熊丽曼 作品数:3 被引量:19 H指数:2 供职机构: 新疆大学生命科学与技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
应用SRAP标记鉴定甜瓜种子纯度 被引量:11 2012年 以甜瓜的3份代表性种质资源为供试亲本,制定2个杂交组合,用SRAP(sequence related amplified polymorphism)标记对2种甜瓜杂交种子纯度进行鉴定与分析,筛选出适合该杂交种纯度鉴定的多态性SRAP引物,从而为甜瓜的分子标记辅助育种研究奠定基础。结果显示:在42个引物组合对2个杂交品种的亲本筛选中,共有37对引物组合具有多态性,多态性引物组合达到88.1%。杂交组合皇后×安农(A)和杂交组合K-413×安农(B)的种子纯度分别为94.19%和94.05%。 熊丽曼 王贤磊 高兴旺 王文玲 李冠关键词:甜瓜 相关序列扩增多态性 分子标记 种子纯度 甜瓜抗病基因同源序列的克隆与分析 被引量:7 2011年 为了获得新的甜瓜抗病基因同源基因(RGA),我们根据NBS-LRR类抗病基因保守区设计兼并引物组合,以抗病甜瓜品种基因组DNA为模板进行PCR扩增,经筛选、分类与基因测序,获得7个甜瓜RGA序列,其中821与324两个RGA为本研究首次发现.将得到的序列与已知甜瓜RGA序列进行分析、比对,将重复的RGA合并,通过对不同RGA序列同源分析,发现甜瓜CC-NBS-LRR类与TIR-NBS-LRR类RGA的不同分布特征与不同RGA之间的相互关系,如MRGA10与MRGH5可能起源于同一基因.通过对RGA的遗传分析与比较基因组学分析,发现甜瓜RGA序列与抗病基因之间的对应关系,如抗枯萎病基因Fom-1和抗番木瓜环斑病基因Prv存在于nbs47-3(MRGH11)与MRGH21之间,其中候选抗病基因MRGH8推测为Fom-1;候选抗病基因MRGH9、MRGH10之一为Prv. 王贤磊 高兴旺 张铁钢 王文林 熊丽曼 韩瑞 李冠关键词:抗病基因 甜瓜 同源序列 克隆 At2基因双T-DNA植物表达载体的构建 被引量:2 2012年 以甜瓜品种‘MR-1’为试材,采用PCR技术,扩增出了At2基因并在两端添加BamHⅠ和SacⅠ酶切位点。结果表明:在NCBI上进行BLAST显示其氨基酸序列与GeneBank中已公布的At2基因的同源性为99%;经DNAMAN软件分析,核苷酸序列同源性为99.43%。将其连接在中间表达载体G-pPTN133上,得到替换了GUS基因的中间载体A-pPTN133。A-pPTN133再经ScaⅠ酶切后,插入到经ScaⅠ酶切的pPTN133^-中,构建成双T-DNA植物表达载体At2-pPTN133。经酶切和PCR鉴定证明了所构建载体的正确性。 王文玲 王贤磊 熊丽曼 高兴旺 李冠关键词:双T-DNA 植物表达载体 无选择标记