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张小洪
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
暨南大学
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发文基金:
珠海市科技攻关计划项目
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相关领域:
生物学
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合作作者
胡佳
暨南大学
梁晓峰
暨南大学
龚映雪
暨南大学
郑阳阳
暨南大学
肖文娟
暨南大学
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胡佳
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兰州大学学报...
年份
1篇
2011
共
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酿酒酵母金属硫蛋白的表达、纯化及活性检测
被引量:3
2011年
通过PCR从酿酒酵母基因组DNA上扩增得到酿酒酵母基因CUP1编码的金属硫蛋白序列.将其编码序列克隆到质粒pTWIN1构建重组表达质粒pTWIN1-MT,转化大肠杆菌感受态细胞ER2566.重组融合蛋白CBD-intein1-MT在IPTG的诱导下得到表达,经SDS-PAGE和蛋白质印迹鉴定.用重组菌分别进行铜离子耐受性和吸收等实验,结果表明金属硫蛋白的表达增加了重组菌对铜离子的耐受性和积累量.用chitin亲和层析纯化重组蛋白,并由intein介导融合蛋白的自裂解.SDS-PAGE分析,纯化后的金属硫蛋白的纯度达到95%.纯化后的MT显示出很好的清除羟自由基的能力.
梁晓峰
龚映雪
肖文娟
胡佳
郑阳阳
张小洪
王峻梅
刘泽寰
关键词:
金属硫蛋白
酿酒酵母
原核表达
活性检测
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