王妍
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：四川省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牦牛病毒性腹泻病毒E2基因的克隆鉴定及原核表达被引量：1
- 2011年
- 运用聚合酶链式反应,以牦牛BVDV基因组DNA为模板扩增出牦牛BVDVE2基因。为研究E2蛋白的抗原性,将E2基因插入到pET-32a原核表达载体,构建重组表达质粒pET-32a-E2,并转化至BL21(DE3)宿主菌中,利用IPTG诱导表达。经SDS-PAGE检测,pET-32a-E2在宿主菌BL21(DE3)中表达出约58kD的融合蛋白,结果表明E2基因在BL21(DE3)宿主菌获得了高效表达,表达蛋白大小与预期相符。Western-blotting结果显示E2蛋白具有良好抗原性。这对以后研究E2蛋白功能等具有十分重要的意义。
- 孙凯刘亚刚王妍王盼盼胡炳峰王文伯
- 关键词：牦牛E2基因牛病毒性腹泻病毒原核表达
- 牦牛病毒性黏膜病病毒结构蛋白核苷酸的序列测定与分析
- 2012年
- 对首次从牦牛体内分离出的BVDV进行结构蛋白的研究与分析具有重要的理论价值和学术意义,本研究参考GenBank中发表的BVDV毒株的基因组序列设计四对对引物,利用PCR扩增出预期的2700bp目的片段.扩增产物克隆至pMD19-T Vector,经质粒PCR鉴定及酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序.测序结果经DNNMAN同源性比较分析,克隆得到的结构蛋白基因与NADL株同源性最高,但核苷酸同源性仅为70.1%,推导氨基酸同源性仅为74.4%,证明牦牛株BVDV结构蛋白基因存在较大的变异.生物信息学分析表明结构序列中有片段高度疏水,蛋白基因推导氨基酸序列亲水性与抗原性成平行相关,亲水性和抗原性与标准毒株很相似.
- 刘亚刚孙凯王妍王盼盼王荣胡炳峰王文伯
- 关键词：克隆测序生物信息学分析
