王学敏
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：沈阳农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 抗性候选基因GmMIOX4的表达分析、克隆及过表达载体的构建
- 2016年
- 将两个不同抗性大豆品种灰皮支黑豆和辽豆15人工接种大豆胞囊线虫3号生理小种(SCN3),利用实时荧光定量PCR技术,对SCN3侵染后的早期和线虫完成一个整个生活史时的Gm MIOX4基因相对表达量变化进行分析。结果表明:在SCN3侵染下,辽豆15根内的Gm MIOX4基因在25 dpi时,相对表达量升高,而灰皮支黑豆根内的Gm MIOX4基因在10 dpi时被诱导表达,相对表达量达到最高值,表明该基因在此时期发挥一定作用。线虫侵入大豆根内10 d是其通过合胞体吸取寄主营养从而维持正常生长发育的时期,在10 dpi该基因被诱导表达,使其合胞体结构发生改变,从而抑制线虫发育,最终导致死亡或使灰皮支黑豆根内成虫数量减少,起到抗病效果。随后以抗性品种灰皮支黑豆根系总RNA为模板,利用RT-PCR技术获得了939 bp的Gm MIOX4基因的CDS序列,克隆得到质粒p GEM-MIOX4,再以得到的Gm MIOX4序列为材料构建过表达载体p CAM-MIOX4,为进一步研究Gm MIOX4基因功能奠定了基础。
- 刘婷杨若巍王学敏于佰双王惠段玉玺
- 关键词：大豆胞囊线虫实时荧光定量PCR克隆
- 线虫胁迫下大豆肌醇加氧酶活力研究
- 2018年
- 为确定大豆胞囊线虫侵染大豆根部后,肌醇加氧酶活力的变化,以感病品种辽豆15和抗病品种灰皮支黑豆、哈尔滨小黑豆和小粒黑豆为试验材料,在人工接种大豆胞囊线虫3号生理小种后,利用肌醇加氧酶(MIOX)酶联免疫试剂盒检测肌醇加氧酶活力的变化情况。结果表明,在接种后的第5天,感病品种辽豆15酶活力达到最大值,约为对照组的1. 61倍。而抗病品种哈尔滨小黑豆、灰皮支黑豆和小粒黑豆分别在接种后的第10天、第15天、第5天肌醇加氧酶活力达到最高,分别是对照组酶活力的1. 46,1. 51,1. 85倍。
- 王学敏王晗王超王爽于佰双陈井生王惠段玉玺
- 关键词：大豆大豆胞囊线虫酶活力
- GmHS1pro-1基因的表达研究与亚细胞定位
- GmHS1pro-1基因是不同于抗性位点Rhg1和Rhg4的新抗性候选基因,其功能与表达模式仍未明确.本论文使用实时荧光定量PCR研究了在大豆孢囊线虫(Heterodera glycines Ichinohe)3号生理小...
- 杨若巍王学敏李爽杨悦王惠段玉玺
- 关键词：大豆孢囊线虫抗性基因
- 大豆肌醇加氧酶基因响应线虫胁迫的表达分析被引量：2
- 2017年
- 肌醇加氧酶通常与植物细胞壁的合成以及诱导合胞体发育相关。为确定大豆胞囊线虫侵染大豆根部后,肌醇加氧酶基因表达水平的变化,以感病品种辽豆15和抗病品种灰皮支黑豆、哈尔滨小黑豆和小粒黑豆为试验材料,在人工接种大豆胞囊线虫3号生理小种后,利用实时荧光定量PCR检测肌醇加氧酶家族基因表达量。结果表明,抗病品种中GmMIOX2基因均在接种后5d表达量达到最大,而感病品种变化并不明显。GmMIOX4基因在抗病品种灰皮支黑豆、哈尔滨小黑豆和小粒黑豆中表达量分别在接种后5d,20d和10d显著高于感病品种的表达量。表明GmMIOX2和GmMIOX4基因与大豆胞囊线虫发育调控相关。通过扩增Gm MIOX基因的CDS序列,构建GFP融合表达载体p CAMBIA1303-MIOX2和p CAMBIA1303-MIOX4,农杆菌浸润法注射本氏烟叶片进行亚细胞定位观察,GmMIOX2蛋白主要分布在细胞膜,GmMIOX4蛋白主要分布在细胞质和细胞膜。生物信息学分析表明,GmMIOX2和GmMIOX4蛋白结构域主要由α螺旋构成,蛋白序列进化分析发现GmMIOX2和GmMIOX4分别与拟南芥At MIOX1、At MIOX4亲缘性较近。
- 王学敏杨若巍王超陈井生王惠段玉玺
- 关键词：大豆胞囊线虫亚细胞定位
