任超
- 作品数:4 被引量:15H指数:2
- 供职机构:北京农学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市重点实验室开放基金北京市教委科技项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- Vero及Vero-dst细胞对犬瘟热病毒敏感性比较被引量:7
- 2011年
- 目的为了更好地分离犬瘟热病毒(CDV)并确诊犬瘟热,本实验比较了Vero及Vero-dst细胞对此病毒的敏感性。方法将CDV标准毒株Snyder Hill株及临床犬瘟热阳性犬组织匀浆分别接种Vero及Vero-dst两种细胞,通过观察细胞病变、检测病毒滴度(TCID50),并通过RT-PCR法进行比较,分析两种细胞对CDV的敏感性。结果接种病毒后Vero细胞盲传5代始终未见细胞病变,而Vero-dst细胞12 h出现了明显的合胞样细胞病变,且RT-PCR扩增出了CDV基因特异性片段。结论 Vero-dst细胞对CDV表现了良好的敏感性,是体外分离培养CDV的一个有效细胞系。而所本实验中使用的Vero细胞并不适于CDV的分离与培养。另外,本实验利用Vero-dst细胞从临床犬瘟热阳性病例中成功分离到了野毒株,并确定其毒力较标准毒株毒力强,可用于进一步的研究。
- 任超霍桂桃陈益山陈丽张兰兰李佳陈武赵德明
- 关键词:犬瘟热病毒VERO细胞
- 猪磷酸二酯酶4B2的原核表达和活性鉴定
- 2010年
- 使用RT-PCR方法扩增猪磷酸二酯酶4B2基因,将其克隆到表达载体,经PCR和测序鉴定的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白表达。结果显示,目的基因片段大小为1718 bp,与GenBank公布的猪PDE4B2基因序列同源性为99.7%。表达的重组蛋白以包涵体和可溶性蛋白两种形式存在。Western blotting检测结果表明,蛋白质大小约为66 ku,通过液相检测重组蛋白的cAMP-PDE活性为51.46%。制备的多克隆抗体有良好的特异性,为进一步检测天然蛋白PDE4B2和筛选PDE4B2的特异性抑制剂奠定了基础。
- 陈丽姜代勋任超陈益山李佳陈武
- 关键词:原核表达WESTERNBLOTTING多克隆抗体
- 实时荧光定量PCR检测犬GAPDH基因被引量:1
- 2010年
- 建立犬3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的qPCR检测体系,为犬功能基因mRNA水平的定量分析提供有用的方法学基础。对反应体系进行优化,建立了基于SYBR GreenI染料技术的real-time PCR方法。结果表明,其标准曲线相关系数达到0.999,扩增效率为105.8%,熔解曲线为特异性单峰,组内变异系数(CV%)为0.25-2.8,组间变异系数(CV%)为1.31-2.85。该研究所建立的荧光定量RT-PCR法灵敏、稳定、高效,为犬GAPDH基因作为内参基因用于犬相关基因定量表达分析奠定了基础。
- 李佳姜代勋陈益山任超陈丽张岩陈武
- 白芍水提物对cAMP-磷酸二酯酶活性影响及其抗炎效果观察被引量:7
- 2010年
- 检测白芍水提物对中性粒细胞cAMP-磷酸二酯酶(PDE)活性影响,并观察其对大鼠角叉菜胶致足肿胀和大鼠佐剂性关节炎病理模型的作用,探讨其抗炎机理和效果。结果显示,白芍水提物对中性粒细胞cAMP-PDE活性具有极显著的抑制作用(P<0.001),并能显著抑制(P<0.05)大鼠角叉菜胶致足肿胀和大鼠佐剂性关节炎足肿胀。研究表明,白芍水提物可能通过抑制cAMP-PDE活性,升高炎症细胞cAMP水平发挥抗炎作用,其抗炎成分有待于进一步研究。
- 陈益山巩忠福姜代勋李佳陈丽任超穆祥陈武
- 关键词:白芍磷酸二酯酶抗炎