高朝宝
- 作品数：7 被引量：5H指数：2
- 供职机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项新疆生产建设兵团博士基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 棉蚜V-ATPase-A基因RNAi载体的构建及其在转基因拟南芥的基因表达被引量：2
- 2013年
- V-ATPase-A具有催化ATP水解的活性位点的功能,被确认为看家基因。通过构建蚜虫V-ATPase-A干扰载体,运用蘸花法转入拟南芥中,筛选出纯合子后进行转录水平的分析,再对取食相应转基因拟南芥的蚜虫体内V-ATPase-A基因进行表达分析。结果表明,拟南芥上能成功表达dsRNA,而取食3个line的转基因拟南芥的蚜虫体内V-ATPase-A基因表达量是取食野生型拟南芥的17%、10%、4%,基因明显受到抑制,成功的干扰了蚜虫体内V-ATPase-A基因。
- 张维高朝宝尹秀彭明崔百明
- 关键词：DSRNA棉蚜转基因
- 棉花DEELA基因干扰载体的构建及转化研究被引量：1
- 2011年
- 本研究联合了棉花DELLA蛋白基因GhGAI1和GhGAI2的部分序列构建了在棉花纤维细胞中优势表达hpRNA的表达载体。通过农杆菌介导法转化新疆主栽棉花品种新陆早33号,在其不同生长期对其不同组织部位进行大田转化,主要侵染方法有茎尖浸润法、花苞注射法和花喷洒法,以研究不同方法的转化效率。对T1代植株进行卡那霉素筛选及PCR检测,结果表明这3种侵染方法均获得了抗卡那霉素的转化植株,而只在通过花喷洒法和花苞注射法获得的抗性植株中检测到目的基因。
- 袁英歌郭传宇高朝宝高朝宝张定国崔百明
- 关键词：棉花农杆菌介导转化转基因植株
- 棉蚜Catb5基因RNAi载体的构建及其对烟草的转化被引量：3
- 2010年
- 依据细胞色素氧化酶亚基Ⅰ序列的多态性设计特异性引物,通过PCR技术扩增出的特异性条带鉴定为棉蚜。提取棉蚜总RNA,利用RT-PCR技术从棉蚜中扩增出大小为515 bp的Catb5目的基因,进一步将两段Catb5基因分别正向和反向连接到植物表达载体pBi35SG12上,构建了pBi35SC5 RNAi表达载体,并通过农杆菌介导法导入烟草中,PCR检测表明已得到转基因烟草再生苗。
- 李晓明高朝宝彭明崔百明
- 关键词：棉蚜RNAI烟草
- 利用RNAi技术抗棉蚜的研究
- RNAi作用是细胞内的双链RNA（dsRNA）在Dicer酶的作用下形成~22bp大小的小干扰RNA（siRNA），siRNA在Ago蛋白的作用下组装到RNA诱导的沉默复合物（RISC）中，从而对靶标mRNA进行切割消化...
- 高朝宝
- 关键词：RNA干扰DSRNA棉蚜
- 文献传递
- 蚜虫基因RNAi载体的构建及其在转基因烟草中dsRNA的表达分析被引量：1
- 2011年
- RNAi机制可以通过dsRNA诱导同源mRNA的降解,从而导致该基因转录后沉默。RNA干扰作用从发现以来就具有了利用转录后基因沉默(PTGS)来进行抗虫的一种潜在可能性。针对dsRNA的这种作用,研究中提取蚜虫RNA,克隆出蚜虫Cathepsin B基因的干扰片段并构建出RNAi载体,转入本氏烟草中,在转基因烟草体内表达dsRNA。成功构建RNAi载体后,通过农杆菌转化和叶盘法将RNAi载体导入烟草中并采用组织培养方法培养出转基因烟草,通过PCR鉴定显示15株生根的转基因烟草中14株显示阳性。提取转基因烟草的RNA进行RT-PCR和Northern表达分析显示转基因烟草植株中dsRNA表达的存在。实验结果说明了在转基因植物体内表达RNAi载体可以产生dsRNA,从而在蚜虫进食植物时达到利用dsRNA抗蚜虫的作用。
- 高朝宝李晓明彭明崔百明
- 关键词：转基因NORTHERN杂交DSRNA
- 植物表达载体、蚜虫基因dsRNA表达载体及其应用
- 本发明公开了一种植物表达载体、蚜虫基因dsRNA表达载体及其应用，用于构建dsRNA植物表达载体，dsRNA序列与番茄花叶病毒的起始组装序列相连，因此转录的RNA分子能够被ToMV的外壳蛋白（CP）所包装；所述的植物表达...
- 崔百明郑银英李晓明高朝宝
- 文献传递
- 植物表达载体、蚜虫基因dsRNA表达载体及其应用
- 本发明公开了一种植物表达载体、蚜虫基因dsRNA表达载体及其应用，用于构建dsRNA植物表达载体，dsRNA序列与番茄花叶病毒的起始组装序列相连，因此转录的RNA分子能够被ToMV的外壳蛋白（CP）所包装；所述的植物表达...
- 崔百明郑银英李晓明高朝宝
