钱婷婷
- 作品数:2 被引量:12H指数:2
- 供职机构:江南大学食品学院更多>>
- 发文基金:食品科学与技术国家重点实验室目标导向资助项目无锡市科技计划项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 密苏里游动放线菌葡萄糖异构酶基因xylA的克隆及其表达条件的优化被引量:6
- 2010年
- 为克隆、表达密苏里游动放线菌葡萄糖异构酶(GI)基因xylA,并对其诱导表达条件进行初步优化。采用Slowdown PCR方法克隆得到密苏里游动放线菌(Actinoplanes missouriensis)CICIM B0118(A)的葡萄糖异构酶基因xylA,构建pET-28a(+)-xylA表达载体,并转化至E.coliBL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对其表达产物进行SDS-PAGE电泳。结果表明,融合蛋白分子质量约为45kD。在诱导时间9h、0.6mmol/LIPTG、30℃和OD600nm值为0.8的最适培养条件下,酶比活力最高达到62.42U/mL。
- 王贺杨瑞金华霄钱婷婷张文斌蒋孝燕
- 关键词:葡萄糖异构酶SLOWDOWNPCR
- 改性磁性壳聚糖微球固定化乳糖酶被引量:6
- 2011年
- 通过反相悬浮聚合法,以甲基丙烯酸2-羟乙酯(HE-MA)与甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体,过硫酸铵为引发剂制备得到改性磁性壳聚糖微球。进一步以改性磁性壳聚糖微球为载体,通过吸附、共价结合以及戊二醛交联反应三方协同作用固定乳糖酶。对影响固定化的各种因素进行优化,确定固定化乳糖酶最适条件为:载体在0.1 mol/L、pH 7.0的磷酸缓冲液中充分溶胀后,按2.0 U/mg载体的添加量加入乳糖酶,4℃吸附3 h,再添加0.1%戊二醛交联4 h;最终所得的固定化乳糖酶活为685 U/g载体,酶活回收率为34.3%。固定化后的乳糖酶的pH稳定性和热稳定性都较游离酶有明显提高;连续操作10次后,固定化酶活仍保持在70%以上,具有良好的操作稳定性。
- 钱婷婷杨瑞金华霄赵伟张文斌金征宇
- 关键词:接枝改性固定化乳糖酶