张金鸽
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：四川大学华西口腔医学院口腔医学国家重点实验室更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人PD-L1在大肠杆菌BL-21中的表达、纯化和鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的分离纯化人程序死亡蛋白-1(PD-L1)基因,制备重组人PD-L1蛋白,为进一步研究PD-L1在肿瘤免疫逃逸中的作用和机制建立基础。方法通过RT-PCR分离纯化人PD-L1基因,并将其克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1中,经酶切,测序鉴定分析后,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达。产物经GST蛋白纯化系统进行纯化后,用10%SDS-PAGE及Western Blot分析鉴定。结果经RT-PCR分离纯化的PD-L1 cDNA分子由645 bp构成,编码相对分子量约25 KD的蛋白,并与GST形成融合蛋白。GST-PD-L1融合蛋白相对分子量约46 KD。Western Blot结果显示,该蛋白能被兔抗GST和抗PD-L1抗体识别。结论成功构建了PD-L1原核表达载体,并在大肠杆菌BL21中获得高效表达。
- 陈娇张金鸽王辉计宝辉孔祥丽张平
- 关键词：原核表达
