照组和实验组之间对比,实验组运动功能评分更高,神经功能恢复状态良好。结论患有慢性硬膜下血肿以后,患者行钻孔引流,运用ERAS模式展开护理工作,可以获得比较明显的效果,不仅可以提升康复有效率,也能推动患者神经功能有效恢复,以及运动功能不断提升。; 杨雪; 关键词：慢性硬膜下血肿

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