王茹茹
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：山东农业大学生命科学学院作物生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 苹果MdAFS基因亚细胞定位表达载体的构建及分析
- 2017年
- 为研究萜烯合酶亚细胞定位的改变对植物萜类及其生长发育特性的影响,以青香蕉苹果(Malus domestica Borkh cv.White Winter Pearmain)果皮、菊花、酵母和拟南芥为材料,采用PCR技术分别克隆了α-法尼烯合酶基因(AFS)、Rubisco强启动子(Ru)、线粒体定位转运肽(Mit)与叶绿体定位转运肽(Pla),并利用plant CARE软件和Signal P4.1Server网站对所得启动子和转运肽序列进行了预测分析。结果表明Ru序列具备强启动子特有的TATAbox、CAATbox以及多种相关的激素响应元件,且所得线粒体和叶绿体定位转运肽也均预测到转运肽的功能。利用所得的以上序列分别构建了由Ru强启动子驱动的线粒体和叶绿体定位的AFS基因表达载体,并成功转化获得了转基因烟草植株,实时荧光定量PCR表明目的基因在转基因植物中有较高的表达,并且存在空间表达特异性。
- 丁瑞瑞王露王茹茹刘宇张元湖成妮妮
- 关键词：苹果亚细胞
- MdAFS细胞质和叶绿体定位表达对植物萜类代谢物的影响
- 萜类代谢化合物对固着生活的植物扮演者重要的作用，它包括初生代谢产物和次生代谢产物。由于萜类代谢种类繁多，功能多样，对萜类代谢的研究显得尤为重要。苹果α-法尼烯合酶（MdAFS）是α-法尼烯代谢途径的终端酶，直接决定α-法...
- 王茹茹
- 关键词：苹果叶绿体
- 植物非细胞自主性小RNA分子研究进展
- 2015年
- 非细胞自主性是RNA干扰的主要特点之一,表现为沉默效应可以在细胞、组织和生物个体间传递和扩散,可移动的小RNA分子在这种非细胞自主性的沉默扩散中发挥了核心作用。近年来的研究表明小RNA分子可以与转录因子、多肽和植物激素一样传递胞间信息,并以其特有的方式调控发育模式、响应环境胁迫、增强病毒抗性和维持转座子的沉默。综述了近年来在植物非细胞自主性RNAi研究中取得的主要进展,主要介绍了通过韧皮部和胞间连丝途径传递沉默信号的各种小RNA分子及其生物学作用、非细胞自主性小RNA的分子特征和运输效率的调控,并对存在的问题及其研究前景进行了展望。
- 邓帅张婷婷王茹茹刘宇张元湖
- 关键词：RNA干扰沉默效应小RNA分子特征
- 青香蕉苹果MdAFS基因序列与表达模式分析
- 2017年
- 以青香蕉苹果叶片为材料,研究青香蕉苹果‘White Winter Pearmain’α-法尼烯合酶(α-farnesene synthase,Md AFS)全长基因结构特征及编码蛋白质性质,分析Md AFS基因的诱导表达模式。采用生物信息学软件对Md AFS及其编码蛋白质进行详细分析,应用MEGA 6.0对不同物种来源的AFS构建系统进化树,利用q RT-PCR技术研究Md AFS诱导表达模式。α-法尼烯合酶基因(Gen Bank No:AY563622)全长1 731 bp,由576氨基酸组成,是α螺旋为主要构成元件的混合型蛋白。不同物种的α-法尼烯合酶氨基酸序列相似度低,但α-法尼烯合酶N端RRx8W和C端的H-α1loop具有高度保守性。非生物胁迫和激素信号能诱导Md AFS基因上调表达,且MV、ABA和Me JA诱导该基因上调表达更加明显。α-法尼烯合酶氨基酸序列相似度低,但蛋白三维结构相似;α-法尼烯合酶在蛋白结构和功能上具有单萜合酶特征,初步揭示了非生物胁迫和激素信号能诱导青香蕉苹果α-法尼烯代谢途径的关键酶Md AFS基因上调表达。
- 王茹茹邓帅丁瑞瑞赵荣荣张元湖
- 关键词：非生物胁迫
- 苹果MdAFS叶绿体定位表达对拟南芥萜类挥发物的影响被引量：1
- 2018年
- 以‘青香蕉’苹果(Malus×domestica‘White Winter Pearmain’)α–法尼烯合酶基因(MdAFS)为目标基因,构建叶绿体定位的植物过表达载体,并通过农杆菌介导遗传转化拟南芥,获得使MdAFS在叶绿体中过表达的拟南芥转基因株系。将pBI122-rbcS1-pla-MdAFS-GFP表达载体瞬时表达本氏烟,分析表明叶绿体定位肽能成功将MdAFS蛋白定位到叶绿体中。定量测定莲座期和盛花期拟南芥光合色素,结果显示,转基因拟南芥叶绿素和类胡萝卜素含量较野生型显著增加。qRT-PCR分析萜类代谢相关基因转录表达水平表明,尤其在盛花期,过表达MdAFS能显著影响萜类代谢基因表达上调。应用静态顶空固相微萃取法收集拟南芥挥发物并结合GC–MS分析鉴定萜类挥发物成分,转基因拟南芥中萜类挥发物含量和种类明显增加。这些结果表明,过表达MdAFS能显著影响萜类代谢流的重新定向,增加萜类代谢挥发物。叶绿体是萜类代谢工程一个理想的亚细胞空间。
- 王茹茹张婷婷刘宇吕东梅张元湖
- 关键词：苹果拟南芥AFS
