涂值光
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：天津市科技型中小企业技术创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用FFIITTC系统建立非均衡竞争游离甲状腺素化学发光法被引量：1
- 2012年
- 【目的】制备抗人甲状腺素多克隆抗体并应用异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）系统建立非均衡竞争FT4化学发光法。【方法】以T4-牛血清白蛋白（bovin serum albumin,BSA）为抗原免疫新西兰兔,制备抗人T4多克隆抗体,亲和层析法吸附掉与3-碘-L-甲状腺原氨酸（3-iodo-L-tyrosine）、3,5-二碘-L-甲状腺原氨酸（3,5-diiodo-L-tyrosine）、D-三碘甲状腺原氨酸（D-T3）、L-三碘甲状腺原氨酸（L-T3）、反三碘甲状腺原氨酸（rT3）有交叉反应多抗,纯化特异性的抗人T4多克隆抗体并用FITC标记T4类似物,用抗FITC抗体包被微孔板。反应时,将FT4校准品或样品、FITC-T4类似物、T4抗体-HRP依次加入包被有抗FITC抗体的化学发光板中,FITC-T4类似物与FT4校准品或样品,非均衡竞争结合T4抗体-HRP,从而在微孔板上形成免疫反应复合物T4类似物-T4抗体-HRP,通过酶促化学发光反应,就可以显示出与样品FT4浓度负相关的相对光单位（relative light unit,RLU）,建立FT4化学发光检测方法。【结果】抗体经酶联免疫吸附实验证明对T4具有高度特异性,与3-iodo-L-tyrosine、3,5-diiodo-L-tyrosine、L-T3、D-T3、rT3无交叉反应。该方法建立的试剂盒标准曲线的线性相关系数不小于0.9900;分析灵敏度为0.9 pmol/L;线性检测范围0.9~130 pmol/L;精密度测试批内变异系数CV〈10%;与进口发光免疫分析系统做线性相关比较,线性回归系数为1.0852,相关系数为0.9673,临床符合率良好;本方法建立的试剂盒经加速稳定性试验37℃放置7 d与2~8℃放置7 d无异。【结论】综上所述,应用FITC系统建立的非均衡竞争FT4化学发光免疫分析灵敏度高、特异性好适于临床诊断应用。
- 刘萍孔海霞张影田云霞宋启超涂值光
- 关键词：非均衡竞争游离甲状腺素多克隆抗体化学发光法
- 甘氨脱氧胆酸对肝细胞膜流动性及脂质过氧化的作用研究被引量：2
- 1999年
- 目的 研究甘氨脱氧胆酸(GDCA)对肝细胞脂质过氧化及细胞膜流动性的影响,探讨GDCA 肝损伤机理。方法 以 GDCA 为处理因素,体外培养肝细胞。结果 终浓度为250μmol/L 时,GDCA 组培养1～4小时,肝细胞 MDA 含量显著增加(P<0.001),细胞膜流动性显著降低(P<0.02)。随着丙二醛(MDA)的增加和细胞膜流动性的降低,肝细胞释放 ALT 增加,r 分别是0.945和0.986。结论 GDCA 能引起肝细胞 MDA 增加和膜流动性降低,从而导致肝细胞损伤,从新的角度解释了 GDCA 的肝损伤机理。
- 黄文方康格非涂值光陈宏础杨明清唐中陈光荣徐勇张亚松
- 关键词：甘氨脱氧胆酸膜流动性脂质过氧化作用肝细胞
