田大鹏
- 作品数：1 被引量：11H指数：1
- 供职机构：石河子大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：兵团博士基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 棉花GhDHAR2基因克隆、功能序列分析及原核表达被引量：11
- 2012年
- 通过RT-PCR方法从棉花纤维组织中克隆得到脱氢抗坏血酸还原酶基因GhDHAR2的cDNA,该基因开放阅读框为639 bp,编码212个氨基酸的蛋白质。同源性序列对比分析显示,GhDHAR2蛋白具有较高的保守性,具有典型的功能结构域,包括GST-N家族和GST-C-DHAR家族的功能结构域;进化树分析显示GhDHAR2和拟南芥AtDHAR2在进化关系上较近。将GhDHAR2基因连接到原核表达载体pET-28a中,将重组载体pET28a-GhDHAR2转入到表达菌株BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达出重组GhDHAR2蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳分析显示重组蛋白大小约为28 kD,诱导表达的重组蛋白具有较高的DHAR活性。首次克隆了棉花GhDHAR2基因,通过结构域分析其可能的作用,并成功进行蛋白体外表达及酶活性分析。
- 田大鹏葛娟石峰李鸿彬
- 关键词：棉花原核表达
