尹金宝
- 作品数:7 被引量:29H指数:4
- 供职机构:广东医学院更多>>
- 发文基金:珠海市软科学研究计划项目国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 氯离子通道阻断剂对大鼠离体海马神经元凋亡的影响被引量:2
- 2010年
- 目的通过观察氯离子(Cl-)通道阻断剂对一氧化氮(NO)供体3-吗啉斯德酮胺(SIN-1)诱导的大鼠离体海马神经元凋亡的效应,探讨Cl-通道在缺血性脑损伤中的作用。方法离体培养12d的SD大鼠海马神经元,随机分为正常对照组、SIN-1处理组、SIN-1处理后和Cl-通道阻断剂组,对各组神经元分别在相应的时间点进行Hoechst荧光染色观察凋亡细胞数和MTT实验定量检测神经元的存活率。结果SIN-1能明显诱导神经元凋亡(P<0.05),SITS和DIDS呈剂量依赖性地抑制NO诱导的神经元损伤,提高神经元的存活率,与SIN-1组相比差异显著(P<0.05)。结论Cl-通道阻断剂对NO诱导的大鼠海马神经元凋亡有一定的保护作用。
- 常全忠张淑玲蔡仕宁尹金宝
- 关键词:氯离子通道海马凋亡
- 氯通道电流在离体大鼠海马缺血缺氧性神经元凋亡中的变化及SITS的拮抗作用被引量:5
- 2011年
- 目的:观察氯通道电流在NO诱导大鼠海马神经元损伤中的变化。方法:离体培养12d的SD大鼠海马神经元,随机分为正常对照组、SIN-1处理组和SIN-1处理后加氯通道阻断剂SITS组,观察细胞凋亡情况,全细胞膜片钳技术记录神经元氯通道电流。结果:3组神经元凋亡率比较,差异有统计学意义(F=3.120,P=0.006)。NO处理后的神经元氯通道电流增加;SITS能部分抑制神经元损伤后氯通道电流的增加。结论:氯通道可能参与了NO诱导的离体海马神经元损伤。
- 钟志超范洪领尹金宝郑原印许黎娟常全忠
- 关键词:氯通道
- 氯通道阻断剂对一氧化氮诱导培养大鼠海马神经元凋亡的影响
- 目的:探讨氯通道阻断剂(DIDS)对一氧化氮(NO)供体SIN-1诱导大鼠海马神经元凋亡及其PARP-1和AIF蛋白表达的影响。
方法:采用培养12天的SD大鼠海马神经元,在确定SIN-1和DIDS的最佳使用浓度后...
- 尹金宝
- 关键词:海马神经元凋亡诱导因子
- 文献传递
- 新生大鼠离体海马神经元原代培养方法及鉴定被引量:9
- 2012年
- 目的:建立一种稳定的生后大鼠离体海马神经元的培养方法。方法:无菌环境下将出生24 h内SD大鼠断头取脑分离海马,经消化后差速贴壁,采用无血清培养基进行培养,倒置显微镜下观察不同时间段细胞生长形态变化:采用Hoechst33258与NeuN抗体双染方法鉴定神经元。结果:采用差速贴壁后,使用无血清培养基培养的神经元生长良好,纯度较高,12 d时经鉴定神经元纯度可以达到92%以上。结论:差速离心法后可以采用无血清培养神经元,培养的神经元具有纯度高,结果稳定的优点,该方法为以后进行相关的研究奠定了基础。
- 尹金宝常全忠韩宇东
- 关键词:海马神经元细胞培养
- DIDS对SIN-1诱导大鼠海马神经元凋亡及PARP-1/AIF表达的影响被引量:3
- 2012年
- 目的观察氯通道阻断剂4,4'-二异硫氰基芪-2,2'-二磺酸(DIDS)对NO诱导的大鼠离体海马神经元凋亡的保护作用。方法离体培养12 d的SD大鼠海马神经元,随机分为正常对照组、3-吗啡斯德酮亚胺(3-morpholinosyndnomine,SIN-1)处理组、SIN-1+DIDS组。对各组神经元分别在相应的时间点用MTT法测定细胞生存率、Hoechst 33258测定凋亡百分数、免疫化学荧光分析检测凋亡信号蛋白PARP-1/AIF的变化、Western blot分析凋亡蛋白Caspase-3的变化。结果 DIDS呈剂量依赖性地抑制SIN-1诱导的神经元损伤,减少凋亡发生数目,并能抑制损伤所引起的Caspase-3的激活、削弱PARP-1/AIF的表达。结论氯通道可能参与了NO诱导的海马神经元损伤,氯通道阻断剂DIDS的保护作用可能与削弱PARP-1/AIF的表达有关。
- 李曦尹金宝钟志超范洪领许黎娟郑原印蔡仕宁常全忠
- 关键词:凋亡氯通道
- 氯通道阻断剂对NO诱导离体大鼠海马神经元凋亡的保护作用被引量:12
- 2009年
- 目的观察氯通道阻断剂SITS和DIDS对NO诱导的大鼠离体海马神经元凋亡的保护作用。方法离体培养12d的SD大鼠海马神经元,随机分为正常对照组、NO处理组、NO处理后使用氯通道阻断剂组,对各组神经元分别在相应的时间点进行Hoechst荧光染色观察凋亡细胞数和MTT实验定量检测神经元的存活率,Western blot分析凋亡信号分子Caspase-3的变化。结果SITS和DIDS呈剂量依赖性地抑制NO诱导的神经元损伤,并能抑制损伤所引起的Caspase-3的激活,提高神经元的存活率。结论氯通道阻断剂对NO诱导的大鼠海马神经元凋亡有一定的保护作用。
- 常全忠张淑玲尹金宝蔡仕宁
- 关键词:氯通道阻断剂NO海马神经元凋亡CASPASE-3
- 电压依赖性氯通道在3-吗啉斯德酮亚胺诱导的大鼠海马神经元凋亡中的作用被引量:8
- 2010年
- 目的探讨氯通道与缺血性脑损伤的关系。方法离体培养12d的SD大鼠海马神经元,分为4组:正常对照组、3-吗啉斯德酮亚胺(SIN-1)处理组(SIN-11.0mmol.L-1作用18h)、SIN-1+4-4-二异硫氰茋-2,2′-二磺酸组(DIDS,0.1mmol.L-1作用18h)及SIN-1+4-乙酰氨基-4′-异氰酸茋-2,2′-二磺酸组(SITS,0.5mmo.lL-1作用18h)。DNA荧光染色观察神经元形态及检测凋亡数目的变化;免疫荧光染色观察神经元两种电压门控氯通道(ClC-2/ClC-3)的表达;全细胞膜片钳技术记录神经元氯通道电流。结果Hoechst33258染色显示,正常对照组、SIN-1处理组、SIN-1+SITS组和SIN-1+DIDS组神经元凋亡百分数分别是:(18.61±0.59)%,(50.43±0.56)%,(23.37±0.52)%和(23.37±0.84)%;两种氯通道ClC-2/ClC-3在正常神经元上存在;SIN-1处理后的神经元氯通道电流较正常增加55%~56%;氯通道阻断剂SITS和DIDS分别能抑制氯通道电流的30%~40%和50%~60%。结论电压依赖性氯通道可能参与了SIN-1诱导的神经元凋亡,氯通道可能参与缺血性脑损伤过程。
- 常全忠张淑玲尹金宝
- 关键词:氯通道神经元海马