陈新瑶 作品数:4 被引量:38 H指数:3 供职机构: 福建农林大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 化学工程 更多>>
猴头菇多糖对氧化应激状态下猪小肠上皮细胞紧密连接相关基因表达的影响 被引量:14 2017年 为考察猴头菇多糖(HEP)对氧化应激状态下猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)的增殖和紧密连接(TJ)相关基因表达的影响,通过100 g/m L脂多糖(LPS)处理建立IPEC-J2细胞氧化应激模型,在预试验基础上选用125、250、500 g/m L不同质量浓度的HEP处理细胞2、4、8 h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测其对正常及氧化应激的IPEC-J2细胞增殖的影响;选取其中最佳的HEP浓度,依上述方法处理细胞,实时荧光定量PCR法检测TJ相关的Occludin、Claudin及ZO-1基因m RNA表达的变化情况。结果显示,不同的HEP浓度和作用时间对正常细胞增殖均有显著影响(P<0.05),对LPS诱导的细胞氧化应激均有缓解作用(P<0.05);HEP的最佳质量浓度为250 g/m L、最佳作用时间为4 h;250 g/m L的HEP作用4、8 h均能显著提高氧化应激状态下,IPEC-J2细胞Occludin、Claudin和ZO-1基因的m RNA表达量(P<0.05)。结果表明,HEP能够促进氧化应激状态下IPEC-J2细胞TJ相关基因的表达,缓解LPS诱导的氧化应激对IPEC-J2屏障功能的损伤。 陈景杰 陈新瑶 董星 秦韬 李健 黄一帆关键词:氧化应激 响应曲面法优化猴头菇粗多糖的提取工艺 被引量:19 2017年 应用Box-Behnken设计-响应面法优化猴头菇粗多糖的提取工艺。以提取时间、液料比、温度为影响粗多糖提取率的主要考察因素,通过Box-Behnken试验设计,以猴头菇粗多糖提取率为响应值,应用Designexpert 7.0软件对结果进行二次多项式模型拟合,绘制等高线图和响应面图,比较各因素交互作用对提取率影响的强弱,得出最优工艺,并对其进行验证。结果显示最佳工艺条件为:提取时间3.8 h,液料比25 m L/g,提取温度81℃。验证实验显示猴头菇粗多糖提取率为3.09%,实测值与预测值接近。研究结果说明响应曲面法建立的模型预测性良好,能合理地优化猴头菇中粗多糖的提取工艺。 陈新瑶 董星 陈景杰 秦韬 李健 黄一帆关键词:响应曲面法 猴头菇多糖对氧化应激状态下IPEC-J2细胞通透性的影响 随着我国养殖行业的快速发展,大规模、高密度的集约化养殖模式以及疫病流行、抗生素滥用等多种外界有害因素的刺激,导致氧化应激问题在家畜养殖过程中普遍存在,而氧化应激则是众多疾病发生和发展的重要诱导或促进因素。对于养殖行业而言... 陈新瑶关键词:氧化应激 紧密连接蛋白 细胞通透性 文献传递 猴头菇多糖对氧化应激的IPEC-J2细胞抗氧化能力及紧密连接蛋白ZO-1的影响 被引量:5 2017年 旨在探究在H_2O_2诱导的氧化应激损伤状态下,猴头菇多糖(HEPs)对IPEC-J2细胞的保护作用。将IPEC-J2细胞分为5组:空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组。采用MTT法分别选取试验用的H_2O_2和HEPs的最佳剂量;利用DCFH-DA染色观察并测定细胞内活性氧簇(ROS)的含量;通过比色法检测培养细胞上清液中丙二醛(MDA)的含量,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力以及乳酸脱氢酶(LDH)的释放率;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测紧密连接蛋白ZO-1基因的转录水平。结果显示,(1)构建IPEC-J2细胞氧化应激模型的H_2O_2浓度为0.4mmol·L-1。(2)H_2O_2能够极显著地增加细胞内的ROS含量,诱导细胞凋亡,同时极显著地降低了SOD和CAT的活力,极显著地升高MDA含量与LDH释放率。但是,与模型组相比,经过HEPs预处理后,细胞内ROS的含量极显著地降低(P<0.01);同时极显著地提高了SOD和CAT的活力(P<0.01),极显著地降低了MDA含量与LDH释放率(P<0.01)。(3)实时荧光定量PCR结果显示,H_2O_2能够极显著地降低ZO-1基因的转录量(P<0.01),与模型组比较,HEPs能够极显著的提高ZO-1基因的转录量(P<0.01);Western blot结果显示ZO-1蛋白的表达量与ZO-1基因类似。可见,猴头菇多糖对H_2O_2诱导氧化损伤状态下的IPEC-J2细胞具有保护作用。 陈新瑶 张建龙 董星 陈景杰 黄一帆 李健关键词:过氧化氢 氧化应激 ZO-1