孙樱林
- 作品数：8 被引量：67H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京口腔医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠重组釉蛋白基因稳定表达细胞系的建立
- 2008年
- 目的:构建小鼠重组釉蛋白基因的真核表达系统,并建立稳定表达该蛋白的细胞系。方法:取初生小鼠牙胚组织,提取RNA,用RT-PCR技术扩增釉蛋白基因片段,经双酶切后克隆至真核表达载体pcDNA3.1TM/myc-His(-)B上,转化大肠杆菌E.coli DH5α,中提质粒,将该重组表达质粒转染至HEK 293A细胞,用G418筛选出阳性克隆,并检测釉蛋白的表达水平。结果:通过测序表明,小鼠釉蛋白基因被成功地连接到了真核表达载体上。将该表达系统转染HEK 293A细胞后,进行Western Blot检测,证明其中有相对分子质量约32000的釉蛋白表达。结论:成功构建了小鼠重组釉蛋白真核表达载体,建立了稳定细胞系,为获得高纯度的釉蛋白,为进一步研究蛋白质功能奠定了基础。
- 娄雅莉孙樱林赵铁强刘国庆冯海兰
- 关键词：牙釉质蛋白质类基因表达细胞系小鼠
- 糖尿病大鼠骨髓基质细胞的体外生长特性研究
- 2013年
- 目的建立实验性1型糖尿病大鼠模型,培养不同病程糖尿病来源的骨髓基质细胞(bone marrow mensenchymal stem cells,BMSCs),观察其体外的生长特性。方法采用空腹腹腔一次性注射65mg/kg链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立1型糖尿病大鼠模型,分别在第2周(A组)、第4周(B组)取其四肢长骨BMSCs,进行体外培养和观察,细胞计数并绘制细胞生长曲线图。对照组按照体重注射柠檬酸缓冲液。结果一次性空腹腹腔注射STZ 1周后,实验组75%的大鼠随机血糖均>16.7mmol/L,出现糖尿病症状,对照组血糖正常,体重无减轻。A组BMSCs与正常组相比,克隆无明显减少,形态类似,各阶段细胞量差别不具有显著性(P>0.05);B组BMSCs与正常组相比,克隆少,胞体略大,生长缓慢,倍增时间延长,抗衰亡能力减弱。与正常组相比,A、B组贴壁功能在24h内差别均不显著(P>0.05)。细胞计数结果显示,第2d至第8d,B组BMSCs比A组和正常组BMSCs均明显减少(P<0.01)。结论 STZ能够成功复制出1型糖尿病大鼠模型。建模4周后糖尿病大鼠BMSCs的增殖能力已受影响,抗衰亡能力减弱。
- 廖庆庆曾剑玉张敏温颖孙樱林谭包生程为
- 关键词：糖尿病动物骨髓基质细胞链脲佐菌素
- 多根管桩核技术的临床应用及力学分析被引量：43
- 2007年
- 目的回顾ParaPost预成桩与铸造桩核联合应用的多根管桩核技术对磨牙残根的临床修复效果。探讨多根管桩核技术修复时,桩的数目、长度与固位的关系。方法选择4颗牙尖均缺损或仅存1颗牙尖的磨牙残根病例69例,进行ParaPost预成桩与铸造桩联合应用的桩核修复,观察临床效果。收集因牙周病拔除的离体牙5例,将铸造桩与不同数目和长度的预成桩组合,建立25个实验模型,进行拉力实验测其抗脱位力。结果临床30个月追踪成功率为95%。拉力实验表明桩的数目增加最大脱位力增加,同等长度时多桩的最大脱位力大于单桩。结论ParaPost预成桩与铸造桩联合应用的多根管桩核技术是修复磨牙残根的有效方法。
- 刘玉华孙樱林
- 关键词：铸造桩磨牙固位力
- 重组釉原蛋白的提取和纯化被引量：1
- 2010年
- 目的:通过固相化金属亲和层析的方法,获得较高纯度的具有生物活性的重组釉原蛋白。方法:将重组表达质粒pcDNA3.1TM/Am/myc-His(-)B转染至HEK293A细胞中,用G418持续筛选,培养扩增。收集细胞,加入RIPA细胞裂解液,粗提蛋白。通过镍金属螯合层析的方法,纯化目的蛋白,并进行SDS-PAGE和Westernblot检测,检测蛋白纯化程度和产率。将釉原蛋白冻干,-80℃冻存。结果:SDS-PAGE及WesternBlot检测结果表明,蛋白粗提液中有大小约50KDa的重组釉原蛋白表达,经过HisTrapHPcolumn层析,目的蛋白形成了单一条带,纯化率为91.3%。结论:本实验通过固相化金属亲和层析的方法,获得了高纯度的重组釉原蛋白,为进一步研究蛋白质功能奠定了基础。
- 孙樱林冯海兰黄薇
- 关键词：釉原蛋白真核表达蛋白质纯化
- 神经生长因子与明胶海绵复合体修复骨缺损的实验研究被引量：3
- 2011年
- 目的:观察外源性神经生长因子(NerveGrowth Factor,NGF)与明胶海绵(GelatinSponge,GS)复合体(NGF/GS)对兔胫骨洞形骨缺损愈合中的作用。方法:18只健康成年新西兰大白兔的双侧胫骨分别制备2个5×3mm2深达髓腔的骨缺损,间隔10mm。其中实验组骨缺损区植入NGF/GS复合体(含NGF10μg),对照组植入GS,空白组不做任何处理。分别于术后2周、4周和8周各处死动物6只并获取标本,行标本大体、放射学及组织学观察,并进行骨计量学分析新生骨的面积百分比。结果:术后各组均未出现免疫反应。术后2、4周,各组新生骨密度低于正常骨,实验组与对照组和空白组相比,新生骨形成较快,骨缺损区密度较高,新生骨面积百分比明显增加。新生骨面积百分比:实验组2、4周(33.728±6.377)%、(55.854±6.842)%;对照组2、4周(22.139±4.346)%、(46.047±3.998)%;空白组2、4周(19.809±3.105)%、(39.250±6.151)%。术后8周,各组骨缺损基本愈合,骨密度接近。结论:神经生长因子与明胶海绵复合体能够促进兔胫骨洞形骨缺损的愈合,从而缩短骨损伤的愈合时间。
- 黄峰鲍艳娜曾剑玉温颖谭包生孙樱林
- 关键词：神经生长因子明胶海绵骨缺损骨愈合
- 利用两个种植体或尖牙固位的上颌套筒冠可摘义齿被引量：2
- 2007年
- 套筒冠精密附着体在基牙和可摘义齿之间是刚性连接。但是还没有研究表明，在应用套筒冠固位时，种植体是否能像天然牙一样长期负重。本研究的目的，是为了评价由上颌尖牙区两个骨内种植体固位的套筒冠可摘局部义齿的效果。在对照组，用同样的方法制作由上颌尖牙固位的套筒冠可摘义齿。种植组有14位患者，对照组有8位患者。修复体的平均观察时间为25．6个月。两组间X线显示的牙槽骨高度和牙周指数均没有显著性差异。但是．5个种植体出现修复失败，对照组则没有失败病例。种植组修复成功率为48．9％，对照组为100％，两组间有显著性差异。本研究结果表明，由上颌尖牙区两个单独种植体支持的套筒冠可摘义齿，这种套筒冠的连接方式对于种植体而言牙合力太大（导致过负荷）。
- Dietmar WengErnst Jurgen Richter孙樱林冯海兰（校）
- 关键词：骨内种植体上颌尖牙固位可摘局部义齿精密附着体
- 通过真核细胞表达系统获得重组人釉原蛋白
- 2008年
- 目的构建重组人釉原蛋白基因的真核表达系统,并建立稳定表达该蛋白的细胞系。方法取26周龄引产胎儿的牙胚组织,提取总RNA,用RT-PCR技术扩增釉原蛋白基因片段,插入中间表达载体pGEM!-T。经双酶切后,再与真核表达载体pcDNA3.1TM/myc-His(-)B相连接,构成最终的表达质粒,将该重组表达质粒转染至HEK293A细胞,用G418筛选出阳性细胞克隆,并建立稳定表达釉原蛋白的细胞系。结果通过测序表明,人釉原蛋白基因被成功地连接到了真核表达载体上。将该表达系统转染HEK293A细胞后,进行Western Blot检测,证明有相对分子质量约32000的釉原蛋白表达。结论本实验成功构建了重组人釉原蛋白真核表达系统,建立了稳定细胞系,为获得高纯度的釉蛋白,进一步研究蛋白质功能奠定了基础。
- 孙樱林黄薇刘国庆冯海兰
- 关键词：人釉原蛋白真核表达稳定细胞系
- 镍铬合金固定修复体对MRI影像的影响被引量：18
- 2007年
- 目的 研究镍铬合金固定修复体对MRI影像的影响。方法 用镍铬合金制作冠修复体，分为A组～F组6组。分别戴于志愿者口内。用SIEMENS NOVUS 1．5T磁共振仪，标准SE序列T1加权像对每组修复体进行轴位和矢状住扫描。用GRE序列和EPI序列对F组进行重复扫描。用eFilm分析软件对各组实验的MRI图像作分析。结果 随着镍铬合金修复体体积增加，MRI影像上的伪影面积扩大，产生伪影的层数增多，范围主要在面下1／3。结论 以镍铬合金为材料制作的冠、桥，对MRI影像有一定的影响，伪影范围局限在面下1／3。
- 孙樱林刘玉华
- 关键词：磁共振成像伪影金属
