王卫
- 作品数：15 被引量：124H指数：9
- 供职机构：南京中医药大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程项目国家中医药管理局度中医药行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胆南星发酵制品与混合蒸制品的鉴别研究被引量：8
- 2019年
- 目的:以猪胆汁及天南星、制天南星为原料分别制备发酵制胆南星及混合蒸制胆南星,以胆汁酸类成分为指标,建立以猪胆汁为炮制辅料的胆南星2种炮制品的薄层鉴别及HPLC-ELSD特征图谱。方法:采用硅胶G薄层板,以石油醚:丙酮:冰醋酸(11∶8∶0. 8)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂,建立薄层色谱鉴别方法。采用Agilent Eclipse XDB C_(18)(4. 6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈与0. 1%冰醋酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为1 m L/min,柱温为30℃,ELSD:漂移管温度为105℃,氮气流量为2. 5 m L/min,建立胆南星HPLC-ELSD特征图谱鉴别方法。结果:TLC和HPLC-ELSD图谱均显示发酵制胆南星可检测到游离型胆汁酸类成分猪胆酸(HCA)、猪去氧胆酸(HDCA)和鹅去氧胆酸(CDCA)3个特征成分,而混合蒸制胆南星中未检测出;混合蒸制胆南星可检测到结合型胆汁酸类成分甘氨猪去氧胆酸(GHDCA)和甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA) 2个特征成分,而发酵制胆南星中未检测出。结论:所建胆汁酸类成分的薄层色谱鉴别法(TLC)和高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)均可有效鉴别胆南星的发酵制品和混合蒸制品,为胆南星质量控制提供依据。
- 陈云陈劲松郁红礼吴皓王卫程梓烨单雪莲蔡宝昌
- 关键词：胆南星薄层色谱鉴别发酵蒸制
- 巴豆不同炮制品肠道毒性差异及炮制对巴豆脂肪油、总蛋白的影响被引量：9
- 2018年
- 为考察不同巴豆制霜过程对巴豆脂肪油、总蛋白及致肠道毒性的影响,将巴豆生品进行热压去油,冷压去油和淀粉稀释法炮制,得3种巴豆制霜品。小鼠灌胃给药,采用ELISA法测定小鼠血清中二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸含量,考察肠道通透性的变化;采用Western blot法测定不同肠段中紧密连接蛋白(occludin,claudin-1)表达变化,考察巴豆生品及其制霜品对肠道损伤的毒性差异。分别采用GC-MS和SDS-PAGE分析巴豆制霜前后脂肪油和总蛋白的变化。结果显示,巴豆生品能够显著增加小鼠肠道通透性和降低十二指肠、空肠紧密连接蛋白表达。制霜后小鼠肠道通透性和紧密连接蛋白表达均趋向正常,毒性降低。不同巴豆霜肠道毒性大小为:冷压巴豆霜>稀释巴豆霜≈热压巴豆霜。3种巴豆霜脂肪油成分组成一致,但总蛋白含量和组成具有明显差异。含量高低:冷压巴豆霜>热压巴豆霜>稀释巴豆霜,其中冷压和稀释巴豆霜总蛋白条带相对分子质量分布一致,热压巴豆霜总蛋白组成发生显著变化,条带减少,变淡。表明在巴豆制霜中,稀释和加热过程均能够降低蛋白含量,且加热导致部分蛋白变性失活。稀释和加热均能降低巴豆霜毒性,但加热过程减毒作用更显著,表明加热是巴豆制霜过程中的关键步骤。
- 单雪莲郁红礼吴皓王卫张元斌程梓烨陈云
- 关键词：紧密连接蛋白
- 醋制对商陆及商陆正丁醇部位中皂苷类成分含量的影响被引量：13
- 2017年
- 为研究醋制对商陆及商陆正丁醇部位皂苷类成分的影响,比较商陆中主要毒性成分商陆皂苷B(EsB)和商陆皂苷C(EsC)醋制前后含量的变化,依据商陆《中国药典》醋炙工艺,将商陆正丁醇部位进行模拟醋制;采用液质联用法对商陆正丁醇部位醋制前后皂苷类成分进行研究;采用HPLC-ELSD方法检测毒性成分EsC和EsB在商陆生品、醋制品中的含量,考察商陆醋制前后的含量变化。结果显示,商陆正丁醇部位中除商陆皂苷甲(EsA)以外,各商陆皂苷类成分含量均不同程度下降,皂苷类化合物组成显著变化,但醋制后未见新化合物生成;含量测定发现生商陆中EsC和EsB的质量分数分别为0.12%,0.20%,醋制后下降为0.48%,0.094%。表明醋制能够显著改变商陆及商陆正丁醇部位中皂苷类成分的组成,显著降低毒性皂苷EsC和EsB的含量,表明商陆采用醋制法炮制的科学性。
- 郁红礼张程超吴皓王奎龙王卫单雪莲
- 关键词：商陆ESCESB
- 法半夏炮制过程对半夏中毒蛋白凝集素蛋白的影响被引量：13
- 2020年
- 为探究法半夏炮制过程对其毒性成分凝集素蛋白的影响,阐释法半夏炮制解毒的科学内涵,该研究采用Western blot法半定量分析炮制前后半夏中活性凝集素蛋白的含量;以甘草汁、石灰水以及两者混合溶液浸泡的方法分别处理半夏及凝集素蛋白,考察炮制不同时间对毒性蛋白凝集素蛋白含量的影响;采用SDS-PAGE凝胶电泳分析炮制前后溶液及沉淀中凝集素蛋白的条带变化;采用MALDI-TOF技术对炮制前后的蛋白进行相对分子质量定性分析比较。结果显示,生半夏中含凝集素蛋白5.01%,而法半夏中仅含0.04%,表明炮制后活性凝集素含量显著降低;石灰水浸泡1 d、甘草汁浸泡3 d后,生品中凝集素含量显著降低,混合溶液浸泡的影响最大。定性分析发现,使用石灰水浸泡后,凝集素蛋白被分解为小分子的肽段,甘草汁浸泡,可促使凝集素蛋白变性沉淀。法半夏炮制过程中辅料甘草汁和石灰水浸泡均可破坏毒性成分凝集素蛋白结构,显著降低毒性成分凝集素蛋白的含量,此为法半夏炮制解毒机制之一。
- 李书晖郁红礼吴皓张元斌王卫
- 关键词：半夏毒性成分
- 发酵对胆南星中胆汁酸类成分的影响及胆南星中3种游离胆汁酸含量测定研究被引量：14
- 2018年
- 考察以猪胆汁为原料的胆南星发酵炮制品及混合蒸制炮制品中主要胆汁酸类成分的组成,建立发酵制胆南星中胆汁酸类成分的含量测定方法。以猪胆汁及天南星、制天南星为原料分别制备发酵法胆南星及混合蒸制法胆南星,采用HPLC-ELSD检测比较2种胆南星中胆汁酸类成分的差异;以3种游离胆汁酸类成分为指标,采用HPLC-ELSD检测发酵制胆南星炮制品中的胆汁酸类成分的含量。采用Agilent Eclipse XDB C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%冰醋酸水(55∶45)为流动相,流速为1 mL·min^-1,柱温为30℃,ELSD:漂移管温度为90℃,氮气流量为2.2 mL·min^-1。结果显示混合蒸制法胆南星中主要含有结合型胆汁酸类成分,发酵制胆南星中未见有结合型胆汁酸类成分,主要含游离型胆汁酸类成分。发酵制品中的3种游离型胆汁酸类成分猪胆酸(HCA)、猪去氧胆酸(HDCA)和鹅去氧胆酸(CDCA)均在定量范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率在95.99%104.3%,加样回收符合要求。研究结果表明,胆南星发酵过程可使得胆汁中的结合型胆汁酸类成分转化为游离型胆汁酸。所建方法可以有效控制发酵制胆南星中胆汁酸类成分的含量。
- 陈云郁红礼吴皓王卫李瑶程梓烨单雪莲
- 关键词：胆南星
- 炮制对天南星科4种有毒中药毒性成分凝集素蛋白的影响被引量：18
- 2019年
- 为研究炮制对天南星4种有毒中药半夏、掌叶半夏、天南星、白附子中毒性成分凝集素蛋白的影响,该研究采用Western blot(蛋白质印迹)法半定量分析4种有毒中药生品及其不同炮制品中凝集素蛋白含量,并以生姜汁浸泡、白矾水浸泡以及单独加热煮制的方法分别处理4种生品及4种凝集素蛋白,考察不同辅料及加热方法对凝集素蛋白的影响。结果显示,掌叶半夏、半夏、天南星和白附子生品中各凝集素蛋白的质量分数分别为7.3%,4.9%,2.7%,2.3%,清半夏中半夏凝集素的质量分数为0.027%,姜半夏、制天南星和制白附子中均检测不到活性凝集素蛋白,表明炮制后活性凝集素含量显著降低;且随着白矾水浸泡时间或加热时间的延长,生品中凝集素含量逐渐降低。而单独生姜汁浸泡对生品中凝集素蛋白的含量几乎无影响。不同辅料及加热煮制的方法直接处理凝集素蛋白对其产生的影响与对生品产生的影响一致。故复制法以白矾浸泡及加热煮制的炮制方法可促使有毒中药中毒性成分活性凝集素蛋白的含量降低,这是有毒中药毒性下降的关键。该研究以Western blot法检测天南星科有毒中药毒蛋白凝集素蛋白的含量水平可作为炮制程度的评价方法。
- 郁红礼王卫吴皓沈敏张元斌李书晖
- 关键词：天南星科毒性
- 姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制研究被引量：15
- 2016年
- 为探索姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制,该研究采用掌叶半夏毒针晶诱导的小鼠腹腔炎症模型,观察姜辣素对小鼠腹腔炎症渗出液中炎症介质PGE2的影响;采用大鼠腹腔巨噬细胞体外培养模型,以上清液中TNF-α和IL-1β为指标,研究姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶的致炎作用;采用扫描电镜法观察姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激后巨噬细胞表面形态的改变;采用巨噬细胞-中性粒细胞共培养模型,考察姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶对中性粒细胞迁移的影响。结果显示,姜辣素可以显著抑制掌叶半夏毒针晶所致的小鼠腹腔渗出液中PGE2的生成;姜辣素可以显著抑制掌叶半夏毒针晶诱导巨噬细胞释放炎症因子,并具有一定的量效关系;扫描电镜显示,姜辣素可以显著抑制巨噬细胞吞噬掌叶半夏毒针晶及细胞膜破损,并能显著抑制掌叶半夏毒针晶诱导的中性粒细胞迁移。姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制可能是抑制了包括巨噬细胞激活、炎症因子释放、中性粒细胞迁移聚集的致炎毒性。
- 金羊平吴皓郁红礼潘耀宗陈叶青王奎龙张程超王卫
- 关键词：姜辣素掌叶半夏巨噬细胞扫描电镜中性粒细胞趋化
- 醋制对商陆促利尿作用的影响及其机制研究被引量：9
- 2019年
- 目的探索毒性中药商陆醋制前后对机体利尿作用及相关指标的影响。方法灌胃给予盐水负荷模型大鼠商陆醋制前后的水煎液,测定给药5h内尿量变化、血浆抗利尿激素(ADH)、醛固酮(ALD)、心房钠尿肽(ANP)含量及肾脏水通道蛋白AQP2、AQP3、AQP4表达水平。结果商陆醋制前后均能导致大鼠尿量显著增加(P<0.01),醋制品较生品组大鼠尿量有显著增强(P<0.05);商陆生品仅高剂量可显著降低血浆ADH水平(P<0.01),同时有降低ALD、增加ANP水平的趋势,但无显著性差异;商陆醋品则可显著降低血浆ADH、ALD水平,升高ANP含量(P<0.05～0.01);商陆生品可显著抑制肾脏中AQP2、AQP3和AQP4蛋白表达(P<0.05～0.01),醋制后可显著抑制AQP2、AQP3蛋白表达水平(P<0.01),对AQP4蛋白表达与模型组相比无显著性影响,且醋制品较生品抑制AQP3蛋白表达更显著(P<0.05)。结论商陆经醋制后仍具有较强的利尿作用,且分子水平的效应比生品更强。商陆利尿作用的机制除与其改变机体体液代谢相关的激素水平外,还可能与其抑制肾脏远曲小管和集合管AQPs蛋白表达,进而抑制水的重吸收有关。
- 程梓烨郁红礼吴皓王卫张元斌单雪莲陈云李书晖曹婧
- 关键词：商陆醋制利尿作用抗利尿激素心房钠尿肽水通道蛋白
- 狼毒醋制前后对小鼠肠道毒性及结肠水通道蛋白表达的影响被引量：11
- 2018年
- 为研究狼毒炮制前后毒性变化规律,以氯仿为提取溶剂,富集狼毒二萜类成分毒性部位,并将氯仿提取后药渣以95%乙醇及水依次提取,得非氯仿部位;并以相同方法提取狼毒醋制后的氯仿提取部位。小鼠灌胃给药,以粪便含水量、十二指肠及结肠含水量及小鼠结肠组织的水通道蛋白AQP1,AQP3,AQP4蛋白表达水平为指标,考察氯仿提取部位与非氯仿部位,及醋制前后狼毒的肠道毒性变化。研究结果显示,狼毒氯仿毒性部位可导致小鼠粪便及十二指肠、结肠肠道含水量显著升高,并导致结肠AQP1蛋白表达水平显著降低,AQP3,AQP4蛋白表达水平显著增高,且氯仿部位的肠道毒性作用显著高于非氯仿部位;醋制后粪便含水量、十二指肠及结肠含水量均显著下降,结肠中AQPs蛋白表达趋向正常。结果表明狼毒氯仿毒性部位可导致小鼠腹泻、肠道水肿,其肠道毒性作用与其干扰结肠中水通道蛋白的表达、促使肠道水液转运失常相关;醋制能够降低狼毒的肠道毒性,表明中药传统醋制法炮制狼毒的科学性。
- 刘莲郁红礼王奎龙吴皓王卫张元斌于生尹厚庆
- 关键词：狼毒水通道蛋白
- 猪牛羊胆汁HPLC指纹图谱研究被引量：8
- 2018年
- 为有效控制猪、牛和羊胆汁质量,采用高效液相色谱法（HPLC）,以AcclaimTMRSLC 120 C18色谱柱（3.0 mm×100mm,2.2μm,120）;在柱温35℃下,以乙腈-1%高氯酸为流动相体系,0.5 m L·min-1流速梯度洗脱,200 nm波长检测,以中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2004A版）生成指纹图谱。以对照品归属各共有指纹峰,并采用蒸发光散射检测器（ELSD）和液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）验证。结果显示,猪、牛、羊胆汁色谱图分别有14,9,8个共有指纹峰,各相似度均大于0.92。以甘氨猪脱氧胆酸（GHDCA）、牛磺胆酸（TCA）分别作为猪胆汁和牛、羊胆汁HPLC指纹图谱的参照物,方法学考察结果符合指纹图谱建立要求,各共有指纹峰相对保留时间RSD小于1.5%,相对峰面积RSD均小于5.0%。归属猪胆汁共有指纹峰有牛磺猪脱氧胆酸（THDCA）、牛磺鹅脱氧胆酸（TCDCA）、甘氨猪脱氧胆酸（GHDCA）和甘氨鹅脱氧胆酸（GCDCA）,牛、羊胆汁共有指纹峰有牛磺胆酸（TCA）、牛磺鹅脱氧胆酸（TCDCA）、甘氨胆酸（GCA）、甘氨鹅脱氧胆酸（GCDCA）和甘氨脱氧胆酸（GDCA）。研究结果表明,猪牛羊胆汁主要成分为结合型胆汁酸,猪胆汁与牛羊胆汁中的胆汁酸类成分存在显著性差异;三者的HPLC指纹图谱,特征性强、重复性好,可用于鉴别猪牛羊胆汁,控制胆汁质量。以快速液相色谱柱建立指纹图谱,可在HPLC系统分析,简便快速,具有可操作性。
- 李瑶郁红礼王卫毛善虎王奎龙吴皓
- 关键词：猪胆汁胆汁酸指纹图谱高效液相色谱法
