吕璐
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2022年
- 本研究参考非洲猪瘟病毒(ASFV)国内分离株SY18株的CP204L基因(编码p30蛋白),进行人源偏嗜性密码子优化,并分别构建表达载体pET-32a-p30和pCMV-2×Flag-p30。利用原核表达系统获得pET-32a-p30重组蛋白,并以该融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备了抗ASFV p30蛋白的单克隆抗体。SDS-PAGE分析发现,在16℃、1 mmol/L IPTG条件下诱导6 h后,该p30重组蛋白主要表达在包涵体中且表达量中等,蛋白分子量约为48 kDa。通过酶联免疫吸附实验(ELISA)、蛋白印迹法(Western blot)和间接免疫荧光法(IFA)检测获得的单克隆抗体3C2和4A3。结果显示,两株单克隆抗体均具有良好的免疫特性,且3C2株具有Western blot效价。本研究中p30原核重组蛋白及其单克隆抗体的制备为进一步探究p30磷酸化修饰及功能解析奠定基础,并为ASFV特异性诊断技术提供了必要的生物材料。
- 吕璐吕璐于婉琪谢振华张萌刘英楠叶建强叶建强秦爱建陈宗艳陈宗艳
- 关键词：非洲猪瘟病毒单克隆抗体免疫特性
- K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2019年
- 研究分别将K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的gp85基因以及env基因分别克隆到原核表达载体pColdⅠ以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-env。pCold-K-gp85转化BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析发现,该Gp85重组蛋白主要表达在包涵体中。利用纯化后Gp85重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了抗ALV-KGp85蛋白的多克隆抗体。间接免疫荧光以及Westernblot试验进一步证明,所获得的抗Gp85蛋白的多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-K-env质粒以及感染ALV-K的DF-1细胞内表达的Env蛋白。以上研究结果为进一步探究ALV-K宿主范围,细胞受体鉴定及亚群特异性诊断技术研究奠定了基础。
- 吕璐胡明月吕璐刘勇李拓凡谢菁刘勇刘勇秦爱建叶建强
- 关键词：GP85基因多克隆抗体
- 鸡Hsp60基因的克隆表达及多克隆抗体制备被引量：2
- 2018年
- 研究对鸡Hsp60基因进行了扩增以及原核与真核表达载体构建。构建的原核表达载体GST-HSP60经IPTG诱导,SDS-PAGE分析获得了Hsp60的融合表达蛋白。采用纯化的GST-HSP60蛋白免疫小鼠制备抗Hsp60多克隆抗体。Western blot以及间接免疫荧光分析证明,所制备的抗Hsp60多克隆抗体不仅能识别转染真核表达载体pcDNA3.1-Hsp60表达的外源性鸡源Hsp60蛋白,而且能有效识别内源性鸡源以及人源的Hsp60蛋白。这些Hsp60基因表达载体的构建以及抗Hsp60蛋白特异性多克隆抗体的制备为进一步研究Hsp60生物学功能及其在家禽疫病中的潜在作用奠定了基础。
- 武琥琮倪杰谢菁李拓凡吕璐吕璐秦爱建吕璐
- 关键词：HSP60多克隆抗体
- 三个不同品系不同性别高邮鸭生长曲线的拟合和分析被引量：5
- 2016年
- 为研究三个不同群体(闭锁群、新组建群和保护区群)不同性别高邮鸭的生长发育规律,试验采用Gompertz、Logistic和Von Bertalanffy三种生长曲线模型拟合分析方法,测定了高邮鸭从出生到10周龄体重并进行了相应周龄体重拟合。结果表明:三个不同群体高邮鸭6周龄前生长速度较快,公、母鸭的体重值基本一致,6周龄后公鸭生长速度明显快于母鸭;Gompertz模型拟合结果更加接近于实际值;公、母鸭的生长拐点分别在5.0,4.5周龄,新选育的高邮鸭新品系拐点周龄稍早于闭锁群。
- 王聪赵南南陈明亮吕璐张汤杰
- 关键词：高邮鸭性别体重
- 鸡Shp-Shp-2基因的克隆表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2018年
- Shp-2被认为与细胞生长调控及肿瘤发生密切相关。为探究鸡Shp-2在禽类疾病中所起作用,研究对鸡源Shp-2基因进行了克隆、表达及多克隆抗体制备。利用同源重组技术,将Shp-2分别插入pGEX-6P-1原核表达载体以及pcDNA3.1真核表达载体中,并获得可溶性GST-Shp-2原核融合表达产物。将纯化的GST-Shp-2蛋白免疫小鼠制备了抗GST-Shp-2多克隆抗体。间接免疫荧光试验以及Western blot分析证明制备的多克隆抗体不仅能与外源性高表达的Shp-2反应,而且也能很好地识别人、鸡及小鼠的内源性Shp-2蛋白。Shp-2表达载体的构建、表达产物及获得的小鼠多克隆抗体,为进一步研究鸡Shp-2生物学功能及其在禽类疾病中所起的作用奠定了基础。
- 谢菁李拓凡姜琰敏吕璐陆琦吕璐邵红霞谢泉叶建强
- 关键词：SHP-2克隆多克隆抗体
