季鑫
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人结肠癌细胞中TGF-β1基因-509 C>T单核苷酸多态性对启动转录活性的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨在人结肠癌细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)基因上游启动子-509 C>T位点多态性对其转录活性的影响。方法以特定-509 C>T基因型患者DNA为模板,用聚合酶链反应(PCR)扩增得到1对长度为2.14 kb(-1 328^+812)含有-509 C>T变异的TGF-β1上游基因片段,并将其与不含启动子的pCAT3-enhancer报告基因载体重组,构建重组体phTGF 2.14C和phTGF 2.14T。用脂质体转染法将2种重组体分别转染至人结肠癌细胞(SW480和LoVo细胞)中,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定转染细胞的报告基因CAT活性。结果在SW480和LoVo细胞中,转染重组体phTGF 2.14C细胞的CAT活性均明显高于转染重组体phTGF2.14T细胞的CAT活性(P<0.05)。结论 -509位点C等位基因可明显增强TGF-β1基因上游调控序列的转录活性。
- 顾星季鑫王爱华高春芳
- 关键词：单核苷酸多态性转化生长因子Β1启动子转录活性结肠癌
- 含TGF β1基因codon10(Leu>Pro)变异真核表达重组体的构建和功能研究
- 季鑫顾星房萌赵云鹏高春芳
- TGFβ_1基因codon10(Leu>Pro)变异对肝脏细胞功能的影响
- 2010年
- 目的观察TGFβ1基因codon10(Leu>Pro)的单核苷酸多态性(SNP)对肝脏细胞功能的影响。方法构建含codon10(Leu>Pro)的TGFβ1(LAP+成熟态单体)真核表达重组体CMV-Leu、CMV-Pro。在HepG2、LX-2细胞中转染pcD-NA3.1空载体、CMV-Leu、CMV-Pro,培养24h后,ELISA检测细胞培养上清液中TGFβ1的分泌量。MTT实验观察HepG2细胞转染后的增殖情况,流式细胞术检测LX-2细胞转染后CD83的表达。结果转染CMV-Leu和CMV-Pro能增加HepG2、LX-2细胞的TGFβ1分泌量,且转染CMV-Pro的细胞TGFβ1分泌量比转染CMV-Leu的细胞高(P<0.05)。转染CMV-Pro能明显增高HepG2细胞的增殖活性(P<0.01),而转染CMV-Leu能明显增加LX-2细胞CD83的表达率(P<0.01)。结论TGFβ1基因codon10(Leu>Pro)的SNP对肝脏细胞TGFβ1的分泌、细胞增殖活性及CD83的表达具有明显影响。
- 季鑫赵美芸顾星房萌赵云鹏高春芳
- 关键词：转化生长因子Β1重组体CD83
