胡冰心
- 作品数:4 被引量:7H指数:2
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 番荔枝内酯(ACGs)抑制口腔鳞癌SCC15细胞增殖的机制研究
- 背景: 口腔鳞状细胞癌(OSCC)是最常见的人类恶性肿瘤之一,它约占头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的90%以上,但其发病机理还不清楚。TCGA(The Cancer Genome Atlas)结果显示,表观遗传修饰蛋白...
- 胡冰心
- 关键词:口腔鳞状细胞癌番荔枝内酯细胞增殖NOTCH1蛋白
- 文献传递
- 人DLL1真核表达质粒的构建及过表达DLL1抑制人口腔鳞癌细胞SCC15的增殖被引量:4
- 2017年
- 目的:构建人全长DLL1基因真核表达质粒及过表达DLL1对人口腔鳞癌细胞增殖的影响.方法:PCR扩增人全长DLL1基因,酶切和测序鉴定后克隆至真核表达载体pCMV-Tag4并构建真核重组质粒DLL1/pC MVTag4,瞬时转染HEK293T细胞并通过实时荧光定量PCR(Q-PCR)和Western blot鉴定DLL1的表达;进一步检测DLL1在SCC15等3株人口腔鳞癌细胞中的表达;DLL1/pCMV-Tag4瞬时转染SCC15细胞,Q-PCR和Western blot检测过表达及MTT检测DLL1过表达对细胞SCC15增殖的影响.结果:真核重组质粒DLL1/pCMV-Tag4在HEK293T细胞中成功表达;DLL1在口腔鳞癌细胞中的表达高于正常口腔细胞;DLL1/pCMV-Tag4在SCC15细胞中获得表达且过表达DLL1抑制SCC15细胞的增殖.结论:人全长DLL1分子在HEK293T及SCC15细胞中获得表达,过表达DLL1抑制口腔鳞癌细胞SCC15的增殖.
- 粟芃芃叶健斌邱晓媚胡冰心李妍宁云山
- 关键词:NOTCH信号通路真核表达
- 番荔枝内酯体外抑制人胃癌细胞活性研究被引量:3
- 2017年
- 目的探究番荔枝内酯对人胃癌细胞体外活性的影响。方法分别采用MTT实验、黏附实验和划痕实验考察番荔枝内酯对4种人胃癌细胞AGS、MKN45、BGC823和SGC7901生长活性、黏附能力和迁移能力的影响。结果番荔枝内酯抑制人胃癌细胞AGS、MKN45、BGC823和SGC7901的生长并呈剂量依赖性,其IC50值分别为5.32、6.25、5.46、4.43μg/mL;抑制人胃癌细胞黏附能力并呈剂量依赖性;抑制人胃癌细胞的迁移能力并呈剂量依赖性。结论番荔枝内酯体外可以有效抑制人胃癌细胞的活性,有望被开发成治疗胃癌的候选药物。
- 叶健斌温俊杰林彦青吴丹琳胡冰心罗美群宁立军宁云山李妍
- 关键词:番荔枝内酯人胃癌细胞AGS细胞MKN45细胞BGC823细胞SGC7901细胞
- 人Notch2受体胞内区基因N2ICD的原核表达、纯化和鉴定
- 2016年
- [目的]构建含Notch2胞内区基因N2ICD的原核重组质粒,并在E.coli中表达。[方法]根据Gen Bank上N2ICD基因序列设计引物,用PCR从真核重组质粒p CMV-Tag4/N2ICD中扩增目的基因,克隆至携带GST标签的pGEX-4T-1原核表达载体中并转化E.coli BL21。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,收集菌体经反复冻融、溶菌酶破菌、超声破碎后,通过SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达形式,表达产物经谷胱甘肽琼脂糖树脂glutathione sepharose 4B纯化并经Western Blot鉴定。[结果]PCR获取了目的基因人N2ICD,并成功构建了重组表达质粒pGEX-4T-1/N2ICD,目的基因在E.coli中成功表达并以部分可溶性形式表达在上清中,纯化后经Western Blot鉴定表达产物分子量在110 k Da。[结论]重组N2ICD在E.coli中成功获得可溶性表达,为研究Notch2受体在细胞信号转导中的作用奠定了基础。
- 陈中标李飞李佩婷邱晓媚叶健斌胡冰心宁立军宁云山李妍
- 关键词:NOTCH2克隆原核表达纯化