汪凌波
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子细胞生物学重点实验室更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 细胞接种密度对小鼠iPS细胞诱导效率的影响
- 2010年
- 为研究小鼠胚胎成纤维细胞的接种密度对iPS(induced pluripotent stem,iPS)细胞诱导效率的影响,采用逆转录病毒载体法将Oct4,Sox2,Klf4,c-Myc4个基因或者Oct4,Sox2,Klf43个基因转入到携带有Oct4-EGFP转基因的小鼠胚胎成纤维细胞(Oct4-EGFP mouse embryonic fibroblasts,Oct4-EGFPMEF)中。感染病毒后的第4天将Oct4-EGFPMEF以500～128000个/孔(每孔面积9.6cm2)进行梯度铺盘,并分别于病毒感染后的第12天和第16天对4因子组和3因子组进行碱性磷酸酶染色和Oct4-EGFP阳性细胞比例检测。结果表明,Oct4-EGFPMEF感染病毒后的接种密度对于iPS细胞诱导效率存在较大的影响。4因子和3因子诱导产生iPS细胞的最佳接种密度分别为8000个/孔和32000个/孔。此外,通过逆转录病毒法,在最佳的接种密度下,可顺利地建立起iPS细胞系。
- 汪凌波蒋婧吕纹简张璇李劲松
- 关键词：体细胞重编程胚胎干细胞逆转录病毒诱导多能干细胞
