田欢欢
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- GPS2对血管发生的调控及其作用机制研究
- 血管的发生不仅在机体正常发育过程中至关重要，也在诸如伤口愈合、心脏出血、肿瘤发生等疾病中发挥重要功能。血管的出现和成熟是一个极其复杂而又十分协调的过程，涉及到一系列受体的激活以及多种信号通路之间的精确调节和动态平衡。血管...
- 田欢欢
- 关键词：基因敲除胚胎发育
- GPS2基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞的永生化及其增殖凋亡的检测被引量：1
- 2016年
- 目的利用SV40大T抗原(SV40LT)过表达慢病毒建立永生化的GPS2野生与敲除的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)系,并检测GPS2敲除对MEF增殖及凋亡的影响。方法构建p CDH-Flag-SV40LT-GFP慢病毒表达载体,并进行病毒包装。分离胚胎发育9.5 d(E9.5d)的MEF细胞,感染SV40LT慢病毒,连续传代培养50代以上,把仍存活且状态良好的GFP阳性细胞视作永生化成功的MEF细胞。利用高内涵细胞成像分析仪检测永生化MEF细胞的增殖情况,采用AnnexinⅤ/PI双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡。结果成功构建p CDH-Flag-SV40LT-GFP慢病毒表达载体,获得滴度为4.03×108pfu/ml的病毒。分离E9.5d MEF细胞并感染上述病毒,阳性细胞扩大培养并稳定传代50代以上,成功建立了永生化的MEF细胞系。GPS2敲除MEF细胞的增殖能力明显低于野生型,而二者由于血清撤除所引起的凋亡并无明显差异。结论敲除GPS2抑制MEF细胞的增殖。
- 田欢欢任广明詹轶群杨晓明尹荣华
- 关键词：成纤维细胞永生化细胞增殖
