于凡
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
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- 调控靶向Xklp2表达对肺鳞癌细胞放射线照射后γ-H2AX蛋白表达的影响
- 2019年
- 目的探讨调控靶向Xklp2(TPX2)表达对肺鳞癌细胞放射线照射后γ-H2AX蛋白表达及细胞核内γ-H2AX和MDC1斑点形成的影响。方法利用前期构建的稳定转染TPX2 shRNA质粒的SK-MES-1细胞和稳定转染TPX2过表达质粒的NCI-H226细胞,采用Western印迹检测4 Gy照射后0～24 hγ-H2AX蛋白表达,免疫荧光技术观察4 Gy照射后4 h细胞核内γ-H2AX和MDC1斑点形成情况。结果 4 Gy照射后0～24 h,TPX2干扰的SK-MES-1细胞和TPX2过表达的NCI-H226细胞中γ-H2AX蛋白表达水平均出现显著增加后逐渐下降的趋势,但在TPX2干扰的细胞中,各时间点γ-H2AX蛋白表达水平均显著高于单纯照射组(P<0. 05),而在TPX2过表达细胞中,各时间点γ-H2AX蛋白表达水平均显著低于单纯照射组。②照射后4 h,下调TPX2表达则γ-H2AX和MDC1核内斑点形成增加,而过表达TPX2则γ-H2AX和MDC1核内斑点增加幅度降低(P<0. 05)。结论照射后H2AX磷酸化及γ-H2AX和MDC1核内斑点形成变化,提示TPX2参与DNA损伤修复。
- 杨洁祝淑钗王玉祥管金磊王涛于凡甄婵军王肖肖
- 关键词：肺鳞癌细胞TPX2Γ-H2AXMDC1
- MAGE-A9对人乳腺癌MDA-MB-231细胞中P53转录活性及功能的影响
- 2013年
- 目的:探讨黑素瘤相关抗原-A9(melanoma-associated antigen,MAGE-A9)对人乳腺癌细胞中P53转录活性及功能的影响。方法:通过LipofectamineTM2000体外转染质粒pcDNA3.0、pcDNA3.0-p53、pCMV6-MAGE-A9和pcDNA3.0-p53/MAGE-A9至人乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR和Western blotting检测细胞中p21WAF1mRNA和蛋白的表达,荧光素酶报告基因分析检测细胞中p21WAF1启动子介导的荧光素酶表达活性,MTT法检测转染不同质粒对MDA-MB-231细胞增殖的影响。结果:转染pcDNA3.0-p53/MAGE-A9组MDA-MB-231细胞中p21WAF1mRNA和蛋白表达水平均明显低于pcDNA3.0-p53组[(0.15±0.01)vs(0.18±0.02),(0.03±0.00)vs(0.06±0.01);均P<0.05]。转染pcDNA3.0-p53质粒可以增强MDAMB-231细胞中p21WAF1启动子介导的荧光素酶的表达[(58.56±3.47)vs(1.00±0.12),P<0.01],转染pcDNA3.0-p53/MAGE-A9后,MDA-MB-231细胞中p21WAF1启动子介导的荧光素酶的表达较转染pcDNA3.0-p53组明显降低[(22.02±4.91)vs(58.56±3.47),P<0.05]。与pcDNA3.0组相比,pcDNA3.0-p53组MDA-MB-231细胞增殖率明显明显降低[(228.89±22.39)%vs(337.23±23.67)%,P<0.05];而pcDNA3.0-p53/MAGE-A9组MDA-MB-231细胞增殖率明显高于pcDNA3.0-p53组[(291.51±5.91)%vs(228.89±22.39)%,P<0.05]。结论:MAGE-A9可抑制MDA-MB-231细胞中P53的转录活性及细胞增殖。
- 吕伟华桑梅香王彬于凡单保恩
- 关键词：乳腺癌转录活性MDA-MB-231细胞
- 黑素瘤相关抗原-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义被引量：8
- 2015年
- 目的:探讨黑素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,分析其与食管癌患者临床病理学特征及其预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2010年9月至2010年11月住院手术切除的食管癌组织及距癌组织边缘5 cm以上且病理诊断证实为正常组织的癌旁组织标本各60例,同时选取5例该院前列腺癌住院患者术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测食管鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9和-A11蛋白的表达。结果:食管鳞状细胞癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的阳性表达率分别为45%(27/60)和66.67%(40/60),而相应的癌旁组织未发现MAGE-A9和-A11蛋白的表达。MAGE-A9蛋白的表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与组织学分级相关(P<0.05);MAGE-A11蛋白表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、组织学分级、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与临床分期、肿瘤大小呈正相关(P<0.05)。Log-Rank检验显示,MAGE-A9(P=0.037)和-A11(P=0.039)蛋白表达阳性的食管鳞状细胞癌患者和贲门腺癌患者的生存期均显著低于其表达阴性的患者。Cox多因素分析提示,MAGE-A9(P=0.026)和MAGE-A11(P=0.038)蛋白表达、组织学分级(P=0.026)、临床分期(P=0.008)及淋巴结转移(P=0.010)可作为整体生存的独立预后因素。结论:MAGE-A9和-A11蛋白是食管鳞状细胞癌的特异性抗原,似可作为食管鳞状细胞癌预后不良的预测指标。
- 谷丽娜桑梅香刘飞范晓杰连易水杜彦艳于凡单保恩
- 关键词：食管鳞状细胞癌抗原
- miR-1-3p通过调控STC2抑制人食管鳞状细胞癌细胞的恶性生物学行为
- 2024年
- 目的探讨miR-1-3p对人食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞的恶性生物学行为的影响及其可能的作用机制。方法利用基因表达数据库(GEO)筛选ESCC中差异表达的miRNA。采用qRT-PCR检测人ESCC细胞KYSE30、KYSE150、KYSE410、KYSE510和Eca109及正常食管上皮细胞HET-1A中miR-1-3p的表达水平。CCK-8试剂盒、划痕愈合和Transwell实验以及流式细胞术分别检测转染miR-1-3p mimic对ESCC细胞增殖、迁移和侵袭、凋亡能力的影响。使用生物信息学工具预测miR-1-3p的靶基因,Kaplan-Meier法分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中STC2表达水平与患者预后的关系。采用FISH检测miR-1-3p的亚细胞定位,双荧光素酶报告基因验证miR-1-3p与STC2的靶向关系。RNA免疫沉淀(RIP)实验检测miR-1-3phe STC2的结合。Western blot法检测转染miR-1-3p mimic对ESCC细胞中STC2及内质网应激相关蛋白p-PERK、p-eIF2α、ATF4表达水平的影响。CCK-8、划痕愈合、Transwell实验和流式细胞术分别检测过表达和敲低STC2对ESCC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响。结果ESCC细胞中miR-1-3p的表达水平均低于HET-1A细胞(均P<0.05),转染miR-1-3p mimic可抑制ESCC细胞增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05),促进ESCC细胞凋亡(均P<0.001)。生物信息学工具预测miR-1-3p的靶基因为STC2,ESCC组织中STC2的表达水平高于正常食管上皮组织,与预后呈负相关(均P<0.05)。miR-1-3p位于胞质,并可直接与STC2 mRNA结合。转染miR-1-3p mimic可下调STC2、p-PERK、p-eIF2α、ATF4蛋白的表达水平(均P<0.05)。过表达STC2可促进ESCC细胞增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05),抑制ESCC细胞凋亡(均P<0.05)。敲低STC2可抑制ESCC细胞增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05),促进ESCC细胞凋亡(均P<0.05)。结论miR-1-3p通过靶向调控STC2抑制ESCC细胞的恶性生物学行为,促进ESCC细胞凋亡,可能是通过抑制内质网应激发挥作用。
- 于凡王佳琪高常林司嘉鑫吕微贾云泷刘丽华
- 关键词：食管鳞状细胞癌内质网应激
- 肺腺癌组织RUNX3基因甲基化和蛋白表达与新辅助化疗敏感性的临床观察被引量：3
- 2021年
- 目的探讨肺腺癌组织runt结构域相关基因亚型3(RUNX3)甲基化状态和蛋白表达与新辅助化疗敏感性的关系。方法收集我院2018年9月至2019年9月就诊的116例ⅢA/ⅢB期肺腺癌患者的纤维支气管镜检组织标本,另收集30例肺鳞癌组织和30例肺部良性病变组织标本。采用免疫组化染色法和甲基化特异性PCR(MSP)检测组织中RUNX3蛋白表达和RUNX3甲基化状态。所有患者均完成2个周期新辅助化疗,采用RECIST 1.1版标准评价疗效。分析RUNX3蛋白表达和RUNX3甲基化状态与肺腺癌临床病理特征的关系。结果 TCGA数据库分析结果显示,RUNX3 mRNA在肺腺癌组织中表达显著下调(P<0.001)。RUNX3高表达组患者总生存率和无进展生存率优于RUNX3低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。良性对照组、肺鳞癌组、肺腺癌组组织RUNX3蛋白阴性表达率分别为3.33%(1/30)、23.33%(7/30)和55.17%(64/116),差异有统计学意义(P<0.001)。良性对照组、肺鳞癌组、肺腺癌组RUNX3基因甲基化率分别为10.0%(3/30)、16.67%(5/30)和31.90%(37/116),差异有统计学意义(P<0.05)。经Kappa一致性分析,肺腺癌组织RUNX3基因甲基化与RUNX3蛋白低表达结果一致性一般(Kappa=0.551,P<0.001)。肺腺癌组织RUNX3 mRNA甲基化和蛋白表达与吸烟史、新辅助化疗疗效有关(P<0.05)。结论 RUNX3基因在肺腺癌中呈高甲基化状态,是导致RUNX3蛋白表达下降的原因之一;RUNX3基因甲基化状态、RUNX3蛋白表达可以预测新辅助化疗疗效。
- 金辉耿楠于凡
- 关键词：肺腺癌RUNX3甲基化蛋白表达
- 胸腹腔镜联合食管癌切除及淋巴结清扫术视频要点被引量：3
- 2020年
- 1技术背景介绍食管癌位于我国恶性肿瘤发病率第5位及死亡率第4位,每年大约有10万新增病例,占全球50%以上。食管癌病因复杂,发病隐匿,目前公认的治疗方案是以手术为主、放化疗为辅的综合治疗。而传统开胸手术治疗创伤大,并发症多,恢复时间长,预后较差。经过多年的不断探索与发展以及腔镜技术的日益成熟,以三野清扫为目的的胸腹腔镜联合食管癌切除已成为一种趋势,其在切除范围、淋巴结清扫程度、切口疼痛程度、快速康复以及预后等方面较传统术式有明显优势,同时并发症发生率并未增加[1]。本视频旨在展示胸腹腔镜食管癌切除术的手术入路、操作要点及术后情况。
- 赵晓鹏于凡何旭王淼张浩然程净革王洪琰
- 关键词：食管癌淋巴结清扫视频
