张蔓菁
- 作品数：8 被引量：23H指数：4
- 供职机构：昆明医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CD34抗体修饰的脱细胞血管支架的体内内皮化
- 2010年
- 目的研究CD34抗体修饰的脱细胞血管支架植入动物体内后募集循环中的内皮祖细胞参与再内皮化过程的性能。方法新鲜的羊前肢动脉经反复冻融和超高压处理,SDS彻底去除细胞,通过光交联法将CD34抗体固定于脱细胞血管内腔面。20只新西兰大白兔右下腹做一带蒂皮瓣,皮瓣供血动脉为股动脉的分支血管,血管移植部位选取股动脉,做1cm长的全段缺损,随机分为2组(n=10),实验组选用CD34抗体修饰的脱细胞血管支架,对照组用未修饰的脱细胞血管支架,显微外科端端吻合替代缺损的兔股动脉。术后通过对皮瓣色泽质地的观察,了解皮瓣的血供情况;行彩色多普勒、数字减影血管造影检查和病理切片观察移植血管的通畅情况及细胞黏附情况。结果实验组皮瓣术后血运较好,对照组皮瓣术后肿胀坏死。彩色多普勒、数字减影血管造影检查显示,实验组移植术后1周有3只动物发生血管闭塞,另7只动物在术后4周血管仍通畅、无明显狭窄;对照组术后1周无1只动物血管通畅。实验组术后4周解剖移植血管,H-E染色显示脱细胞血管支架表面形成连续融合单层细胞,管腔无明显狭窄;对照组术后1周解剖移植血管可见血栓形成,H-E染色显示血管腔内表面缺乏细胞覆盖。结论CD34抗体修饰的脱细胞血管支架在早期抗凝及通畅率上均优于未经修饰的脱细胞血管支架。
- 张蔓菁刘宾杨阳李杨鲁开化
- 关键词：血管内皮
- 过氧乙酸对脱细胞血管支架生物学特性影响的实验研究被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨使用体积分数为0.1％过氧乙酸处理脱细胞血管支架的生物相容性和生物力学特征,观察其作为生物材料消毒剂对于脱细胞血管支架材料生物特性的影响.方法 选取2.0 -2.5 kg大耳白兔10只,在无菌条件下切取新鲜的兔股动脉,经反复冻融与超高压处理后,以15μg/mlR-Nase A,150 μg/ml D-Nase Ⅰ核酸酶进行脱细胞处理,室温下放置于体积分数为0.1％过氧乙酸溶液中3h,对其进行组织学评估,观察其超微结构、生物力学,以及细胞毒性的测定.结果 经体积分数为0.1％过氧乙酸处理后的脱细胞血管支架,在组织结构、生物力学及细胞毒性方面与正常对照组之间无明显差异.结论 采用体积分数为0.1％过氧乙酸处理脱细胞血管支架,对其生物相容性和生物力学特性无明显影响,或许可以作为脱细胞组织工程血管生物支架消毒剂的一种选择.
- 刘宾李菲张蔓菁夏炜郭树忠鲁开化
- 关键词：组织工程血管过氧乙酸消毒
- 地塞米松对血管瘤内皮细胞分泌MMP-2的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨地塞米松对血管瘤的治疗作用机理。方法:取2月～18月小儿增殖期血管瘤标本原代培养血管瘤内皮细胞(hemangioma endothelial cells,HEC)。将不同浓度的地塞米松(dexamethason,DX)作用于3～5代生长旺盛的HEC,以MTT法筛选有效浓度。以有效浓度的DX作用于HEC,在不同时相点光镜下观察HEC形态,MTT检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期,Real-time PCR检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达量。结果:DX作用后,光镜下见内皮细胞发生坏死改变。MTT结果示吸光度降低,流式细胞术检测结果示G2期百分率增多,Real-time PCR检测示MMP-2表达量明显降低。结论:地塞米松可有效抑制血管瘤内皮细胞的增殖,可能通过抑制血管瘤内皮细胞分泌MMP-2,从而抑制了内皮细胞增殖、迁移及血管的形成。
- 伍尚敏张蔓菁刘宾杨婷婷郭树忠鲁开化
- 关键词：地塞米松血管瘤内皮细胞细胞培养
- 羊颈动脉脱细胞血管基质的制备及其生物相容性评价被引量：1
- 2010年
- 目的研究脱细胞血管基质快速高效的制备方法并对其进行生物相容性评价,为组织工程血管的研究寻找合适的支架材料。方法取20根长50mm新鲜山羊颈动脉经-80℃冷冻、37℃水浴复温,反复冻融3次,在506MPa、4℃条件下超高压处理20min,0.125%SDS中37℃振摇(100r/min)12h,彻底去除细胞后,行HE染色、Masson染色、扫描电镜观察及生物力学测定研究其组织结构的变化;Hoechst33258荧光染色和细胞DNA残留量分析评价脱细胞效果;通过接触细胞毒性实验、MTT活性测试及皮下埋植实验对制备的脱细胞血管基质进行生物相容性分析。皮下埋植实验取清洁级SD大鼠10只,体重200～230g,分为2组(n=5),实验组于大鼠背部皮下埋植结合物理化学方法处理的脱细胞血管基质,对照组埋植单纯物理方法处理的脱细胞血管基质,分别于术后1、2、3、4、8周取出行HE染色观察。结果 HE染色及Masson染色显示脱细胞血管基质无细胞成分残留,保持较完整的胶原成分;扫描电镜观察血管表面以胶原为主,适合细胞黏附;Hoechst33258荧光染色脱细胞血管基质材料未见明显阳性核染色;苯酚-氯仿提取脱细胞血管基质残留DNA含量,电泳检测分析显示其中DNA含量较正常血管显著降低;生物力学检测示脱细胞血管基质最大荷载时的应力及应变与正常血管比较差异无统计学意义,保持了正常血管的力学特征;接触细胞毒性实验与MTT法测定示脱细胞血管基质与细胞有良好的黏附性,细胞毒性为0～1级;实验组皮下埋植术后8周材料周围基本未见炎性细胞,对照组仍有明显淋巴细胞浸润。结论经反复冻融、超高压及小剂量SDS处理的脱细胞血管基质是一种构建组织工程血管的理想支架材料。
- 张蔓菁刘宾杨阳李杨鲁开化
- 关键词：组织工程血管脱细胞血管基质生物相容性山羊
- 冻干法保存脱细胞组织工程血管支架的实验研究被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨冷冻干燥技术长期保存脱细胞组织工程血管支架材料的可行性。方法:将制备的脱细胞组织工程血管支架预冷后置入-70℃、6.67×10-4kPa的冷冻干燥机内6h作冷冻干燥处理。通过对冷冻干燥处理前后脱细胞血管支架材料的组织,超微结构观察、生物力学评估、细胞毒性测定以及动物体内的组织相容性检测,研究冷冻干燥处理对脱细胞血管支架材料生物相容性和生物力学特性的影响。结果:冷冻干燥处理对于脱细胞血管材料的生物力学及生物化学特性没有明显影响,处理后的材料依然具有良好的体内、外生物相容性。结论:冷冻干燥处理作为脱细胞组织工程血管支架材料的长期储存方法是可行的。
- 刘宾张蔓菁夏炜鲁开化郭树忠
- 关键词：组织工程血管冷冻干燥
- 转化生长因子β1对长波紫外线照射皮肤成纤维细胞线粒体DNA 4977 bp缺失的影响被引量：5
- 2009年
- 背景:长波紫外线与人体皮肤光老化关系密切,线粒体的损伤是细胞衰老和死亡的分子基础。目的:观察长波紫外线照射对体外培养的皮肤成纤维细胞的线粒体脱氧核糖核酸缺失损伤的影响,以及转化生长因子β1对长波紫外线引起的线粒体DNA缺失有无保护作用。为皮肤光老化研究提供实验依据。设计、时间及地点:实验于2007-03/2008-04于解放军第四军医大学西京医院全军整形外科研究所完成。材料:转化生长因子β1为PerProtech公司产品;线粒体DNA 4977 bp引物由上海生工合成;长波紫外线光源为北京光学仪器厂生产;紫外线辐照计为北京师范大学光电仪器厂生产。方法:收集20～23岁成年男性包皮环切术后的皮肤组织12例,体外培养成纤维细胞。将细胞分组为对照组、长波紫外线累计照射达到30,60,90J/cm2组,半定量PCR检测DNA 4977 bp缺失情况。不同质量浓度转化生长因子β1(0.1,1,10μg/L)干预长波紫外线累积照射达90J/cm2的皮肤成纤维细胞。主要观察指标:观察不同累积照射剂量产生的DNA 4977 bp缺失;观察累积照射剂量90J/cm2后不同浓度转化生长因子干预对DNA 4977 bp缺失的影响。结果:体外培养的皮肤成纤维细胞经长波紫外线照射,长波紫外线累积剂量为长波紫外线60J/cm2后发生线粒体DNA 4977 bp缺失,长波紫外线90J/cm2时缺失加重。吸光度值和PCR产物电泳及条带密度扫描结果显示,在照射前2h加入不同剂量转化生长因子处理后,大剂量组(10μg/L)线粒体DNA表达降低,中、小剂量组与长波紫外线照射组比较,差异无显著性意义。结论:一定剂量(10μg/L)转化生长因子对体外培养的成纤维细胞线粒体DNA缺失起到保护作用。
- 刘垠刘流王继华鲁开化赵亚南张曦伍尚敏张蔓菁刘丹
- 关键词：长波紫外线成纤维细胞转化生长因子线粒体DNA光老化
- 反复冻融与超高压处理制备脱细胞组织工程血管支架的实验研究被引量：4
- 2009年
- 目的观察不同浓度核酸酶对经反复冻溶加超高压处理后兔股动脉的脱细胞效果。方法无菌条件下采取新鲜兔股动脉，去血管外膜后将材料分为未处理组、冻融组、超高压处理组、冻融＋超高压处理，后三组分别于-80℃冷冻2h、37℃水浴复温15min，上述冻融过程反复进行3次。5000大气压超高压（4℃）处理20min将供体来源细胞压碎，结合不同浓度核酸酶进行消化，脱去残留细胞碎片形成脱细胞血管支架。通过组织学和超微结构观察，对不同浓度核酸酶脱细胞效果进行评价，测定反复冻融加超高压处理对血管材料生物力学特性的影响。结果组织学显示，经反复冻溶加超高压处理后的血管材料，可在较短的时间内被较低浓度核酸酶除去血管支架内的供体细胞成分，脱细胞支架的主要生物力学性能指标与正常血管相比，无明显改变。结论反复冻溶加超高压脱细胞方法可以明显缩短脱细胞血管基质的制备周期，为脱细胞组织工程血管支架的快速高效制备提供一种新的思路和方法。
- 刘宾张蔓菁夏纬鲁开化郭树忠
- 关键词：组织工程血管超高压
- 超声空化法制备脱细胞血管支架生物学相容性的实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的检测经强度为300 W超声处理后的脱细胞血管支架的生物相容性。方法无菌条件下,采取新鲜兔股动脉反复冻溶+超高压处理后,利用核酸酶进行消化,脱去残留细胞碎片形成脱细胞血管支架。将强度为300 W的超声作用于脱细胞血管支架,并对处理后支架材料的生物学相容性进行检测和观察。结果经强度为300 W超声处理后的支架材料,其疏松化程度在明显提高的同时未发现明显的细胞毒性,且种子细胞可以长人材料内部。结论超声空化法处理后的脱细胞血管支架材料具有较好的组织相容性,可以为组织工程血管支架的研究提供新的思路和方法。
- 刘宾李菲张蔓菁鲁开化
- 关键词：组织工程血管超声生物相容性
