郭涛
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
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- CD34^+细胞联合许旺细胞移植脊髓全横断大鼠:移植细胞的存活分化及后肢运动和痛温觉反应
- 2009年
- 背景:CD34+细胞和许旺细胞在单独移植情况下均有促进脊髓修复的功能,且各自分泌和表达成纤维细胞生长因子受体及配体。目的:探讨CD34+细胞与许旺细胞联合移植对脊髓全横断损伤大鼠的后肢运动及感觉功能恢复的影响,并观察体内移植后细胞的存活、迁移、分化及表型变化。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-07/2008-09在昆明医学院神经科学研究所完成。材料:SPF级健康雌性SD大鼠60只,随机分为模型对照组、免疫对照组、CD34+细胞组、许旺细胞组、细胞联合组,12只/组。SPF级6～8周龄ICR小鼠2只,用于分离培养骨髓CD34+细胞。SPF级一两天龄ICR新生鼠30只,用于分离培养许旺细胞。方法:各组大鼠均建立脊髓全横断损伤模型。造模后2周,CD34+细胞组、许旺细胞组将体外培养并荧光标记好的对应细胞悬液经多点注射入横断瘢痕及瘢痕上下各一个脊髓节段,共6个注射位点,每点注射5μL,每只大鼠共移植60万个细胞量;细胞联合组移植方法相同,但CD34+细胞、许旺细胞注射量各60万个。移植后除模型对照组外,余4组均使用免疫抑制剂环孢素腹腔给药。主要观察指标:通过BBB评分判定大鼠后肢运动功能的恢复情况,测定热痛阈值和机械痛阈值的变化,形态学及组织学鉴定移植细胞的存活、迁移、分化、表型变化。结果:移植后12周内CD34+细胞组BBB评分最高(P<0.05),至移植后24周时细胞联合组BBB评分最高,恢复效果最佳,许旺细胞组次之,CD34+细胞组最差(P<0.05)。与CD34+细胞组比较,移植后12周细胞联合组热痛阈值明显降低(P<0.05),随移植时间延长,各组机械痛阈值均明显降低(P<0.05),但热痛阈值没有发现类似规律。CD34+细胞在有许旺细胞参加的情况下存活数量较多,在移植后12周尤为明显。移植后4周荧光细胞集中在针道附近,第12周荧光细胞迁移到瘢痕上下一两个节段,且较集中分�
- 郭涛何明生王廷华庞江霞郝春光余伟
- 关键词：CD34+细胞许旺细胞
- 不同培养基和不同体积分数小牛血清对许旺细胞生长状态的影响被引量：2
- 2009年
- 背景:许旺细胞目前正越来越多地被运用于神经修复、构建载体细胞等,但如何高效快速地培养获取大量许旺细胞尤为关键。传统方法存在细胞培养周期长、污染率高、生长状况不稳定等不足。目的:观察比较不同培养基和培养基中不同体积分数血清对许旺细胞的生长、增殖能力的影响。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2008-01/07在昆明医学院神经科学研究所完成。材料:SPF级新生一两天龄ICR小鼠30只,由昆明医学院动物科提供。DMEM/F12培养液、RPMI1640培养液、L-DMEM培养液为Gibco公司产品,小牛血清为Hyclone公司产品。方法:取ICR新生小鼠,无菌条件下取出坐骨神经,组织块消化法体外分离培养许旺细胞,设立4组:DMEM/F12培养液组、RPMI1640培养液组、L-DMEM培养液组、生理盐水组。每组又分为4个亚组:不含血清、含体积分数为10%,15%,20%小牛血清。各组细胞接种后进行传代培养,使用差速贴壁和阿糖胞苷处理的综合法对许旺细胞进行纯化。主要观察指标:传代培养后1,3,5,7,9,11,13d,相差显微镜下观察细胞形态及生长情况,免疫细胞化学染色检测细胞纯度,MTT法绘制细胞生长曲线。结果:①不含血清时,各组许旺细胞生长状态均较差;添加血清后各组许旺细胞消化传代后6h即大量贴壁,48h后出现聚合增殖现象。②含血清的DMEM/F12培养液组、RPMI1640培养液组、L-DMEM培养液组许旺细胞能较好地生长,纯度均达到90%以上,且DMEM/F12培养液组在细胞纯度、细胞总数方面均略优于RPMI1640培养液组及L-DMEM培养液组;生理盐水组许旺细胞生长欠佳,纯度也不甚理想。③与生理盐水组比较,DMEM/F12、RPMI1640及L-DMEM培养液组MTT吸光度值均显著升高(F=92.814,P<0.05),但此3种基础培养基之间比较无明显差异(F=0.909,P>0.05)。培养1,3,5,7,9,11,13d,DMEM/F12、RPMI1640及L-DMEM培养液组在含不同体积分数小牛血清的条件�
- 郭涛何明生王廷华庞江霞
- 关键词：许旺细胞培养基血清细胞培养技术
- 半横断模型与脊髓损伤修复被引量：2
- 2008年
- 随着交通和建筑事故的增多,脊髓半切伤综合征的病人也越来越多见,以往大多数学者都集中于挤压伤或打击伤模型,但由于这些模型与临床上的半切伤受力及损伤机制明显不同。所以建立和研究半切模型中脊髓损伤的变化机制,对于临床有很重大的现实意义。本文对半横断模型与脊髓损伤修复之间关系的研究进展进行综述。
- 郭涛何明生王廷华
- 关键词：脊髓损伤
- PFC方案和FOLFOX4方案治疗晚期胃癌的疗效及外周血淋巴细胞表型变化对比的临床研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨紫杉醇(paclitaxel)联合顺铂(CDDP)及氟尿嘧啶(5-Fu)的治疗方案(简称PFC方案)和奥沙利铂(L-OHP)联合5-Fu和亚叶酸钙(LV)的治疗方案(简称FOLFOX4方案)对晚期胃癌的疗效、不良反应及外周血淋巴细胞表型的变化。方法入组56例经病理学或细胞学确诊的晚期胃癌患者,PFC方案化疗30例,FOLFOX4方案化疗26例,均于2个疗程后评价疗效,于1个月后确认、对比其疗效和不良反应,并应用流式细胞仪检测CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD19^+细胞的百分率。结果 PFC方案组和FOLFOX4方案的总有效率分别为56.7%和42.3%,两组比较有明显差异(P<0.05),两组晚期胃癌患者经PFC方案和FOLFOX4方案化疗后CD4^+、CD4^+/CD^8+较化疗前升高(P<0.05),CD3^+、CD8^+、CD19^+细胞没有明显变化(P>0.05)。结论 PFC方案在治疗晚期胃癌上比FOLFOX4.方案疗效更好,外周血淋巴细胞表型的检测对于晚期胃癌的治疗效果监测有积极意义。
- 郭涛金良昆余伟曾文
- 关键词：胃癌化疗淋巴细胞表型
