刘建杰
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 供职机构：浙江林学院林业与生物技术学院浙江省现代森林培育技术重点实验室更多>>
- 发文基金：浙江省重中之重学科开放基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 香榧ISSR-PCR扩增条件的优化和引物筛选被引量：5
- 2010年
- 以香榧Torreya grandis‘Merrillii’基因组DNA为材料,对影响简单序列重复区间扩增-聚合酶链式反应(ISSR-PCR)的Taq酶用量、Mg2+浓度、模板DNA用量、磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs)浓度和引物浓度等进行了优化试验。优化后的香榧ISSR-PCR扩增体系为:总容积20μL,包括30 ng模板DNA,16.67 nkat Taq酶,0.350μmol.L-1引物,1.625 mmol.L-1 Mg2+,0.250 mmol.L-1 dNTPs,10×PCR buffer 2μL。PCR扩增程序:94℃变性5.0 min;35个循环:94℃变性30 s,退火45 s,退火温度视引物而定,72℃延伸1.5 min;最后72℃延伸7.0 min,4℃保温。在此基础上,从77个ISSR引物中筛选出34个适合香榧ISSR分析的引物,且通过梯度PCR确定了各自最适的退火温度。研究结果为香榧遗传图谱构建打下了基础。
- 叶生月陈钢张慧刘建杰曾燕如吴慧敏
- 关键词：经济林学香榧引物筛选
