卢实 作品数:9 被引量:41 H指数:5 供职机构: 吉林农业大学农学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 转基因生物新品种培育专项 吉林省科技发展计划基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
不同发芽床和贮藏时间对玉米发芽力的影响 被引量:5 2018年 种子萌发特性是农作物种子检验的重要质量指标,发芽床是测定种子萌发的重要载体。本试验选用5个玉米杂交种种子为试验材料,设置3种发芽床和2种贮藏时间,采用三因素随机区组试验设计,研究不同发芽床和贮藏时间对玉米种子发芽率和发芽势的影响。试验结果表明,发芽床种类、种子贮藏时间和不同品种的发芽势存在显著差异。用国产发芽纸作为发芽床的发芽势最高,进口发芽纸的发芽势居中,沙床的发芽势最低;新种子比贮藏一年的种子发芽势高。发芽率的测定结果表明,发芽床种类和不同品种对种子的影响达到显著水平,而种子贮藏时间对发芽率的影响未达到显著水平。用国产发芽纸作为发芽床的种子发芽率最好,稍差的为进口发芽纸床,沙床的发芽率最低。 冯咏琪 王丕武 曲静 于淼 吴律 吴楠 卢实 关淑艳关键词:发芽势 发芽率 发芽床 hrpZ_(Psta)在转基因大豆中定量表达与疫霉根腐病和灰斑病抗性相关研究 被引量:12 2015年 以T5转hrpZPsta基因大豆JN29-705-15和JL30-187为材料,利用实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real Time PCR,qRT-PCR)检测了目标基因在转基因大豆不同组织中的表达量,分别利用下胚轴侵染法和叶面喷施法鉴定疫霉根腐病抗性和灰斑病抗性,并分析目的基因表达量与疫霉根腐病和灰斑病抗性的相关性。结果表明:hrpZPsta基因在大豆的叶、茎、根、籽粒中均有表达,二个株系平均相对表达量分别为8.2/6.1、0.9/0.7、6.5/4.6和0.8/0.7;T5转hrpZPsta基因大豆抗疫霉根腐病和灰斑病能力与野生型相比均有所提高,JN29-705-15对疫霉根腐病抗性从感病提高到中抗,而JL30-187从中抗提高到抗病;hrpZPsta基因在叶中的表达量也与抗灰斑病能力呈正相关,与病情级别呈极显著负相关。试验结果初步证明了外源基因hrp ZPsta在大豆植株中的表达量与受体植株对疫霉根腐病和灰斑病抗性存在一定的相关性。 谷晓娜 刘振库 王丕武 张卓 马建 曲静 张君 付永平 卢实 郑成忠 刘婷婷关键词:大豆 疫霉根腐病 灰斑病 抗性 广谱抗病基因chi和hrpZpsta双价植物表达载体的构建及其在大豆中的遗传转化 大豆(Glycine max)是我国重要的油料经济作物,种子中含有丰富的蛋白质及油质,营养成分完全,其中包括矿物质和多种维生素。但在生产过程中,真菌性病害严重限制了大豆产量与品质的提升。以大豆灰斑病为例,作为大豆主产区的... 卢实关键词:农杆菌介导法 文献传递 大豆查尔酮还原酶基因CHR1的功能研究 被引量:6 2014年 为了验证查尔酮还原酶基因CHR1在大豆苷元合成中的作用,文章克隆了CHR1基因并构建了RNA干扰表达载体pCPB-CHR1-RNAi,将载体转化受体大豆品种"吉农28"中,以期抑制CHR1基因的转录。通过农杆菌介导的遗传转化和PCR检测得到4株T0代阳性植株,13株T1代阳性植株。Southern blotting结果表明,功能元件以单拷贝的形式整合到大豆的基因组中。利用实时荧光定量PCR法(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)测定CHR1基因在mRNA水平上的表达量,结果表明,转基因大豆植株中CHR1的表达量与未转化的受体大豆相比降低了60%~99%;高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)检测到合成大豆苷元过程中的前体物质异甘草素的含量降低了38.7%。该RNA干扰机制在转录水平上抑制了CHR1基因的表达。 吴楠 王丕武 李丹 代力强 郑成忠 卢实 才源 张卓 曲静 夏海丰关键词:大豆 大豆苷元 RNA干扰载体 两个大豆品种转hrpZ_(Psta)基因后代对大豆灰斑病的抗性分析 被引量:5 2013年 大豆灰斑病是由真菌类病原菌引发的,能导致大豆植物体整株死亡的恶性植物病害。hrpZpsta基因所编码的激发子harpin蛋白,已被证实能够通过引起植物过敏性反应来提高植株机体对多种病原菌的抗性。将含有hrpZpsta基因的植物表达载体转化到大豆品种吉农17和吉农29中,以所得的T4代株系为试验材料,通过分子生物学方法与人工接菌方式对其进行检测。Southern blot和RT-PCR鉴定结果表明hrpZpsta基因能够在吉农17和吉农29的T4代转化株系中稳定的遗传和表达,并且转化植物后代对灰斑病病原菌的抗性较受体品种明显提高。此外,不同大豆受体品种对灰斑病的抗性存在差异。 尹俊琦 王楠 周莹 卢实 吴楠 曲静 张卓 王丕武关键词:大豆灰斑病 抗病性鉴定 抗性评价 玉米大斑病抗性基因的QTL定位 被引量:2 2020年 为通过分子标记辅助选择培育聚合多个抗大斑病基因的玉米品种,以自选系旅958和外引系AM293为亲本,构建了1个包括248份F2∶3家系的分离群体,通过对作图群体人工接种大斑病菌叶片残体,同时利用SSR分子标记通过毛细管电泳绘制作图群体的遗传连锁图谱,利用完备区间作图法对控制玉米大斑病的抗性基因进行QTL定位,结果共检测到4个玉米大斑病抗性QTL,分别位于1、2和8号染色体,其中3个QTL与前人定位的结果一致。位于第一连锁群中的qRNCLB-1-1,在2015年和2016年试验中均被检测到,平均解释表型变异达到35.91%。第八连锁群中检测到的qRNCLB-8-1和qRNCLB-8-2,可分别解释表型变异的19.06%和8.67%。第二连锁群中检测到1个新的QTL位点qRNCLB-2-1,可解释表型变异的6.49%。 张默 王丕武 卢实 张卓 曲静 关淑艳关键词:玉米大斑病 抗性基因 毛细管电泳 QTL 玉米秃尖性状的遗传模型分析及SSR标记 被引量:11 2015年 秃尖是影响玉米产量的重要数量性状,试验以不秃尖玉米自交系"666"和秃尖玉米自交系T6093为亲本,通过对P1、P2、F1、F2、B1、B26个基本世代联合分析,对玉米的秃尖性状进行了遗传模型分析。结果表明:玉米果穗秃尖性状的最适模型是E-1模型,符合2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性多基因混合模型,B1、B2、F23个世代的主基因遗传率分别为64.41%、64.00%和77.07%,微效多基因遗传率分别为25.24%、0和12.31%,玉米的秃尖性状主要受主效基因控制,受环境因素的影响很小。根据SSR标记结果,将控制玉米果穗秃尖性状的2个主效基因初步定位于玉米的第2条染色体和第7条染色体。 才源 李凯 姜涛 王丕武 卢实 吴楠关键词:玉米 秃尖 SSR标记 绿色木霉纤维二糖水解酶基因cbhⅡ的克隆及其在粟酒裂殖酵母中的表达 被引量:2 2012年 采用粟酒裂殖酵母诱导表达系统进行绿色木霉纤维二糖水解酶基因cbhⅡ的表达研究。通过PCR方法从绿色木霉基因组DNA中克隆到长度为1611bp并含有信号肽序列的cbhⅡ基因;将其插入到粟酒裂殖酵母诱导型表达载体pESP-2的Pnmt1启动子下游,得到重组质粒pESP-2-cbhⅡ;利用电转化方法将其转入粟酒裂殖酵母SP-Q01细胞中,通过对酵母转化子质粒DNA的PCR和双酶切鉴定,得到了含有cbhⅡ基因的酵母转化子,对转化子进行诱导培养后提取酵母总蛋白,进行SDS-PAGE电泳检测,得到一条约为81kD的目的蛋白条带;利用DNS法对酵母转化子上清液中的纤维二糖水解酶活性进行测定,结果表明,酶活力最大值为165U/mL。以上结果证明:cbhⅡ基因在Pnmt1启动子控制下在粟酒裂殖酵母中成功地获得表达,并且cbhⅡ自身的信号肽可以被粟酒裂殖酵母正确的识别,并将表达产物分泌至胞外。 付永平 宋冰 王丕武 卢实关键词:绿色木霉 纤维素酶 粟酒裂殖酵母 酶活力 广谱抗病基因chi和hrpZpsta双价表达载体的构建及其在大豆中的遗传转化 被引量:2 2015年 大豆的真菌性病害已经成为了限制大豆产量增长及品质提高的主要原因,利用基因工程技术培育出具有广谱性抗病能力的大豆新品种,已成为目前提高大豆抗性的有效途径之一。本研究构建了含2种广谱抗病基因chi和hrp Zpsta的双价植物表达载体,利用农杆菌介导技术导入大豆中,获得了能够在转录水平上表达2种外源抗病性基因的转基因大豆。对经抗性筛选得到的阳性苗及后代植株进行PCR检测、Southern杂交、荧光定量PCR检测,共得到T0代阳性植株7株,T1代阳性植株27株。转化植株的基因组在整合外源基因时出现不同情况,chi-hrp Zpsta双价载体分别以单价和双价两种形式随机整合到受体大豆基因组中并且能稳定遗传,同时在转录水平上亦有不同。 卢实 王丕武 曲静 马建 张卓 吴楠 才源关键词:大豆 SOUTHERN杂交 荧光定量PCR