张明琦
- 作品数：2 被引量：30H指数：2
- 供职机构：沈阳农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学更多>>
- 铁蟹过敏原的分离、鉴定和快速纯化被引量：7
- 2009年
- 应用免疫印迹(Western blot)的方法鉴定铁蟹过敏原组分,然后利用电泳洗脱的方法快速纯化主要过敏原。取磷酸盐缓冲液制备的铁蟹肉浸出液,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,测定各组分的相对分子量,然后利用18例蟹过敏患者的血清进行免疫印迹,鉴定出主要和次要过敏原,利用普通垂直电泳槽快速洗脱主要过敏原蛋白,并鉴定活性。结果显示,SDS-PAGE显示铁蟹肉可辨条带有16条,相对分子质量在16.5～168kD之间。Western blotting结果表明,铁蟹肉浸出液共有10条过敏条带,其中相对分子质量为76kD的蛋白条带,阳性反应率为100%,纯化后获取了76kD的主要过敏原,经过免疫印迹鉴定其具有免疫活性。表明相对分子质量76kD的组分为铁蟹主要过敏组分,快速电洗脱可以纯化相对分子量为76kD的过敏原组分。
- 张明琦支玉香吕淑霞李淑荣董晓颖潘家荣高美须
- 关键词：免疫印迹蛋白质纯化
- 辐照对蟹过敏蛋白生化性质和抗原性的影响被引量：25
- 2009年
- 【目的】研究辐照对蟹过敏蛋白生化性质和抗原性的影响。【方法】选择3、5、7、9kGyγ射线对蟹过敏蛋白进行辐照处理,利用紫外分光光度计测定辐照后蟹过敏蛋白溶液浓度和浊度变化;荧光光度计测定辐照后蟹过敏蛋白溶液疏水性变化;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定辐照后过敏蛋白分子量的变化;Western blot印迹和间接竞争ELISA法测定辐照后过敏蛋白抗原性变化。【结果】辐照使过敏蛋白溶液的浓度下降,浊度增加,疏水性提高,过敏蛋白条带消失,硝酸纤维素膜上无过敏条带产生,且随着辐照剂量的增加,辐照后过敏蛋白与抗体结合能力减弱。【结论】辐照使过敏蛋白的空间结构发生变化,抗原决定簇被掩盖或破坏,证明辐照技术可以有效降低蟹过敏蛋白的致敏性。
- 张明琦高美须支玉香潘家荣李淑荣吕淑霞
- 关键词：辐照生化性质抗原性
