目的探讨维生素C(VC)和氮-乙酰半胱氨酸(NAC)对悬浮红细胞保存过程中氧化应激损伤的抑制作用,二者介入悬浮红细胞的量效关系。方法取新鲜悬浮红细胞(采集制备至实验开始3 d)8袋(2 U/袋),使每袋均分为9份(40 m L/份),用无菌方式转移至50 m L塑料血袋,设VC(实验组):取4份分别加入0.1、1、10和100mmol/L的VC溶液各约4.44 m L,使其终浓度为0.01、0.1、1和10 mmol/L;NAC(实验组):取4份分别加入0.1、1、10和100 mmol/L的NAC溶液各约4.44 m L,使其终浓度为0.01、0.1、1和10 mmol/L;对照组:剩余1份加入等体积的等渗PBS。3组红细胞置于(4±2)℃保存,分别于保存7、14、21、28及35 d取样(6 m L/次)测定红细胞变形性、渗透脆性(g/L)、ATP、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。结果 RBC保存初期,与对照组相比,1和10 mmol/L VC实验组对200-1、1 000-1剪切率EI、渗透脆性(g/L)、胞内ATP(μmol/g Hb)、GSH-Px(U/L)这4个指标均有改善:0.290±0.022 vs 0.297±0.018 vs 0.282±0.026、0.527±0.029 vs 0.538±0.023vs 0.520±0.043、4.892±0.128 vs 4.908±0.741 vs 5.000±0.068、4.82±0.49 vs4.74±0.52 vs 4.45±0.57、89.24±5.76vs 90.01±2.20 vs 75.51±16.03(P<0.05);1和10 mmol/L NAC实验组在200-1、1 000-1剪切率EI值、渗透脆性、胞内ATP(μmol/g Hb)、GSH-Px(U/L)分别为:0.284±0.023 vs 0.298±0.012 vs 0.282±0.026、0.540±0.024 vs 0.550±0.027 vs 0.520±0.043、0.511±0.56vs 5.000±0.068 vs 4.45±0.57、90.59±9.9 vs 99.06±27.8 vs75.51±16.03,其他浓度实验组红细胞没有明显的改变或规律性;保存末期,与对照组相比,1 mmol/L VC和NAC实验组对渗透脆性(g/L)及GSH-Px(U/L)这2个指标有改善:0.260±0.017vs 0.257±0.027vs 0.241±0.024、0.507±0.019 vs 0.491±0.027 vs 0.485±0.036、87.89±10.83 vs 86.12±8.71 vs 77.75±8.17(P<0.05)。结论适宜浓度的VC和NAC能够抑制悬浮红细胞保存过程中的氧化应激损伤,改善悬浮红细胞的保存质量。
目的建立大鼠重度失血性休克模型和大鼠失血性休克-肠系膜微循环模型,用以探讨携氧代血浆的扩容和携氧功能。方法将20只SD大鼠失血至全身血容量的60%,造成重度失血性休克大鼠模型后,随机均分为6%羟乙基淀粉(HES)组和携氧代血浆组做相应样品的等容量输注复苏。分别在造模前、休克、输液末以及输液后1 h观测大鼠平均动脉压(MAP)、股动脉取血测定血气,检测组织氧分压(PtO_2)。另取20只大鼠建立失血性休克-肠系膜微循环模型,观察、记录大鼠造模前基础值、休克、输液末以及输液后1 h微血管直径的变化和血流状态。结果 HES组与携氧代血浆组比较,输液末微静脉直径(μm)与微动脉直径(μm)分别为:31.23±4.96 vs 31.86±5.43、19.46±1.47 vs19.40±2.10(P>0.05),输液后血流状态均得到恢复;输液后1 h的MAP(mm Hg)为:90.70±3.83 vs 98.90±9.18(P<0.05);组织氧分压(mm Hg)为:输液末7.03±1.47 vs 15.32±2.34(P<0.05),输液后1 h 5.53±2.39 vs 8.90±2.01(P<0.05);2组大鼠血气指标在各时间点相近(P>0.05)。结论携氧代血浆能够改善大鼠失血性休克所致的微循环障碍,具有与HES相似的血管扩容作用,并且在大鼠休克复苏初期恢复组织氧分压的效果优于HES。
目的考察浓缩血小板混合后在一次性滤除白细胞血小板贮存袋保存过程中的质量变化。方法采用富血小板血浆法(PRP法)从400 mL新鲜全血制备浓缩血小板,将10-12 U(1 U约30 mL)ABO血型同型的浓缩血小板混合并滤除白细胞后,注入一次性滤除白细胞血小板贮存袋振荡保存,共完成10例(袋);分别于滤除白细胞前、后以及保存d1、d3、d5、d7观察涡流现象,检测pH值、血细胞计数、血小板聚集、血小板低渗休克(HSR)、血小板形变能力(ESC),CD62p阳性表达率、血小板ATP含量、葡萄糖和乳酸含量等指标。结果 1个成人治疗剂量的混合浓缩血小板滤除白细胞后血小板回收率(86.7±1.6)%,HSR(3.87±12.75)%,剩余白细胞数(0.15±0.15)×106个,滤除白血病前、后血小板pH值、HSR(%)和CD62p阳性率(%)分别为7.00±0.17 vs 7.06±0.16、66.96±12.35 vs 63.22±8.26、28.94±14.25 vs 31.60±16.77,花生四烯酸诱导时的聚集率(%)106.2±23.5 vs 106.5±20.1,ADP+肾上腺素诱导时的聚集率(%)104.8±19.0 vs 106.5±18.6(P>0.05)。随着保存时间的延长,混合浓缩血小板的各项指标绝对值发生变化:保存d1及d5(有效保存期末)的pH值、HSR(%)、CD62p(%)及ESC(%)分别为7.27±0.12 vs 7.13±0.21、62.28±6.93 vs 65.53±8.23、30.27±9.06 vs 34.45±14.23、14.28±2.01 vs 8.55±4.12,花生四烯酸诱导时的聚集率(%)92.2±6.1 vs 86.3±23.1,ADP+肾上腺素诱导时的聚集率(%)为93.2±6.7 vs 44.5±41.6。ATP(μmol/1011个血小板)、乳酸(mmol/L)、葡萄糖(mmol/L)分别为5.40±1.66 vs 4.97±1.01、8.35±2.94 vs 13.87±2.97、24.55±1.53vs 20.75±2.04。结论浓缩血小板经混合、滤除白细胞后放入一次性滤除白细胞血小板贮存袋中保存,保存过程中其质量符合国家标准,可以作为临床单采血小板的补充。
目的探讨应用羟乙基淀粉(HES)溶液中添加多聚人胎盘血红蛋白(Poly Hb)对重度失血性休克大鼠模型肠缺血再灌注的影响。方法将32只SD大鼠失血至全身血容量(大鼠体重的6.5%)的60%,分别将大鼠股动静脉插管后,从股动脉端开始放血直至放血量达到大鼠全身血容量的60%,然后随机均分为4组(8只/组),包括3个人工胶体液组,即HES组:6%HES130/0.4氯化钠注射液;红细胞+HES(RBC+HES)组:将大鼠自身血液反复离心洗涤3次,留取红细胞,加入到HES溶液中,使Hb浓度达到20 g/L;Poly Hb+HES组:将Poly PHb加入到HES溶液中,使Hb浓度为20 g/L;1个假手术组:只做常规手术,不放血不复苏。将大鼠行等容量液体复苏,分别在各组大鼠休克前、后,输液末、输液后1 h、2 h观测大鼠平均动脉压(MAP)、乳酸(Lac)、氧分压(Pa O2)、二氧化碳分压(Pa CO2),并在复苏2 h取各组大鼠肠组织制备成10%组织匀浆,测定丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量。结果 HES、RBC+HES和Poly Hb+HES 3组大鼠输液后MAP(mm Hg)分别为88.00±9.90 vs 100.57±7.69vs 112.16±17.05(P"0.05);输液后2 h,乳酸(mmol/L)分别为3.71±0.91 vs 2.30±0.97 vs 2.50±0.65(P"0.05),Pa O2(mm Hg)分别为126.5±10.40 vs 111.16±9.64 vs 111.00±13.98(P"0.05),Pa CO2(mm Hg)分别为30.00±3.16 vs 42.66±5.31 vs 34.66±1.50(P"0.05);输液后2 h,RBC+HES、HES组MDA、MPO活性,分别为:0.47±0.34 vs 0.99±0.81,0.23±0.29 vs 0.57±0.32(P"0.05);Poly Hb+HES与HES组MPO活性、TNF-α分别为0.32±0.19 vs 0.57±0.32,89.42±21.03 vs 208.45±62.80(P"0.05)。结论 HES溶液添加多Poly Hb可以改善失血性休克大鼠组织氧供和酸中毒现象,减轻肠组织缺血再灌注损伤。
