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王双辉
作品数:
1
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供职机构:
浙江理工大学生命科学学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
岳学田
浙江理工大学生命科学学院
李娜
浙江理工大学生命科学学院
武玉梅
浙江理工大学生命科学学院
李新
浙江理工大学生命科学学院
李恭楚
浙江理工大学生命科学学院
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2010
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sCAR-PPAb基因的原核表达载体构建及重组蛋白的表达纯化
2010年
为获得腺病毒受体sCAR与掌叶半夏蛋白(PPA)的亚基B(PPAb)的融合蛋白,将PPAb基因克隆入已构建的原核表达载体pQE30-sCAR中,经PCR和测序鉴定正确的重组质粒pQE30-sCAR-PPAb,转化大肠杆菌M15后获得工程菌。该菌株经IPTG诱导后,高效表达出带有组氨酸标签以包涵体形式存在的融合蛋白sCAR-PPAb。包涵体经过尿素变性溶解、PBS稀释复性、Ni离子亲和层析柱纯化,获得目的蛋白。SDS-PAGE及Western blotting分析表明,在42 kD左右有一条明显的特异性蛋白条带。同时细胞实验结果表明融合蛋白sCAR-PPAb能提高Ad-EGFP对Kasumi-1的感染效率。
李娜
王双辉
岳学田
张艳红
仰毅
武玉梅
李新
牛娜
李恭楚
关键词:
PPA
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