李梦思
- 作品数:6 被引量:14H指数:3
- 供职机构:福建农林大学园艺学院更多>>
- 发文基金:福建省种业创新与产业化工程项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- ‘云香’水仙NtWRKYY1基因的分离与功能分析被引量:3
- 2017年
- 为明确WRKY转录因子在‘云香’水仙中的功能,该研究以‘云香’水仙为材料,克隆了WRKY基因,命名为NtWRKYY1(GenBank登录号为KX056495)。序列分析显示,NtWRKYY1基因开放阅读框(ORF)长度为510bp,编码169个氨基酸。多序列比对和系统进化树分析显示,NtWRKYY1编码蛋白含1个WRKY结构域和C2H2锌指结构(Cx4Cx23HxH),与AtWRKY57聚在一起,属于第Ⅱc类WRKY转录因子。组织表达和时空表达分析显示,NtWRKYY1基因在花中表达量高于根和叶,且在花瓣及副冠中的表达量随开花过程(花蕾期、始花期、盛花期、衰败期)呈上升趋势。植物激素和非生物胁迫分析显示,NtWRKYY1基因受脱落酸(ABA)、高温、干旱和盐诱导,受茉莉酸甲酯(JA)抑制,表明NtWRKYY1基因可能在‘云香’水仙花朵的衰老过程中起正调节作用,同时参与‘云香’水仙ABA、JA等激素信号转导及高温、干旱、盐碱等非生物胁迫过程的调控。利用In-Fusion克隆技术成功构建过表达载体pMDC140-NtWRKYY1,并采用农杆菌介导叶盘法转化烟草。RT-PCR和GUS染色结果显示,目的基因已成功导入烟草基因组中。
- 温秀萍孙申申杨菲颖李梦思李欢李科陈晓静
- 关键词:WRKY转录因子基因表达
- 鲜菌草与灵芝菌丝发酵菌质对奶牛产奶品质和血液生理生化指标的影响被引量:3
- 2017年
- 研究旨在观察鲜菌草与灵芝菌丝发酵菌质对奶牛产奶品质和血液生理生化指标的影响。选取产奶量相近,胎次(1~2)胎,泌乳中期,体重无显著性差异,遗传组成基本相似的荷斯坦奶牛10头,按统计学原理,随机分为试验组和对照组,每组各5头。试验组每天每头添加3.0 kg鲜菌草与灵芝菌丝发酵菌质替代等量的青贮,对照组饲喂基础日粮。试验组除饲喂日粮不同外,其余条件都与对照组保持一致。结果表明:试验组牛奶中乳脂率、乳蛋白率、乳糖率比CK分别提高了2.24%、0.99%、0.42%,体细胞数降低了4.46%,但差异不显著(P>0.05);菌质对奶牛血清中的总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三脂、总胆固醇、葡萄糖、尿素、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、磷等生化指标基本无影响,虽然试验组中Ca含量比CK含量高0.23 mmol/l,差异显著(P<0.05),但试验前后两组血清Ca含量均在正常范围内。鲜菌草与灵芝菌丝发酵后,菌草中的纤维素和半纤维素等被大量降解,而蛋白质、脂肪的含量却提高了,并同时产生了大量的代谢产物(如氨基酸),提高了奶牛的采食积极性和消化率;同时,灵芝菌丝体含有大量的菌丝多糖和三萜,可以提高奶牛免疫力,进而提高其产奶品质。
- 郑丹林占熺李梦思林辉
- 关键词:菌草奶牛
- ‘云香’水仙ACC合成酶基因NtACS1的克隆及遗传转化被引量:7
- 2017年
- 为探究多花水仙ACS基因的序列特征及功能,以‘云香’水仙盛花期花瓣为试验材料,根据‘云香’水仙花朵转录组数据信息,通过RT-PCR方法克隆出1个ACS基因,命名为NtACS1(GenBank KX082936);NtACS1开放阅读框(ORF)长度为552bp,编码183个氨基酸。编码蛋白质分子量约为20.6KDa,理论等电点为6.30,不稳定系数为65.49,属于不稳定的疏水性蛋白。通过qRT-PCR对‘云香’水仙不同时期花瓣和副冠中的NtACS1基因进行了表达分析,得到与‘云香’水仙花朵转录组数据中相同的结果:NtACS1基因在‘云香’水仙花瓣和副冠中的表达都是随着花衰老过程呈现逐渐下降的趋势,且NtACS1基因在花瓣和副冠中的表达峰值都在花苞期,表明NtACS1基因编码的蛋白是在乙烯生物合成途径的系统1发挥催化作用的ACC合成酶。成功构建了NtACS1基因的正义植物表达载体,并通过农杆菌介导法获得8株转基因烟草,PCR和RT-PCR检测显示其中有6株为阳性植株,初步证实NtACS1基因已导入烟草基因组中且在烟草中已表达。该研究结果为进一步分析NtACS1基因的功能和后续转化水仙延长其花期研究奠定了基础。
- 孙申申温秀萍杨菲颖李梦思李欢李科陈晓静
- 关键词:基因克隆延长花期ACS
- ‘云香’水仙NAC基因克隆及表达分析被引量:3
- 2017年
- 从‘云香’水仙转录组文库中筛选出1条NAC基因序列,采用PCR技术克隆得到其c DNA序列。序列分析表明,该NAC基因包含822 bp的开放阅读框,编码273个氨基酸,分子量30 903.9 u,命名为Nt NAC3153(Gen Bank登录号:KU375569)。理化性质分析和多重序列比对显示,Nt NAC3153蛋白是一个无跨膜区域的亲水性蛋白,在N端具有一段保守结构域。系统进化树分析表明,Nt NAC3153与同为单子叶植物的小果野芭蕉Ma NAC、二穗短柄草Bd NAC和小米Si NAC亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,Nt NAC3153基因能够被ABA、盐胁迫和高温诱导表达。研究表明:Nt NAC3153可能参与‘云香’水仙的抗逆调控机制。
- 李梦思赵潇俐吴用李欢李科陈晓静
- 关键词:NAC转录因子基因克隆非生物胁迫
- ‘云香’水仙NtNAC3153和NtNAC4729基因的克隆及遗传转化
- 中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis),石蒜科水仙属植物,是法国多花水仙的变种,在我国已经有一千多年的栽培历史。中国水仙具有花色素雅、花姿秀美和花香浓郁的特征,观赏价值很高,被称为“凌...
- 李梦思
- 关键词:NAC转录因子基因克隆生物信息学分析
- 文献传递
- 白花Ⅱ水仙组织培养研究
- 本试验以白花Ⅱ水仙为材料,探索了白花Ⅱ水仙的外植体消毒方法和适宜培养基。结果表明:白花Ⅱ水仙鳞茎盘消毒处理以25%的次氯酸钠溶液浸泡25min为好,不定芽诱导适宜培养基为:MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/L2,...
- 赵潇俐李梦思杨菲颖李科陈晓静
- 文献传递