张帆
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 百合细胞悬浮体系构建及多糖含量测定的探索被引量：1
- 2018年
- 该文旨在研究百合悬浮体系构建及诱导百合多糖产生的最佳培养方案。首先采用不同取材部位及激素组合来诱导百合愈伤组织形成,将其扩繁进而构建起百合细胞悬浮体系;然后使用不同激素处理来诱导其产生次生代谢产物百合多糖,并通过苯酚硫酸法测定多糖含量。结果发现,百合愈伤组织诱导的最佳取材部位为叶柄,最佳激素配比为6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;百合悬浮细胞培养及诱导百合多糖产生的最佳激素配方为6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L,其多糖含量可达到3.8%。该项目可以用于指导百合细胞悬浮体系构建及百合多糖的生产等方面的研究。
- 张帆陈秋逸尤玉玲马芃锐赵凯郑冬超
- 关键词：百合多糖
- 重组风雨花凝集素在大肠杆菌中表达条件的优化
- 2012年
- 为提高重组表达质粒pET32c-ZGA在大肠杆菌中的表达量,对表达重组风雨花凝集素基因工程菌的培养条件进行优化筛选,对影响蛋白质表达量和工程菌生长的因素如pH值、诱导温度、IPTG、接种量、诱导时间、补充碳源形式、诱导时机、无机离子等进行了探索.经过优化,重组融合目的蛋白占菌体总蛋白的61.8%,比优化前提高了13.4%.条件优化后,pET32c-ZGA工程菌经过放大培养,获得6 g/L的湿菌体量,超声波破碎菌体,SDS-PAGE证实重组融合蛋白以包涵体形式表达.
- 张帆高顺温馨谢之易鲍锦库
- 关键词：大肠杆菌重组蛋白包涵体
- 化学修饰对川木通凝集素活性及构象的影响被引量：2
- 2009年
- 川木通干燥茎蛋白粗提液经DEAE-Sepharose离子交换柱和Sephacryl S-100分子筛分离后得到川木通凝集素(命名为CML)。Tricine SDS-PAGE分析表明CML的分子量为12.5 kDa,Sephacryl S-100分子筛分析CML的表观分子量为25.8 kDa,表明CML是由两个亚基组成的同源二聚体。过碘酸-希夫(periodic acid Schiff reacition,PAS)染色结果表明CML为糖蛋白,糖含量为12.2%。氨基酸残基修饰色氨酸(Trp)、精氨酸(Arg)和-SH CML凝血活性的必需基团。每分子CML中含有6个Trp。荧光光谱显示这些基团修饰后荧光强度都有不同程度的下降,最大发射峰位置也相应变化,表明这些残基修饰导致蛋白质构象变化。酪氨酸(Tyr)、苏氨酸(Ser/Thr)和组氨酸(His)修饰后,活性并没有变化,但荧光强度显著减弱,说明修饰后CML分子的活性中心的必需构象并没有受到破坏,但氨基酸的修饰导致色氨酸的微环境发生变化。
- 刘艳红张擘张帆季娜鲍锦库
- 关键词：化学修饰荧光光谱
- 玉竹凝集素的氨基酸残基修饰与荧光光谱研究被引量：2
- 2009年
- 玉竹凝集素(POL)的最大荧光发射峰位于328 nm处,比游离色氨酸(Trp)的最大荧光发射峰(348 nm)蓝移了近20 nm,说明Trp周围的极性较弱,处于疏水的微环境。化学修饰表明色氨酸和酪氨酸与其凝集活性无关。羧基的修饰导致活性降低60%,表明Asp/Glu是构成其凝血活性中心的必需氨基酸或是位于活性中心附近。二硫键的修饰使其活性丧失,表明二硫键是维持其活性中心的关键化学键。Lys残基的修饰凝血活性降低40%,表明该残基与其活性中心相关。组氨酸残基的专一性修饰导致凝血活性的完全丧失,表明组氨酸是构成其凝血活性中心的必需氨基酸。
- 徐雨张帆姚庆季娜鲍锦库
- 关键词：化学修饰荧光光谱
