马丽娅
- 作品数：1 被引量：10H指数：1
- 供职机构：南昌大学生命科学与食品工程学院更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 春兰ISSR-PCR反应体系的建立和优化被引量：10
- 2008年
- [目的]为进一步从分子水平上研究春兰种群的遗传多样性奠定基础。[方法]以春兰基因组DNA为模板,通过单因子试验研究ISSR反应体系中主要成分对扩增结果的影响,以寻找适合春兰ISSR分析的反应体系。[结果]春兰的ISSR反应体系较适宜的扩增条件为：25lμPCR反应体积中,15.78μl双蒸水,2.5μl 1×CR buffer,1.1 UTaqDNA聚合酶,100 ng基因组DNA,2.0 mmol/L MgCl2,150μmol/LdNTPs,2μmol/L引物。最佳扩增程序为：94℃预变性5 min,然后进行40个循环;94℃变性45 s,复性温度比各引物的TM值略低1～2℃,45 s,72℃延伸75 s,循环结束后72℃延伸7 min,4℃保存。[结论]该优化系统的建立为进行春兰鉴定及种质遗传多样性分析提供了一个标准化程序。
- 马丽娅孙小琴贾文杰李恩香杨柏云
- 关键词：春兰ISSR反应体系优化
